- 蔡依婕;上官雪茹;云大和;张海乾;何义姝;谭强来;曾臻;
[目的]利用毕赤酵母对牡蛎防御素CgDef和鲎抗菌肽TtT1进行融合表达。[方法]查询DBAASP数据库获得CgDef和TtT1的氨基酸序列，基于生物信息学和毕赤酵母密码子偏好性分析，利用GGCCGG连接肽序列构建重组质粒pPICZαA-CgDef-TtT1,重组质粒经SacⅠ酶切线性化后电转化到毕赤酵母X-33感受态细胞中，使用Zeocin抗性筛选阳性转化子，甲醇诱导表达后进行SDS-PAGE、Western blotting分析验证，运用滤纸片琼脂扩散法分析抑菌活性。[结果]生物信息学分析预测CgDef-TtT1呈钉状三维结构，分子量为10 516.45 Da,等电点为9.12,能在毕赤酵母体内稳定表达；筛选到一株能分泌表达重组CgDef-TtT1的工程菌；其诱导表达上清对革兰氏阳性和阴性细菌均有较好的抑菌活性，其中单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌抑菌圈直径分别为(1.76±0.17)cm、(1.69±0.21)cm,表明对革兰氏阳性菌的抑菌效果更为明显。[结论]成功构建1株重组毕赤酵母X-33/pPICZαA-CgDef-TtT1,分泌表达的融合蛋白的抑菌谱广，尤其对革兰氏阳性菌的抑菌活性更为显著，为其工业化生产开发提供物质基础。
2025年03期 v.35;No.208 269-274+289页 [查看摘要][在线阅读][下载 1602K] - 张玲芳;杜娟;瞿姗娜;朱明宇;汪洋;胡翰;刘滨磊;
[目的]利用shRNA慢病毒载体构建敲低CTNNB1的A549细胞系，检测其对细胞增殖迁移及对趋化因子CCL4表达的影响。[方法]设计靶向CTNNB1基因的shRNA序列，克隆至pLKO.1慢病毒载体中得到重组干扰质粒。运用三质粒系统包装慢病毒；转导A549细胞后用梯度稀释法得到阳性单克隆细胞；采用Western blotting和qRT-PCR检测CTNNB1及其下游基因的mRNA和蛋白质表达水平；采用实时无标记细胞分析实验检测细胞增殖能力，通过细胞划痕实验评估细胞迁移能力。[结果]成功构建稳定敲低CTNNB1的A549细胞系，与A549-shNC相比，A549-shCTNNB1细胞中CTNNB1的mRNA表达降低(1.01±0.05 vs 0.40±0.004,P<0.000 1),β-catenin的蛋白表达降低(0.95±0.10 vs 0.47±0.16,P<0.05);细胞增殖有减缓的趋势，增殖相关基因COX2、CCND1、c-MYC的mRNA表达降低(0.978±0.02 vs 0.66±0.09,P<0.01);MMP2/9的mRNA表达降低(0.98±0.001 vs 0.20±0.08,P<0.000 1),MMP2/9蛋白表达降低(0.96±0.05 vs 0.70±0.05,P<0.05),细胞迁移能力减弱(0.91±0.02 vs 0.69±0.05,P<0.01);CCL4的mRNA表达上调(1.87±0.39 vs 6.27±0.60,P<0.001)。[结论]敲低CTNNB1的A549细胞增殖速度减缓，迁移能力减弱，且趋化因子CCL4的mRNA表达上调。
2025年03期 v.35;No.208 275-282+324页 [查看摘要][在线阅读][下载 2661K] - 王晓岩;李翠;李俊侠;尚子淇;赵明刚;甄帅;李旭;薛梅;
[目的]探究糖原累积症Ia型患儿的遗传学病因，以期为临床治疗及遗传咨询提供依据。[方法]收集患儿临床资料，对患儿进行全外显子组测序，Sanger测序验证突变位点，生物信息学软件对突变位点进行致病预测和功能分析。通过查询HGMD数据库，绘制G6PC1基因错义突变、无义突变和移码突变图谱。[结果]患儿主要临床症状为肝肿大，双肾结石，右肾积水。患儿G6PC1基因经全外显子组测序检出复合杂合突变，分别为c.261G>A(p.W87*)和c.497T>C(p.V166A)。两个突变在参考人群千人基因组、ExAC数据库、gnomAD数据库和神州基因组数据库中没有发现。根据ACMG指南和指南应用建议，两个突变均被评级为可能致病。生物信息学分析两个突变位点在不同物种的蛋白序列中高度保守，G6PC1 c.261G>A突变导致翻译终止，蛋白结构发生改变。统计G6PC1基因突变位点，加上本研究的1个新发现突变，共142个突变位点。其中错义突变最多，占比59.86%,其次是移码突变(16.20%)和无义突变(15.49%)。[结论]G6PC1基因c.261G>A和c.497T>C复合杂合突变导致糖原累积症Ⅰa型，拓宽了糖原累积症Ⅰa型疾病基因突变谱。
2025年03期 v.35;No.208 283-289页 [查看摘要][在线阅读][下载 2421K]
- 崔雨;柯志强;苏正定;
[目的]建立一种可工业化的3-甾酮-Δ~(1 )-脱氢酶(KstD)上游纯化的新方法。[方法]实验以T4噬菌体中的T4溶菌酶为基础，对其进行改造，利用重组溶菌酶与高分子聚合物聚乙烯亚胺(PEI)偶联应用于表达KstD的大肠杆菌工程菌的细胞破碎以及初步纯化。[结果]成功构建了MBP-SN-T4L溶菌酶，其最佳表达条件为18℃、0.4 mmol/L IPTG下诱导表达4 h。表达后的纯化程序为：50 mmol/L Tris—HCl缓冲溶液中溶菌酶浓度为10 g/L,含有KstD酶的大肠杆菌菌泥浓度100 g/L,pH 7.0,反应30 min后加入终浓度为0.25%的聚乙烯亚胺，搅拌分离。[结论]成功建立了一套应用于工业快速大批量生产蛋白质的上游纯化方法，获得目的蛋白含量约为传统纯化方式所得蛋白的96.23%。
2025年03期 v.35;No.208 290-295页 [查看摘要][在线阅读][下载 1342K] - 窦清泉;张彦龙;宿婷;
[目的]从5株具有抗变异链球菌能力的乳酸菌中，筛选出具有防治龋齿应用潜力的益生乳酸菌。[方法]通过测定5株乳酸菌的自聚能力、疏水性、表面酸碱电荷、胞外多糖产量和黏附性，评价定植能力，测定5株乳酸菌的产酸性、腐蚀性、药物敏感性和自身生物膜形成能力，评价安全性，经16S rDNA鉴定筛选乳酸菌的种属。[结果]5株乳酸菌中菌株D45具有最高的自聚能力为52.86%(P<0.05),良好的表面疏水性和表面酸碱电荷，具有最高的胞外多糖产量为0.134 mg/mL(P<0.05),牙齿黏附性为18.58%(P<0.05),5株乳酸菌的产酸性和对牙齿的腐蚀性均较低，同时菌株D45具有较好的药物敏感性以及较低的自身生物膜形成能力，鉴定菌株D45为鼠李糖乳杆菌。[结论]筛选出1株胞外多糖产量高，牙齿黏附性好，具有较高的安全性的鼠李糖乳杆菌D45,为以后防治龋齿益生菌疗法的应用提供优良菌株。
2025年03期 v.35;No.208 296-303页 [查看摘要][在线阅读][下载 1615K] - 姚璐晔;陆嘉虞;田雨森;王苏皖;陆星宇;吴凌天;
[目的]获得1株产脂肪酶的贝莱斯芽孢杆菌，考察确定其产酶的最优条件。[方法]采用鉴别培养基和对硝基苯酚法测脂肪酶活力获得一株脂肪酶酶活力高、生产周期短的菌株；通过单因子优化和多因子的交互试验考察培养基组分和发酵条件对菌株脂肪酶活力的影响，进一步通过生长曲线考察了菌株在最优条件下的生长状态和脂肪酶活力变化。[结果]筛选获得一株高产脂肪酶的菌株Bacillus velezensis LT-2;菌株LT-2产脂肪酶的最优发酵条件为：蔗糖10 g/L,酵母浸出粉10 g/L,硫酸铵8.50 g/L,氯化钠1 g/L,橄榄油乳化液20 mL/L,初始pH值7.50,温度31.50℃,接种量7%,摇床转速160 r/min。在此条件下，菌株LT-2在摇瓶中培养16 h时，脂肪酶的酶活力达到(26.87±0.65) U/mL,是初始酶活力的2.03倍。[结论]试验菌株LT-2能够在培养16 h内产脂肪酶酶活为(26.87±0.65) U/mL,为脂肪酶工业化生产提供了较好的试验基础和应用依据。
2025年03期 v.35;No.208 304-312+337页 [查看摘要][在线阅读][下载 2103K]
- 赵国亮;刘健;孙强;田祎;
[目的]探究FNDC5在前列腺癌中的表达及其对前列腺癌DU145细胞增殖和转移的影响。[方法]通过免疫组化分析FNDC5在前列腺癌组织的表达，将前列腺癌DU145细胞分为3个实验组：阴性对照组、si FNDC5组、LY294002组。通过CCK-8实验与EdU染色分析DU145细胞的增殖活性；通过细胞划痕实验分析DU145细胞的迁移能力；通过Transwell实验分析DU145细胞的侵袭能力；通过蛋白免疫印迹实验分析DU145细胞中PI3K、AKT蛋白的表达水平。[结果]FNDC5在前列腺癌组织中表达上调(18.25%±2.15%vs 69.69%±5.97%;P<0.05)。与阴性对照组比较，si FNDC5以及LY294002组的DU145细胞增殖能力下降(2.63±0.26 vs 1.53±0.12 vs 1.51±0.17;P<0.05);si FNDC5以及LY294002组的DU145细胞的迁移、侵袭能力下降(73.68±5.62 vs 38.81±3.56 vs 39.21±5.77;P<0.05);si FNDC5以及LY294002组的DU145细胞PI3K、AKT蛋白表达水平降低(0.79±0.07 vs 0.33±0.09 vs 0.32±0.08;0.85±0.02 vs 0.31±0.07 vs 0.35±0.03;P<0.05)。[结论]FNDC5在前列腺癌组织中表达增加。抑制FNDC5表达后，前列腺癌DU145细胞的增殖活性、迁移与侵袭能力降低，该作用与FNDC5调节PI3K/AKT信号通路相关。
2025年03期 v.35;No.208 313-317+357页 [查看摘要][在线阅读][下载 1933K] - 秦策;袁君;刘利;张锐;班跃松;
[目的]探讨GPX4在非小细胞肺癌中的表达及其对癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。[方法] 2022年6月-2023年6月204例非小细胞肺癌患者(NSCLC)纳入研究，获取组织后作石蜡切片以及免疫组化(IHC)染色切片，测定GPX4表达水平，χ~2检验分析GPX4表达与NSCLC临床病理特征的关系。设H1299细胞组、sh-NC组、GPX4 inhibitor组、GPX4 mimics组，测定各组细胞增殖、侵袭、凋亡水平以及GPX4、IGF-1R水平。[结果]非小细胞肺癌组GPX4蛋白表达阳性率高于癌旁组(68.6%vs 17.6%)。肿瘤最大径≥5 cm、TNM分期Ⅲ-Ⅳ期、浸润深度更深、病理级别高、存在淋巴结转移、存在复发患者的GPX4阳性表达率更高。与肺癌细胞H1299组、sh-NC组细胞比较，GPX4 inhibitor组细胞的OD值、存活率、克隆形成数、穿膜数、GPX4以及IGF-1R表达降低(0.96±0.19 vs 0.94±0.18 vs 0.36±0.17 vs 1.48±0.17),GPX4 mimics组细胞的OD值、存活率、克隆形成数、穿膜数、GPX4以及IGF-1R表达增加(0.89±0.19 vs 0.88±0.18 vs 0.34±0.17 vs 1.47±0.17)。[结论]GPX4是肺癌的临床标志物。GPX4下调可以抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，同时诱导细胞凋亡，这些过程主要通过GPX4与IGF-1R的相互作用实现。
2025年03期 v.35;No.208 318-324页 [查看摘要][在线阅读][下载 1748K] - 王准;李宏志;陈雪霁;张芳;李帅;
[目的]探讨肾细胞癌中TXNDC5的表达及其对786-O细胞增殖、侵袭和迁移的影响。[方法] 2020年8月-2023年8月102例肾细胞癌患者纳入研究，免疫组化染色测定TXNDC5表达水平，χ~2检验分析TXNDC5表达与肾细胞癌临床病理特征的关系。同时设肾细胞癌细胞786-O组、sh-NC组、TXNDC5-inhibitor组、TXNDC5-mimics组，测定各组细胞增殖、侵袭、凋亡以及TXNDC5、CCN2水平。[结果]肾细胞癌组TXNDC5蛋白表达阳性率高于癌旁组(P<0.05)。TXNDC5蛋白表达与肾细胞癌临床病理特征相关。TXNDC5-inhibitor组OD值(0.78±0.05 vs 0.41±0.03)、存活率(78.56%±6.18%vs 42.11%±7.24%)、单克隆形成数目[(619.33±89.20)/个]、穿膜数[(323.85±84.25 vs 93.85±95.34)/个]、TXNDC5、CCN2 mRNA和蛋白表达水平低于肾细胞癌细胞786-O组、sh-NC组，凋亡率高于肾细胞癌细胞786-O组、sh-NC组(P<0.05);TXNDC5-mimics组OD值、存活率、单克隆形成数目、穿膜数、TXNDC5、CCN2 mRNA和蛋白表达水平高于肾细胞癌细胞786-O组、sh-NC组，凋亡率低于肾细胞癌细胞786-O组、sh-NC组(P<0.05);TXNDC5-mimics组OD值、存活率、单克隆形成数目、穿膜数、TXNDC5、CCN2 mRNA和蛋白表达水平高于TXNDC5-inhibitor组，凋亡率低于TXNDC5-inhibitor组(P<0.05)。[结论]TXNDC5下调可以抑制肾细胞癌细胞的增殖、迁移和侵袭，同时诱导细胞凋亡，这一过程与调节CCN2相关。
2025年03期 v.35;No.208 325-331+303页 [查看摘要][在线阅读][下载 1580K] - 陈薇;章杨韦;王琛琛;丁其培;陆月梅;
[目的]探讨KRTCAP2对宫颈癌细胞增殖、凋亡的生物学行为的影响，分析其对PI3K/AKT表达的作用。[方法]收集2021年9月-2022年9月接受手术治疗的39例宫颈癌患者，取其癌组织及癌旁组织制作行石蜡标本，采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织和癌旁组织KRTCAP2水平。随机将HeLa细胞分为空白组、阴性对照组和沉默KRTCAP2(si-KRTCAP2)组，将阴性对照质粒、si-KRTCAP2质粒分别转入阴性对照组、si-KRTCAP2组的HeLa细胞中，构建细胞模型，检测HeLa细胞的KRTCAP2 mRNA表达、增殖、凋亡情况，并检测PI3K和AKT蛋白表达。[结果]KRTCAP2 mRNA及蛋白在宫颈癌组织中表达水平高于癌旁组织(2.36±0.23 vs 1.03±0.11,P<0.05;2.15±0.46 vs 0.97±0.24,P<0.05)。si-KRTCAP2组KRTCAP2 mRNA及蛋白表达、细胞存活率、PI3K和AKT蛋白表达低于空白组、阴性对照组(0.83±0.12 vs 0.85±0.11 vs 0.43±0.07,P<0.05;1.01±0.11 vs 0.98±0.12 vs 0.49±0.08,P<0.05),细胞凋亡率高于空白组和阴性对照组(2.53%±0.36%vs 2.46%±0.33%vs 16.53%±1.34%,P<0.05)。[结论]KRTCAP2在宫颈癌中表达上调，沉默KRTCAP2的表达能促进宫颈癌细胞凋亡，抑制其增殖，降低PI3K和AKT蛋白表达，抑制PI3K/AKT信号通路，进而抑制肿瘤发展。
2025年03期 v.35;No.208 332-337页 [查看摘要][在线阅读][下载 1507K] - 许艳辉;贾同磊;曹新超;贺丽君;马平;
[目的]探究PD-L1与HK2/HLA-I通路的相互作用对非小细胞肺癌转移的影响。[方法]免疫组化实验分析非小细胞肺癌中PD-L1的表达。将非小细胞肺癌A549细胞分为3组：si NC组、si PD-L1组以及HY-B0486组。通过CCK-8实验分析A549细胞的增殖能力，Transwell实验分析A549细胞侵袭能力，流式细胞术分析A549细胞凋亡率，蛋白免疫印迹实验分析A549细胞中HK2/HLA-Ⅰ通路的蛋白表达情况。将非小细胞肺癌A549细胞分为4组，分别转染HK2野生型、突变型的荧光素酶报告基因载体与PD-L1 mimic/NC质粒；通过Targetscan网址预测PD-L1与HK2启动子结合区域，双荧光素酶报告基因实验分析PD-L1与HK2的靶向调节作用，实时荧光定量PCR检测HK2/HLA-ⅠmRNA表达水平。[结果]免疫组化结果显示，PD-L1在非小细胞肺癌组织中的表达水平增加(0.32±0.09 vs 0.79±0.06,P<0.05)。CCK-8实验发现，与si NC组相比，si PD-L1组和HY-B0486组的A549细胞的吸光度显著降低。Transwell实验显示，si PD-L1组和HY-B0486组的A549细胞的侵袭能力显著降低(156.68±12.69 vs 78.66±6.78 vs 81.56±7.88个，P<0.05)。流式细胞术实验结果显示，si PD-L1组和HY-B0486组的A549细胞的凋亡率增加(3.75%±0.28%vs 13.23%±0.19%vs 14.16%±0.56%,P<0.05)。蛋白免疫印迹实验结果显示，si PD-L1组和HY-B0486组的A549细胞的HK2和HLA-Ⅰ蛋白表达量下调。PD-L1与HK2启动子存在相互结合区域，同时PD-L1能够靶向作用HK2,并激活HK2/HLA-Ⅰ通路。[结论] PD-L1在非小细胞肺癌组织中的表达水平增加。抑制PD-L1和HK2/HLA-Ⅰ通路后可以明显抑制非小细胞肺癌A549细胞的增殖和侵袭能力，并能促进A549细胞细胞凋亡。并且PD-L1能够调节HK2/HLA-Ⅰ通路的激活，PD-L1对A549细胞转移的影响与调节HK2/HLA-Ⅰ信号通路相关。
2025年03期 v.35;No.208 338-343+350页 [查看摘要][在线阅读][下载 1564K] - 李宏志;王准;陈雪霁;张芳;李帅;
[目的]探究miR-325-3p靶向PRDX4对肾细胞癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。[方法]设肾细胞癌细胞Caki-1组、miR-NC组、miR-325-3p-mimics组(过表达)、miR-325-3p-inhibitor组(低表达),测定各组细胞增殖、单克隆形成数目、凋亡率、侵袭水平以及miR-325-3p、PRDX4水平。[结果] miR-325-3p-inhibitor组OD值(0.93±0.03)、存活率(86.58±6.36)%、单克隆形成数目(1 062.29±102.78)、穿膜数(1 917.34±425.35)、PRDX4 mRNA和蛋白表达水平(4.63±0.28、1.82±0.18)高于miR-325-3p-mimics组[(0.42±0.02)、(42.25±7.20)%、(239.89±35.27)个、(293.85±95.28)个、(2.04±0.24)、(0.38±0.07)](P<0.05),细胞凋亡率(1.12±0.29)%、miR-325-3p表达水平(1.42±0.38)低于miR-325-3p-mimics组(7.14±1.11)%、(5.68±0.37)(P<0.05)。[结论] miR-325-3p上调可以抑制肾细胞癌细胞的增殖(76.59%±7.30%vs 42.25%±7.20%)、迁移侵袭(702.28±111.52 vs 293.85±95.28),同时诱导细胞凋亡(3.46±1.04 vs 7.14±1.11),而这些过程主要是通过miR-325-3p与PRDX4的相互作用实现的。
2025年03期 v.35;No.208 344-350页 [查看摘要][在线阅读][下载 1694K] - 姚若兴;王禅;张瑜;刘春;丁兵;
[目的]探索miR-192-5p与TP53在顺铂耐药的SMMC-7721细胞(SMMC-7721/DDP)中的作用。[方法]实时荧光定量PCR检测顺铂耐药与非耐药的肝细胞癌组织中miR-192-5p及TP53的表达。将顺铂耐药的SMMC-7721细胞分为4组：miR NC组、miR-192-5p inhibitor、pcDNA3.1 NC和pcDNA3.1 TP53组。实时荧光定量PCR检测顺铂耐药和非耐药细胞中miR-192-5p与TP53的表达；CCK-8实验分析SMMC-7721/DDP细胞的增殖能力；通过Transwell实验分析SMMC-7721/DDP细胞的侵袭能力；通过流式细胞术分析SMMC-7721/DDP细胞的凋亡率；通过荧光素酶报告基因实验分析SMMC-7721/DDP细胞中miR-192-5p与TP53的靶向关系。[结果]与非耐药的肝细胞癌组织比较，顺铂耐药的肝细胞癌组织中的miR-192-5p表达水平增加，TP53表达水平降低。与SMMC-7721细胞比较，SMMC-7721/DDP细胞中的miR-192-5p表达水平增加，TP53表达水平降低。与miR NC组比较，miR-192-5p inhibitor组的SMMC-7721/DDP细胞的增殖活性降低、侵袭能力降低(78.26±1.36 vs 36.52±2.33,P<0.05)、凋亡率增加(5.75%±0.17%vs 10.76%±0.62%,P<0.05)。与pcDNA3.1 NC组比较，pcDNA3.1 TP53组的SMMC-7721/DDP细胞的增殖活性降低、侵袭能力降低(72.11±2.56 vs 33.73±1.83,P<0.05)、凋亡率增加(5.86%±1.51%vs 9.28%±1.39%,P<0.05)。荧光素酶活性测定显示，与miR NC组比较，在TP53-WT组中转染miR-192-5p inhibitor后荧光素酶活性增加(0.51±0.06 vs 0.78±0.02,P<0.05),TP53表达水平增加(0.38±0.05 vs 0.69±0.05,P<0.05)。[结论]在顺铂耐药的肝细胞癌组织和细胞中，miR-192-5p高表达而TP53低表达，并且miR-192-5p能够靶向抑制TP53的表达。通过下调miR-192-5p或增加TP53的表达能够抑制顺铂耐药的肝细胞癌的进展。
2025年03期 v.35;No.208 351-357页 [查看摘要][在线阅读][下载 1744K] - 夏炳辉;张振山;姚天宇;葛凤月;鄢凤梅;孙金鹏;
[目的]探究miR-635与MYL6B对非小细胞肺癌H1650细胞转移活性的影响。[方法]采用实时荧光定量PCR方法检测miR-635的表达水平，通过蛋白免疫印迹方法检测非小细胞肺癌组织中MYL6B的表达情况。将H1650细胞株随机分为4组：miR NC组、miR-635 mimic组、si NC组与si MYL6B组。蛋白免疫印迹检测MYL6B蛋白的表达水平，采用EdU染色分析H1650细胞的增殖能力，细胞划痕实验分析H1650细胞的侵袭能力，流式细胞仪检测H1650细胞凋亡率，生物信息学方法预测miR-635与MYL6B在H1650细胞中的结合区域，双荧光素酶报告基因实验分析miR-635与MYL6B在H1650细胞中的的靶向关系。[结果]非小细胞肺癌组织中miR-635表达水平降低(0.79±0.05 vs 0.31±0.07),MYL6B表达增加(0.18±0.02 vs 0.82±0.09);miR-635能够靶向抑制MYL6B的活性(0.98±0.08 vs 0.27±0.03);miR-635 mimic或si MYL6B均能抑制H1650细胞的生长与迁移能力，并能促进H1650细胞凋亡(8.08%±1.72%vs 33.97%±2.08%vs 7.92%±1.27%vs 33.11%±2.17%,P<0.05)。[结论]MYL6B在非小细胞肺癌组织高表达，而miR-635低表达。MYL6B是miR-635的直接靶点，miR-635对非小细胞肺癌H1650细胞转移活性的抑制作用与调控MYL6B相关。
2025年03期 v.35;No.208 358-363+370页 [查看摘要][在线阅读][下载 1860K] - 卞欣;田林;杜凤凤;
[目的]探讨miR-23b-3p靶向调节TFRC对子宫内膜癌Ishikawa细胞转移活性的影响。[方法]设Ishikawa子宫内膜癌细胞组、miRNA-NC组、miR-23b-3p inhibitor组、miR-23b-3p mimics组，培养72h后，测定细胞活力、凋亡及细胞侵袭迁移水平，RT-PCR法、蛋白印迹法测定细胞miR-23b-3p、TFRC水平。[结果]与Ishikawa子宫内膜癌细胞组、miRNA-NC组比较，miR-23b-3p inhibitor组OD值(0.84±0.05 vs 0.83±0.06 vs 0.93±0.07,P<0.05)、存活率(88.85%±2.33%vs 86.34%±2.74%vs 95.27%±2.25%,P<0.05)、穿膜数、迁移距离(18.36±5.25 vs 19.33±6.30 vs 65.63±12.38,P<0.05)升高，凋亡率降低(6.11%±1.25%vs 6.83%±1.18%vs 1.13%±0.24%,P<0.05);miR-23b-3p mimics组的Ishikawa细胞的OD值、存活率、穿膜数、迁移距离降低，凋亡率升高(P<0.05);与miR-23b-3p inhibitor组比较，miR-23b-3p mimics组的Ishikawa细胞的OD值、存活率、穿膜数、迁移距离降低，凋亡率升高(P<0.05)。与Ishikawa子宫内膜癌细胞组、miRNA-NC组比较，miR-23b-3p inhibitor组的Ishikawa细胞的miR-23b-3p表达水平降低，TFRC mRNA水平和蛋白表达水平升高(0.95±0.15 vs 1.78±0.11,P<0.05),miR-23b-3p mimics组的Ishikawa细胞的miR-23b-3p表达水平升高，TFRC mRNA和蛋白表达水平降低(0.95±0.15 vs 0.34±0.17,P<0.05);与miR-23b-3p inhibitor组比较，miR-23b-3p mimics组的Ishikawa细胞的miR-23b-3p表达水平升高，TFRC mRNA和蛋白表达水平降低(1.78±0.11 vs 0.34±0.17,P<0.05)。[结论] miR-23b-3p靶向抑制TFRC表达进而抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞的转移。
2025年03期 v.35;No.208 364-370页 [查看摘要][在线阅读][下载 1614K] - 徐彩娜;卢莎莎;俱闪闪;池立珍;辛末丹;许墨菊;于奇;
[目的]探究miR-346与TNF-α/Mfn2通路对脑梗死小鼠内质网应激和神经元凋亡的影响。[方法]将C57BL/6J小鼠随机分为3组：假手术组(sham)、NC agomir组、miR-346 agomir组。通过苏木素伊红染色分析海马组织病理变化，TUNEL实验检测神经细胞凋亡率，通过氯化三苯基四氮唑染色评估小鼠的脑梗死面积，尼氏染色分析神经元尼氏小体数量，蛋白免疫印迹实验分析TNF-α/Mfn2通路以及内质网应激相关蛋白的表达水平。[结果]与假手术组的小鼠比较，NC agomir组的小鼠的脑梗死面积增加(0.21±0.01 vs 27.16±4.38,P<0.05),海马组织受到破坏，神经元尼氏小体的数量减少(56.27±5.13 vs 12.79±2.95,P<0.05),神经元凋亡率增加(1.25%±0.03%vs 17.89%±2.96%,P<0.05),内质网应激相关蛋白以及TNF-α表达增加(0.23±0.05 vs 1.22±0.13,P<0.05),Mfn2表达降低(0.97±0.06 vs 0.13±0.03,P<0.05)。与NC agomir组的小鼠比较，miR-346 agomir组的小鼠的脑梗死面积减少，海马组织结构得到改善，神经元尼氏小体的数量增加，神经元凋亡率降低，内质网应激相关蛋白以及TNF-α表达降低，Mfn2表达增加。[结论] miR-346能够调控TNF-α/Mfn2信号轴，减少脑梗死小鼠海马组织区域的内质网应激和神经元凋亡。
2025年03期 v.35;No.208 371-376页 [查看摘要][在线阅读][下载 1288K] - 杜希越;侯倩倩;靳鑫;王大庆;李永丰;
[目的]探讨NDR1通过NOTCH1调控非小细胞肺癌(NSCLC)干细胞特性的潜在机制。[方法]采用流式细胞仪分析CD24-PE和CD44-FITC抗体标记的NSCLC细胞表面干细胞标志物的表达。通过ALDEFLUOR染色评估NSCLC细胞的醛脱氢酶活性，从而确定其干细胞特性。采用免疫印迹法分析NOTCH1通路的激活情况。[结果]与对照组相比，过表达NDR1后，NSCLC细胞中CD24_(Low)/CD44_(High)细胞比例(37.81±3.63 vs 58.56±7.11;P<0.05)和ALDEFLUO细胞水平(15.17±3.13 vs 26.44±4.13;P<0.05)显著上升。过表达NDR1后，NSCLC细胞中NOTCH1表达水平上升。敲低NOTCH1后，NSCLC细胞中CD24_(Low)/CD44_(High)细胞比例(35.40±3.67 vs 5.04±1.16;P<0.05)和ALDEFLUO细胞水平(15.77±2.82 vs 5.28±0.89;P<0.05)显著下降。此外，敲低NOTCH1后，NSCLC细胞中NOTCH1、c-Myc和HES1的表达水平下降，而过表达NOTCH1后，这些基因表达水平上升。[结论]NDR1通过激活NOTCH1通路提升了NSCLC细胞的干细胞特性(37.81±3.63 vs 58.56±7.11)。
2025年03期 v.35;No.208 377-383页 [查看摘要][在线阅读][下载 1810K] - 王晴;赵志伟;宋晓森;李丽;
[目的]探究Lnc-AC226118.1/miR-99b-5p/TRIB1信号通路对术后认知障碍大鼠神经细胞活性的影响。[方法]将术后认知障碍大鼠神经细胞分为3组：对照组、si NC组和si TRIB1组。通过CCK-8实验检测神经细胞增殖能力；通过细胞集落形成实验检测神经细胞聚集活性；通过流式细胞数检测神经细胞凋亡率；通过生物信息学分析Lnc-AC226118.1/miR-99b-5p/TRIB1信号轴的结合位点；通过荧光素报告基因实验检测Lnc-AC226118.1/miR-99b-5p/TRIB1信号轴的靶向作用关系。通过蛋白免疫印迹实验分析TRIB1的表达。通过实时荧光PCR实验检测miR-99b-5p的表达。[结果]与对照组、si NC组相比，si TRIB1组的神经细胞增殖和聚集活性增加(1.25±0.08 vs 1.36±0.11 vs 2.27±0.03; 62.69±12.28 vs 57.36±13.59 vs 173.51±22.68;P<0.05),凋亡率降低(13.19%±0.29%vs 14.66%±0.52%vs 3.69%±0.08%;P<0.05)。Lnc-AC226118.1/miR-99b-5p/TRIB1信号轴分子间有相互结合位点，且具有靶向调控关系。[结论]激活Lnc-AC226118.1/miR-99b-5p/TRIB1信号轴能够提高术后认知障碍大鼠神经细胞活性，Lnc-AC226118.1/miR-99b-5p/TRIB1信号轴有望成为术后认知障碍治疗的潜在靶点。
2025年03期 v.35;No.208 384-389+402页 [查看摘要][在线阅读][下载 1586K] - 宋秋玲;徐任利;周红术;向国强;段雨函;
[目的]探究IL-35调控STAT1途径对支气管哮喘中Th1/Th2细胞免疫失衡的影响。[方法]选择BALB/c小鼠40只，将小鼠分成空白组、模型组、IL-35干预组、IL-35+STAT1抑制剂组，每组各10只。通过光镜法观察支气管肺泡灌洗液细胞总数和嗜酸粒细胞；酶联免疫吸附法测定IL-4和IFN-γ;苏木精-伊红染色检测肺组织病理改变；流式细胞术测定Th1/Th2细胞；Western blot法检测p-STAT1和STAT1蛋白表达。[结果]空白组、模型组、IL-35干预组、IL-35+STAT1抑制剂组小鼠咳嗽次数差异明显。相比模型组，IL-35干预组小鼠的病理结构得到改善。而IL-35和STAT1抑制剂组小鼠肺组织病理结果与模型组相似。空白组、模型组、IL-35干预组和IL-35+STAT1抑制剂组小鼠支气管肺泡灌洗液细胞总数、嗜酸粒细胞、IL-4和IFN-γ差异有统计学意义。空白组、模型组、IL-35干预组和IL-35和STAT1抑制剂组小鼠体内CD4~+IFN-γ~+(28.91±4.27 vs 14.55±3.22 vs 19.25±4.00 vs 16.02±4.17,F=26.905,P<0.001)、CD4~+IL-4~+(10.66±1.33 vs 30.29±2.01 vs 13.17±1.81 vs 24.59±1.67,F=292.427,P<0.001)和Th1/Th2(1.16±0.17 vs 0.21±0.03 vs 0.65±0.02 vs 0.33±0.02,F=235.501,P<0.001)差异极显著。空白组、模型组、IL-35干预组和IL-35和STAT1抑制剂组小鼠p-STAT1蛋白(1.26±0.43 vs 0.19±0.05 vs 0.48±0.10 vs 0.26±0.09,F=46.889,P<0.001)差异极显著。[结论]支气管哮喘小鼠可出现Th1/Th2细胞免疫失衡，IL-35可激活STAT1信号通路表达，以纠正Th1/Th2细胞免疫失衡。
2025年03期 v.35;No.208 390-394+376页 [查看摘要][在线阅读][下载 1800K]