- 余昆;苟欣;杨华安;周青松;夏阳;
目的:应用质粒pEGFP-N1构建含小鼠survivin基因的重组真核载体。方法:采用Oligo核酸软件对Genbank上所发表的小鼠survivin mRNA序列进行分析,自行设计一对分别含有HindⅢ、BamHⅠ酶切位点的survivin基因上下游引物,利用PCR扩增出该基因的全序列cDNA,并将其定向克隆入pEGFP-N1的多克隆位点,构建pEGFP-N1/survivin重组真核表达载体。然后通过卡那霉素抗性筛选、双酶切及PCR鉴定,选取鉴定正确的克隆测序。结果:双酶切与测序结果表明目的基因序列克隆正确,成功构建了含有小鼠survivin基因的重组真核表达载体。结论:重组真核表达载体pEGFP-N1/survivin构建成功,为下一步研究sur-vivin在未成熟树突状细胞中诱导分化与致耐受作用奠定基础。
2009年06期 v.19;No.115 1-4页 [查看摘要][在线阅读][下载 507K] - 李姣清;夏枫耿;王彦;杜少平;张玲华;明飞平;程庆;徐臣超;
目的:利用Tn5转座诱变荧光假单胞菌PF20001,研究所获得的突变株对青枯病的生防效果。方法:利用三亲本杂交方式,将带有转座子Tn5的Tn5-102(含luxAB)的质粒pTR102成功地转入PF20001,利用平板相互拮抗法分析突变株对青枯病致病菌的拮抗作用。结果:通过诱导Tn5转座,得到荧光假单胞菌PF20001的Tn5插入突变库。经平板相互拮抗实验发现,菌株PF20001-lux-48拮抗圈明显大于野生型(半径达0.35cm)。用Tn5-lux特异引物进行PCR扩增,结果显示只有以该突变株的DNA为模板才能得到300bp的扩增产物,证实该菌株基因组中有Tn5插入。结论:Tn5的插入使菌株PF20001对青枯病生物防治能力增强。
2009年06期 6-8页 [查看摘要][在线阅读][下载 231K] - 雷迅;向秋;王建红;范才文;曾攀;罗琴;何晓松;
目的:研究Survivin特异性SiRNA(small interfering RNA)对鼻咽癌移植瘤的放疗增敏作用,探索提高鼻咽癌疗效的新方法。方法:Survivin特异性SiRNA转染鼻咽癌5-8F细胞系,培养48h后,采用RT-PCR、流式细胞仪(flow cytometry,FCM)分别检测Survivin mRNA和蛋白在5-8F细胞中表达。将Survivin基因特异性SiRNA转染5-8F细胞,培养24h后,用剂量为6GY的放射线处理,培养6h后,收集细胞,进行裸鼠皮下接种,50d后处死裸鼠,对移植瘤进行分析。结果:Survivin特异性SiRNA能有效抑制5-8F细胞中Survivin表达。Survivin特异性SiRNA组,Survivin表达阳性率12.37±1.86%,与对照组阳性率91.93±1.3%和阴性对照组阳性率92.43±2.34%比较,差别具有显著性(p<0.01)。特异性SiRNA加放射组移植瘤(0.03±0.03g)显著小于特异性SiRNA组(0.28±0.02g,p<0.01)与阴性SiRNA加放射组(0.17±0.02g,p<0.01)。结论:Survivin特异性SiRNA增强了鼻咽癌5-8F细胞移植瘤的放射敏感性。
2009年06期 8-10页 [查看摘要][在线阅读][下载 126K] - 何彦;曾晓丽;汪思迪;谢贤安;程水明;
目的:为了探索黑木耳菌株之间的遗传距离,构建出供试菌株酯酶同工酶鉴别图。方法:采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳对21个黑木耳菌株酯酶同工酶的酶谱多样性进行了研究。结果:酯酶同工酶电泳各个菌株分别具有2~7条酶带,其中在Rf值为0.344处,21个菌株都有谱带出现。21个菌株之间的遗传相似系数在0.167-1.000之间,应用NTSYS软件进行聚类分析,当相似水平为0.73时,可将供试的21个黑木耳菌株分为6个不同的类群。结论:酯酶同工酶可以有效快捷的对黑木耳菌株进行菌种鉴定,是黑木耳菌株遗传多样性研究的理想手段。
2009年06期 10-12页 [查看摘要][在线阅读][下载 204K] - 赵献春;陈源源;王正祥;
目的:从中国高校工业微生物资源与信息中心(CICIM-CU)细菌库中分离具有产脱枝酶酶活的细菌并鉴定,进行酶学性质的研究。方法:通过碘显色平板法筛选产酶菌株,利用16S rDNA确定其属种。对每一株产脱枝酶的细菌进行初步的酶学性质研究。结果:从4005株细菌中筛选出45株产脱枝酶的细菌,建立了产脱枝酶细菌的细菌库。酶学性质表明CICIM B272、CICIMB1-30两株菌产生的脱枝酶,酶反应的最适温度分别为70℃6、0℃,最适pH分别为6.0、5.5,来源于上述两种不同属种的脱枝酶在30~70℃反应条件下,酶在pH 4.5~8.5范围内活性稳定,Li+、Na+、K+、Mg2+、Mn2+对两者酶活均有显著的激活作用,而Cu2+、Fe3+及EDTA对两者均有显著的抑制作用,Mn2+、Ca2+分别对两者的热稳定性具有很好的提升作用。以支链淀粉为底物的动力学常数Km分别为352.883mg/mL、4.5814mg/mL,Vmax分别为30.03mg/min.mL、0.4575mg/min.mL。结论:不同属种的脱枝酶酶学性质差别显著。
2009年06期 12-16页 [查看摘要][在线阅读][下载 541K] - 王继雯;谢宝恩;周伏忠;陈晓飞;
目的:从玉米根际和土壤中分离具有高产吲哚乙酸较强的泌氨能力的巴西固氮螺菌。方法:分别通过半固体NFb培养基、CR培养基、LB培养基分离培养固氮菌株,并经过一系列菌落菌体形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列测定等试验对其进行鉴定。结果:经分离纯化获得10株固氮菌,并鉴定均为巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense),其中菌株R7在甘油半固体培养基上能分泌约14mmol/L的氨,在添加了色氨酸的培养基中能够合成58.8μg/ml的吲哚-3-乙酸(IAA)。结论:成功筛选得到一株既高产吲哚乙酸又有较强的泌氨能力的巴西固氮螺菌。
2009年06期 16-19页 [查看摘要][在线阅读][下载 181K] - 闫丽娟;赵春雷;谢振荣;唐湘华;黄遵锡;
目的:筛选耐高温脂肪酶产生菌株并对其进行18SrDNA鉴定及系统进化树亲缘分析。方法:通过聚乙烯醇橄榄油乳化液方法对所选菌株的粗酶酶学性质进行研究并通过BLAST和MAGE4软件鉴定和聚类分析。结果:从云南省福贡县的榨油作坊土壤中筛选到一株耐高温产酸性脂肪酶的菌株NJY-1,对其粗酶酶学性质进行研究结果表明:该菌株酶促反应的最适作用pH为6.0,pH稳定性为3.0~8.0,最适作用温度为50℃,温度稳定性为35~60℃。该菌株通过18SrDNA鉴定及系统进化树分析,NJY-1与Aspergillus niger具有最紧密的亲缘关系,达到99%。结论:筛选到了1株耐高温脂肪酶产生菌株NJY-1,确定了其粗酶酶学性质和其亲缘关系。
2009年06期 v.19;No.115 17-20页 [查看摘要][在线阅读][下载 367K] - 孙燕霞;张瑞清;张伟;袁堂玉;商丽丽;赵建;夏秀波;
目的:从蚯蚓粪和黄粉虫沙中筛选对该土传病害病原菌——尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)具有拮抗效果的微生物菌株,可以有效控制黄瓜枯萎病(CucumberFusarium wilt)的发生。方法:经PDA平板对峙实验、紫外线诱变处理和黄瓜种子胚轴抑制试验,得到具有拮抗效果的菌株,通过真菌的18S rRNA的PCR扩增及克隆、18S rRNA的全序列分析等手段。结果:从23株具有拮抗效果的菌株中得到突变菌株syx-2及该菌株的18S rRNA基因序列。结论:syx-2为白地霉(Geotrichum candidum)的一个变种,对黄瓜枯萎病活体拮抗作用可高达81.1%,具有明显的抑制作用。
2009年06期 v.19;No.115 22-25页 [查看摘要][在线阅读][下载 568K] - 张旭;张惠文;徐明恺;苏振成;李新宇;
目的:从乳酸乳球菌中选育Nisin高产菌株。方法:利用超声波对乳酸乳球菌进行诱变,并用琼脂扩散法检测其效价。结果:获得一突变菌株S-1,该菌株的生物效价为343.53IU/mL,比原始菌株提高31.52%。结论:突变株S-1遗传性能稳定,为进一步菌种选育奠定基础。
2009年06期 22-24页 [查看摘要][在线阅读][下载 170K] - 吕静琳;黄爱玲;郑蓉;李殿殿;吕暾;
目的:筛选1株产纤维素酶的细菌。方法:通过对从腐烂朽木及其附近土壤中得到的样品进行富集培养、分离纯化得到16株纤维素分解菌,经刚果红染色鉴定和液体发酵培养后对其进行了菌种初步鉴定及产酶条件的初步优化。结果:获得1株纤维素酶分泌量较高的细菌LT3。结论:LT3为革兰氏阳性菌,菌体成杆状,经发酵优化培养后,较适产酶条件为甘蔗渣20g/L,pH7.0、30℃培养120h,CMC酶活为71.17U/mL,滤纸酶活为33.37U/mL。通过克隆其16S rDNA序列,对其进行系统进化分析,鉴定为蜡状芽孢杆菌。
2009年06期 28-31页 [查看摘要][在线阅读][下载 306K] - 王婷;吕淑霞;贺靖文;白宇;马镝;林英;
目的:研究酶降解法制备的壳寡糖对番茄灰霉病病菌的抑制机理。方法:测定壳寡糖对番茄灰霉病菌菌丝发育、孢子萌发的抑制作用以及对菌丝形态、细胞膜透性和对菌丝体可溶性蛋白质含量的影响。结果:当壳寡糖处理浓度为1.5mg/mL以上时,对菌丝生长的抑制率达70%以上,EC50为0.72mg/mL。当处理浓度为6mg/mL时,对分生孢子的抑制率显著优于其他浓度水平,达87.4%,EC50为1.48mg/mL。显微观察,浓度为0.8mg/mL的壳寡糖处理可诱导菌丝分枝增多、菌体分隔增加,分生孢子形成受到抑制。此外壳寡糖能够引起菌丝细胞膜透性发生变化,造成菌丝体内含物的渗漏。壳寡糖处理66 h后,菌丝体可溶性蛋白含量比对照降低了36.7%。结论:壳寡糖对番茄灰霉病病菌抑制机理的探究为研究壳寡糖这一新型生物农药的作用机制提供依据。
2009年06期 v.19;No.115 29-32页 [查看摘要][在线阅读][下载 135K] - 张宏;李佳;库尔班·吐松;苏力坦·阿巴白克力;
目的:比较短毛柽柳中不同部位总黄酮的含量差异,研究黄酮化合物保存的条件,方法:采用超声波乙醇浸提法,在正交优先的最佳条件(料液比为1∶15,超声处理时间为40min,乙醇浓度为45%,超声温度50℃,提取3次)下提取不同部位总黄酮,并测定不同条件下其吸光度的变化。结果:柽柳花、叶、茎中总黄酮得率分别为24.585mg/g、25.623mg/g、41.726mg/g,柽柳中提取的黄酮溶液在光照、高温、高浓度蔗糖溶液和Na+存在条件下不稳定;pH 4~7条件下较稳定;氧化剂对其稳定性的影响不大。结论:柽柳茎中总黄酮含量明显高于其他两个部位。柽柳黄酮保存时应避免接触碳水化合物和盐离子,在避光、常温、中性条件下保存。
2009年06期 34-36页 [查看摘要][在线阅读][下载 82K]
- 郭志义;郝小惠;延晋雷;尚利梅;裴鑫;武慧婧;赵偲宇;张璇;杨方;
目的:改进重叠延伸PCR法,实现一种引入DNA定点突变的准确简便方法。方法:通过应用不同的扩增酶和反应体系,以重叠延伸PCR的方法产生引入突变位点的DNA片断,然后再亚克隆到载体中。该文以人cyclin D1启动子的NF-κB位点(-39/-30)为例。结果:通过DNA测序证明定点突变成功引入。一次引入4个突变碱基。突变引入率为100%。
2009年06期 v.19;No.115 34-36页 [查看摘要][在线阅读][下载 168K] - 薛力刚;王全凯;刘金华;王振国;
目的:应用核酸探针方法快速检测大肠杆菌O157:H7。方法:通过使用吖啶酯标记的特异DNA探针方法检测大肠杆菌O157:H7,对此种方法的特异性、敏感性、准确性进行研究,比较该方法与传统国标法的检测结果。结果:核酸探针方法检测大肠杆菌O157:H7特异性以及敏感性强,检出大肠杆菌O157:H7菌液浓度最低限约为106cfu/ml,检测大肠杆菌O157:H7的结果与国标法相一致;对O157:H7鉴定时间仅需30min,简便快捷。结论:核酸探针方法可用于大肠杆菌O157:H7的快速检测。
2009年06期 v.19;No.115 36-38页 [查看摘要][在线阅读][下载 50K] - 李慧慧;朱玉球;斯金平;高燕会;
目的:建立栝楼最佳ISSR-PCR正交优化体系,为开展栝楼ISSR分子标记奠定技术基础。方法:采用正交试验设计对影响栝楼ISSR-PCR扩增的重要参数(DNA模板、MgCl2、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶)进行优化试验,同时进行不同温度梯度试验和ISSR体系筛选。结果:最佳的栝楼ISSR-PCR的反应体系(20μl)为:30ng模板DNA,2.0mmol/L MgCl2,0.3mmol/L dNTPs,0.5μmol/L引物,0.5U Taq DNA聚合酶;退火温度为52℃~55℃;扩增反应程序为:94℃预变性5min;94℃变性30s,52℃退火1min,72℃延伸2min,35个循环;72℃延伸7min;4℃保存。结论:建立了栝楼的最佳ISSR反应体系,为栝楼种质鉴定提供了更客观可靠
2009年06期 v.19;No.115 38-41页 [查看摘要][在线阅读][下载 200K] - 姜艳;刘进平;
目的:研究建立胡椒叶片中提取高质量DNA的方法。方法:采用各种CTAB法和SDS法的改良方法,提取胡椒叶片中的总DNA,并对DNA进行紫外和电泳检测。结果:改良CTAB法4和5提取的DNA经电泳检测,有一条明亮主带,且无拖尾现象,样品槽无荧光出现,说明抽出的DNA纯度较高,一致性好;测定其OD260和OD280值,并计算其比值,OD260/OD280值在1.8~2.0之间,提取率在51.667~60.000μg/g之间,获得的基因组DNA质量高。结论:改良CTAB法4和法5可从胡椒幼叶中提取高质量DNA。
2009年06期 43-46页 [查看摘要][在线阅读][下载 167K] - 鲁云风;杨柯金;杨建伟;何拉可;刘虹梁;
目的:用聚乙二醇法探讨蟾蜍红细胞融合的最佳条件。方法:采用3因素3水平的正交实验法,以蟾蜍红细胞为材料,从聚乙二醇浓度、反应时间、反应温度三方面计算细胞融合率,探讨和比较蟾蜍红细胞融合的最适条件及影响因素。结果:蟾蜍红细胞融合的最佳条件是:选用50%的聚乙二醇,反应温度为37℃,反应时间为15min。
2009年06期 v.19;No.115 44-45页 [查看摘要][在线阅读][下载 31K] - 王慧;王红丽;王俊华;吕国栋;卢晓梅;王星;温浩;林仁勇;
目的:比较不同方法纯化重组泡球蚴Em18的效果。方法:进一步对BL21-pET41a-Em18重组菌的诱导表达条件进行摸索优化,采用改良的超声程序破碎大肠杆菌细胞,分别经不同的纯化方法进行蛋白纯化,通过SDS-PAGE对纯化结果进行比较分析,Western blot进行活性鉴定。结果:①在菌液OD600为0.8~1.0,加IPTG终浓度为1 mmol/L,37℃诱导3h,rEm18-GST重组蛋白得到成功高表达,在相对分子量为50kDa处有表达条带。②超声程序为:工作3 s,间歇4s,功率200~300W,超声体系中加入溶菌酶和蛋白酶抑制剂作用,可促进大肠杆菌细胞的破碎,降低目的蛋白的降解;加入终浓度为1%的Triton-X100作用可增加融合蛋白的可溶性。③通过比较不同方法纯化重组泡球蚴Em18的效果表明采用单纯His柱纯化可获得浓度高、纯度高的rEm18-GST重组蛋白。Western blot分析表明该蛋白能与泡型包虫病(AE)患者血清特异性反应。结论:建立了一种纯化原核表达Em18融合蛋白的较为经济和有效的方法,得到大量有生物学活性的Em18融合蛋白,为包虫病诊断试剂盒的研制奠定基础。
2009年06期 47-50页 [查看摘要][在线阅读][下载 209K] - 王永泽;李亨芬;王金华;陈雄;李冬生;周宝晗;
目的:对产邻苯二酚菌株进行筛选。方法:采用前期筛得的产邻苯二酚菌为出发菌株,通过硫酸二乙酯诱变的方法使该菌株突变,同时建立96孔板培养和酶标仪检测方法对产邻苯二酚菌株进行高通量筛选。结果:硫酸二乙酯的终浓度为0.1%,诱变时间为8 min的条件下,突变菌致死率为84.5%,突变效果最好。筛选培养基中吸光值(495nm)和富集培养基中菌液浊度值(OD630)的加和值较大的突变菌株产邻苯二酚能力高。通过诱变和筛选得到的菌株,产邻苯二酚浓度可达0.87mg/ml,比出发菌株的提高了262.5%。经过形态学和生理生化反应,初步鉴定该菌株属于假单胞菌属(Pseudomonas sp.)。结论:硫酸二乙酯诱变和96孔板筛选的方法能以高通量方式快速筛选出产邻苯二酚菌株。
2009年06期 50-53页 [查看摘要][在线阅读][下载 96K] - 杨伟超;汲涌;荆士华;张朝印;姜铭妍;谌明;徐慧;
目的:建立一种Vc二步发酵高效伴生菌的快速初筛方法。方法:通过测定OD650,以伴生菌进入对数期的早晚和对数期持续长短为判断菌株伴生潜力的依据。结果:10h前进入对数期,对数期持续时间约12h的菌株具有高效的促进小菌生长和发酵产古龙酸的潜力。概率为71%。结论:以伴生菌进入对数期的早晚和对数期持续长短为判断依据的新的菌株快速初筛方法,简便、高效,利于大规模初筛应用。
2009年06期 v.19;No.115 51-53页 [查看摘要][在线阅读][下载 76K] - 黄晨阳;李燕;陈强;高巍;张金霞;
目的:建立一种快速、经济的方法辨别糙皮侧耳(P.ostreatus)和肺形侧耳(P.pulmonarius)。方法:在GenBank下载糙皮侧耳和肺形侧耳的ITS序列,经ClustalX序列比对,利用Primer 3设计特异引物组合1F(5′-GATAGATCTGTGAAGTCGTC-3‘)、1R(5′-TCACAATTGGAAAGAAACC-3′)和2R(5′-TGCGTGCTATTGATGAGTGA-3′),最后经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳检测。结果:5个糙皮侧耳菌株均能得到2条带,分别为342bp和459bp。4个肺形侧耳菌株均能扩增到一条446bp的片段。结论:该组引物适合辨别糙皮侧耳和肺形侧耳。
2009年06期 v.19;No.115 53-55页 [查看摘要][在线阅读][下载 214K] - 连冬生;赵树进;
目的:采用水柱法场扩大堆积技术,提高毛细管电泳紫外分析核酸灵敏度。方法:已知浓度的DNA Marker为标准样品,TE缓冲液递度稀释,压力进样前加一段去离子水柱(0.5psi,20s),观察不同浓度下压力进样紫外检测图谱。结果:在对分离度无明显影响下,将压力进样时间延长至0.5psi,990s,与常规的压力进样(0.5psi,10s)相比,灵敏度提高了94.4倍。与时间延长后的压力进样(0.5psi,90s)相比,灵敏度提高8.2倍,最低检测总浓度为1ng/μl,DNA的检测限降至80ng/ml(S/N=3),比前人报道的7ng/μl检测限提高了87.5倍。结论:验证了水柱法场扩大堆积注射可以有效提高毛细管电泳紫外检测核酸灵敏度。
2009年06期 v.19;No.115 57-61页 [查看摘要][在线阅读][下载 312K] - 沙长青;谷军;原韬;张晓彦;于德水;
目的:利用不同方法对沼气高产菌群进行保藏,比较各方法不同时间的保藏效果。方法:应用液体低温冷藏法、液体石蜡封存法、液氮冷冻保藏法和低温冷冻干燥保藏法保藏的菌种,分别在保藏后1个月、3个月、6个月及1年后复苏菌种,测定其产气速度、产气量。结果:以上几种方法均能够保证所保藏菌群在1个月内得到复苏并产气,低温冷冻干燥法及液氮冷冻法保藏沼气产生菌菌群可达1年以上,产气速度、产气量较为理想,优于液体低温冷藏法及液体石蜡法。
2009年06期 57-59页 [查看摘要][在线阅读][下载 181K]
- 邓敏;邬小兵;李倩一;黄丽春;鲍思龙;龙敏南;
目的:利用灰绿曲霉EU7-22发酵产纤维素酶,从中分离到β-葡萄糖苷酶,分析其理化特性,确定其最佳活性条件。方法:灰绿曲霉EU7-22发酵液离心后,上清液经硫酸铵沉淀、Phenyl 6 Fast Flow(highsub)疏水层析和Sephacryl S-200凝胶层析,获得纯化的β-葡萄糖苷酶。结果:纯酶的比活性为5.1 IU/mg,得率为13.89%。SDS-PAGE凝胶电泳分析表明该酶是单亚基蛋白,其分子量为56.2 kDa。在pH4.0~6.0范围内,β-葡萄糖苷酶具有较高的稳定性,该酶的最适酶促反应pH为5.0。当β-葡萄糖苷酶在温度低于60℃的缓冲液中温育1 h后,酶活损失不大,表现了较好的稳定性;当该酶在温度高于60℃的缓冲液中温育1 h后,酶活迅速丧失。β-葡萄糖苷酶在70℃时具有最大催化活性。结论:灰绿曲霉EU7-22发酵产生的β-葡萄糖苷酶具有较高活性,具有分子量较小、最佳催化温度较高的特点。
2009年06期 63-65页 [查看摘要][在线阅读][下载 228K] - 程仕伟;董桂秀;郑彬彬;王艺霖;
目的:以活性炭为载体固定化粪产碱杆菌来源的青霉素G酰化酶,考察固定化酶的性质。方法:对影响酶固定化的因素优化筛选,确定有显著影响的因素:pH、离子强度、酶量、固定化时间进行L934的正交实验,获得最佳固定化条件,并对固定化酶的最适反应温度、pH及批次稳定性进行研究。结果:最佳固定化条件为:载体0.3g,酶量5mL,总反应体系为12mL,离子强度1mol/L,温度4℃,pH 7.0,固定化40h;最高固定化酶活性为135.9U/g湿载体。固定化酶性最适反应温度为55℃,最适pH为10,重复使用12次后没有活性损失。结论:活性炭吸附固定化青霉素G酰化酶的活性高,批次反应稳定,具有工业应用潜力。
2009年06期 66-68页 [查看摘要][在线阅读][下载 288K] - 李活孙;陈济琛;邱宏端;林新坚;
目的:筛选并优化嗜热脂肪芽孢杆菌CHB1液体发酵培养基。方法:通过Plackett-Burman试验和响应面分析方法,确定培养基的主要影响因素和最佳浓度。结果:利用SAS软件进行分析,确定对响应值影响最大的3个因素为豆粕、酵母粉、K2HPO4。最佳培养基组成为0.51%、豆粕浓度为0.425%、K2HPO4浓度为0.994%。根据模型预测得到的理论最大菌数为2.94×108cfu。在初始条件下实验,菌数为2.40×108cfu,在优化的最佳培养基条件下,实际的菌数为3.06×108cfu。菌数比优化前提高了27.3%。试验值与预测值的误差为4.08%。结论:实验值与模型预测值拟合良好。
2009年06期 68-71页 [查看摘要][在线阅读][下载 322K] - 宋毅;李松;王正祥;
目的:缩短糖化酶工业生产菌株黑曲霉A.nigerCICIM GB0506的种子制备周期。方法:对该菌的活化培养基配方及种子制备方式进行改良,并通过L9(34)正交试验对其液体培养方法进行优化。结果:在固体活化培养基中添加0.2%的酵母粉及1%的玉米淀粉,有利于加速菌体生长;加入40粒,粒径3~4mm的玻璃珠130r/min,摇床培养可以获得更为分散、均一的种子液;液体种子制备的较优条件为初始pH4.5,装液量90mL,琼脂加量0.1%,培养天数5d。结论:新的制备工艺使糖化酶种子制备时间较现在工业生产上使用的工艺缩短了4d,进行后续糖化酶摇瓶发酵产酶水平是原工艺的1.18倍。
2009年06期 71-74页 [查看摘要][在线阅读][下载 269K] - 赵恒章;赵坤;余燕;李国旺;马金友;张慧辉;
目的:以原场副猪嗜血杆菌为制苗菌株,制成自家细菌苗,预防本场猪格拉泽氏病。方法:用从河南济源一自繁自养大型养猪场发病猪分离到的副猪嗜血杆菌进行培养,经甲醛灭活,以蜂胶为佐剂,制成原场副猪嗜血杆菌灭活苗,含菌量为200亿/ml。母猪分别于产前30d和15d各注射4ml/头。仔猪出生后,分别在15、30日龄肌肉注射,1.5ml/头。结果:应用试验证明,该灭活苗保护率达98%。结论:该蜂胶苗安全、可靠,对猪格拉泽氏病有较好的预防作用。
2009年06期 v.19;No.115 72-74页 [查看摘要][在线阅读][下载 155K] - 白永莲;张洪林;邱峰;
目的:优化研究花生粕制备多肽的工艺。方法:采用酶法水解提取多肽、用总蛋白试剂盒(TP)双缩脲比色法在540nm处测定其含量。结果:用木瓜蛋白酶水解花生粕蛋白得到多肽的最佳工艺条件为:加酶量6 300u/g原料、温度45℃、底物浓度10%、酶水解时间5h。
2009年06期 v.19;No.115 74-77页 [查看摘要][在线阅读][下载 269K] - 荆士华;汲涌;李春杰;姜铭妍;杨伟超;谌明;徐慧;
目的:调节生黑醋酸杆菌生物和代谢特性,以提高发酵效率。方法:通过改变种液特性,采用半连续培养的方式,对生黑醋酸杆菌在高醇浓度下的生长特性进行了研究。结果:通过优化可以提高VC一步发酵底物山梨醇浓度达38%,32h左右发酵率达95%,山梨糖产量达360mg/ml,半连续培养连续5批之间产糖稳定,没有明显差别。结论:通过优化,有效地提高了山梨糖的产率。
2009年06期 79-80页 [查看摘要][在线阅读][下载 65K] - 刘玲玲;吕华冰;孙美琪;
目的:研究五味子色素的提取工艺条件及色素稳定性。方法:在单因素实验基础上利用L9(34)正交试验确定最佳提取工艺;以吸光度值的变化为指标,研究色素稳定性。结果:最佳提取工艺为∶料液比1∶25,乙醇浓度45%,浸提温度70℃,浸提时间40min;五味子色素光稳定性较好;在酸性、弱碱性条件下稳定,当pH≥12时出现颜色变化;对糖、氯化钠有一定稳定性;抗坏血酸和Na2SO3对色素影响较小;苯甲酸钠和H2O2对色素影响显著;金属离子Ca2+、Mg2+、Na+对色素无明显影响,Fe2+、Cu2+、Al3+对色素影响显著。
2009年06期 80-83页 [查看摘要][在线阅读][下载 412K] - 林燕文;童义平;
目的:研究马缨丹的体外抑菌效果。方法:制备马缨丹水煎煮液和乙醇提取液,测定其对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径、最小抑菌浓度及灭菌前后提取液抑菌效果的变化。结果:当两种提取液生药含量大于0.4 g/mL时,它们对三种细菌的抑菌效果依次为:枯草芽孢杆菌>金黄色葡萄球菌>大肠杆菌。马缨丹乙醇提取液对三种细菌的最小抑菌浓度分别为1/64g/mL1、/16g/mL和1/32g/mL,都比水煎煮液的结果1/32g/mL、1/8g/mL和1/16g/mL低。两种提取液经121℃高压蒸汽灭菌处理后对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用有所增强。结论:两种提取液对三种细菌均有不同程度的抑制作用,因此,马缨丹可考虑用于食品、化妆品及饲料防腐等领域,以提高产品质量。
2009年06期 v.19;No.115 83-85页 [查看摘要][在线阅读][下载 50K] - 刘莹;李芳亮;刘政;黄静;
目的:研究褐蘑菇碱提物的降血糖作用。方法:四氧嘧啶灌胃造高血糖小鼠模型,随机分成6组,分别是正常对照组、模型对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组、阳性对照组,前两组以生理盐水连续灌胃7d,阳性对照组灌胃消渴丸溶液连续7d。高、中、低剂量组(100、200、400mg/kg)以褐蘑菇碱提物溶液连续灌胃7d,摘眼球取血,测定空腹血糖值。结果:高、中、低剂量组对糖尿病小鼠的降糖率分别是16.9%、20.2%和15.1%,阳性对照组的降糖率是25.1%。结论:褐蘑菇碱提物中剂量组降糖效果要优于高、低剂量组。褐蘑菇碱提物能显著降低四氧嘧啶所制备的糖尿病小鼠血糖浓度。
2009年06期 84-85页 [查看摘要][在线阅读][下载 33K] - 俞志敏;吴克;刘盛萍;洪胜;
目的:研究静态强制通风发酵工艺对合肥市农贸市场的生物废弃物进行好氧堆肥处理过程的物质变化和腐熟效果。方法:分析发酵过程中温度、含水率、挥发分含量、纤维素、半纤维素和木质素含量等物理指标和化学指标。结果:一次发酵中堆肥的温度在55℃以上的有3d,经过一次发酵和二次发酵,堆肥中挥发分含量由85.4%降低到51.2%。纤维素的含量由20.90%减少到15.48%,半纤维素的含量由7.20%减少到1.36%,,纤维素、半纤维素在二次发酵中降解率比一次发酵的小,木质素虽在一次发酵中基本没有降解。但在二次发酵中得到有效降解,木质素含量由8.30%减少到5.38%。堆肥后物料在70d堆肥后,基本上达到腐熟程度。结论:温度、含水率、挥发性物质、淀粉实验、生物可降解度实验等指标检测可以评价静态强制通风发酵工艺对合肥市农贸市场的生物废弃物进行好氧堆肥处理过程的物质变化和腐熟效果。
2009年06期 v.19;No.115 86-89页 [查看摘要][在线阅读][下载 257K]