- 余鹰,周鸣,曹利,唐珂,李伟芳,李桂源
为了探讨真核表达载体转染对细胞生长的影响,通过脂质体介导将pcDNA3.1(+)表达载体DNA转染鼻咽癌细胞系 HNE1,G418筛选后,Southern杂交鉴定稳定表达细胞株,以 HNE1细胞为对照,观察pcNA3.1(+)/HNE1克隆细胞的生物学特性;结果显示,在pcDNA3.1(+)/HNE1阳性克隆中,一株细胞克隆培养过程中发生自溶性死亡,一株细胞生长明显受到抑制,另一株细胞生长无明显影响,揭示在宿主细胞中pcDNA3.1(+)DNA与宿主基因组DNA发生了随机整合,从而表现不同的细胞生物学改变。
2001年01期 1-3页 [查看摘要][在线阅读][下载 574k] - 王凤阳,扈荣良,杜卫华,王铁东,殷震
选择含有新霉素磷酸转移酶Ⅱ(NeoR)的重组逆转录病毒载体,用包装细胞进行包装,得到了含有重组逆转录病毒粒子的病毒上清,该病毒上清经差速离心法浓缩后,-80℃无任何添加物的情况下保存3个月,体外感染靶细胞NIH3T3以测定其滴度,冻存前后的浓缩病毒上清的感染滴度无明显降低,经过冻存的浓缩病毒上清的感染滴度仍可达到106cfu/ml,具有理想的感染靶细胞的能力。
2001年01期 3-6页 [查看摘要][在线阅读][下载 1454k] - 陈军,张高川,徐燕,陆挺,汪成富
为了研究Co1E2质粒的复制及其调控机理,构建了一种新的质粒克隆载体pBluescript22+,并且测定了它在宿主中的稳定性和拷贝数。结果表明,在宿主菌繁殖40代前,它在宿主菌中的拷贝数达到最高,之后便很快下降,虽然在宿主菌繁殖到180代时它仍未从所有宿主菌中完全丢失;而且,加入氯霉素可以提高它在宿主中的拷贝数。这提示,为了获得更多的质粒,应在宿主菌培养40代前并在向培养液中加入氯霉素继续培养2h内收获质粒。
2001年01期 6-8页 [查看摘要][在线阅读][下载 669k] - 郑敏,罗玉萍,李思光,朱必凤
以南丰蜜桔树叶为基因组DNA提取材料,建立了其RAPD-PCR分析的最佳反应体系:模板DNA1.5ng/ul,随机引物0.6M·L-1,dNTPs各 0.1mM·L-1,MgCl2.0mM·L-1,BSA250ng/ul,Tris-HCl10mM·L-1,pH9.0,KCl50mM·L-1,NonidetP40 0.1%,Taq酶0.5u,总反应体积20ul。
2001年01期 8-10页 [查看摘要][在线阅读][下载 638k] - 苏湘鄂,梅兴国,龚伟,张舟宁
比较了茉莉酸甲酯与真菌诱导物、水杨酸组合对红豆杉细胞几个抗病相关指标(POD、CAT活力、H2O2含量)及紫杉醇含量的影响,3种信号分子的组合对POD、CAT、H2O2及紫杉醇含量的影响是不一致的,MJ单独添加,MJ与SA联合作用以及MJ与F5联合作用都可使 POD活力增加,且12h后H2O2含量均升高,约在 48h达到高峰,为对照的2倍左右,但 72h后,MJ单独添加和MJ与SA联合作用组中H2O2含量变化不大,F5与MJ联合作用则使H2O2含量持续比对照高。MJ单独添加使CAT酶活在144h后才较对照低,F5、SA的加入都可使CAT酶活下降,SA的作用更显著。说明三者的诱导途径并不完全一样,以 SA和 MJ联合添加对紫杉醇合成的促进作用最大,含量达到细胞干重的 0.04%。
2001年01期 10-13页 [查看摘要][在线阅读][下载 275k] - 王正刚,蔡正森,丁贵平
利用酵母细胞本身具有的谷胱甘肽(GSH)合成酶和ATP合成GSH。在含有半胱氨酸、谷氨酸。甘氢酸的反应液中,加入已充分洗涤的酵母细胞,37℃孵育8h后,酵母体内可积累15mg/g(drycellweight)以上的GSH,而对照组仅5mg/g(drycellweight)。同时也研究了树脂法和铜盐法相结合分离纯化GSH。实验结果初步表明,利用酵母细胞中的天然谷胱甘肽合成酶和ATP,可使前体物质快速转化成GSH,是可行的。
2001年01期 13-16页 [查看摘要][在线阅读][下载 250k] - 李世国,戴美学,严芝学,李跃,许中瑞
通过苏云金杆菌SD-5菌株对混合氨基酸的抗性及在3吨发酵罐中发酵生理学的研究,显示SD-5菌株具有优良的发酵性能。用正交试验设计方法筛选出 SD-5菌株发酵培养基配方,菌数可达 110-130亿/ml.芽孢率达95%以上。
2001年01期 16-19页 [查看摘要][在线阅读][下载 240k] - 刘兴坦,王宜磊
研究了碳源、氮源、培养温度、初始pH值、接种量、通气量等条件对毛栓菌(Trametestrogu)菌丝体生长及多酚氧化酶分泌的影响;结果表明,不同碳源和氮源对菌丝体生长影响较大,对多酚氧化酶分泌也有较大影响,麦草粉和■皮为碳源,玉米粉、硫酸铵为氮源有利于多酚氧化酶的分泌;初始pH值对酶活影响较小,培养温度、通气量等对酶活影响较大。
2001年01期 19-21页 [查看摘要][在线阅读][下载 201k] - 郑毅,段慧明,施巧琴,王水顺,李志康
采用改良琼脂块鉴定平板法进行产β-葡聚糖酶曲霉的快速筛选。其中温度、初始pH、平板厚度及去氧胆酸钠的浓度都影响曲霉产β-葡聚糖酶分解底物所形成水解圈大小及透明度。同时研究发现,高浓度的葡萄糖对曲霉合成β-葡聚糖酶具有阻遏作用,通过改变分离培养基的葡萄糖浓度,结合诱变育种可以快速筛选到抗葡萄糖阻遏的高产β-葡聚糖酶的菌株。
2001年01期 21-24页 [查看摘要][在线阅读][下载 293k] - 张通,卢文玉,张冬艳,张晨鼎
通过多点采样,多次反复筛选,从旱田土壤中筛选出1株具有高絮凝活性的细菌。细菌生长过程均可产生具有絮凝作用的胞外分泌物,经实验对内蒙天然碱碱泥具有高絮凝作用。通过对菌株的个体形态特征、菌落形态特征、运动性进行观察;同时对其接触酶、氧化酶等生理生化指标进行了测试,最终确定为粪产碱杆菌(Alcaligenesfaecalis)。
2001年01期 24-26页 [查看摘要][在线阅读][下载 215k] - 王艳,金征宇,徐学明,王伟
采用透明圈法筛选得到了产菊粉酶的多株菌株,并得到了1株产内切型菊粉酶较高的隐球酵母属(Cryptococcus)菌株L1,以L1作为出发菌株经Co60诱变后,得到1株产内切型菊粉酶最好菌株C10,其诱变后低聚果糖得率比诱变前提高了52.6%,酶活力提高了51.9%。
2001年01期 26-28页 [查看摘要][在线阅读][下载 203k] - 张介驰,于德水,奚新伟,高娃,曹亚彬
试验不同碳源对产紫青霉菊粉酶生产情况的影响。结果表明,果糖、菊糖、菊芋浸汁作为碳源是菊粉酶生产较理想的诱导因子,但过量的果糖会产生阻遏。经菊糖作为主要碳源和唯一碳源筛选的菌株产酶能力可提高6-7倍。同时在发酵前期加入易利用的碳源培养菌体,后期利用菊糖诱导酶的产生,可使酶产量提高2倍。
2001年01期 28-29页 [查看摘要][在线阅读][下载 123k] - 周洪波,陈坚,周琪,赵由才
在间歇培养中研究了癸酸对 UASB反应器厌氧颗粒污泥的产甲烷霉性,并考察了pH、温度和癸酸抑制的关系。结果表明,癸酸对厌氧颗粒污泥产甲烷活性有强烈的抑制,对厌氧颗粒污泥比产甲烷活性产生50%抑制的浓度为1.9mmol/L。pH影响癸酸在液相中的存在形式,pH越低.游离癸酸比例越大,对厌氧颗粒污泥的抑制越严重。高温条件下癸酸使厌氧颗粒污泥的结构变得松散,对厌氧颗粒污泥产甲烷毒性较中温和低温条件下严重。
2001年01期 30-32页 [查看摘要][在线阅读][下载 212k] - 王岁楼,张鑫,张鸿辉,林凯
通过探索几种促进剂和前体对红酵母RY-981类胡萝卜素发酵的影响,从中选出了番茄汁和花生油2种对红酵母生长及其类胡萝卜素合成具有显著促进作用的发酵助剂,并确定了适宜的用量。应用试验和发酵过程动态分析表明,这2种发酵助剂增产效果明显(当同时添加番茄汁2.6mL/L和花生油1ml/L时,菌体量、类胡萝卜素含量和产量可分别比对照组提高53.13%、20.29%和84.07%),且对发酵过程菌体生长及生理代谢规律无不良影响。
2001年01期 33-35页 [查看摘要][在线阅读][下载 174k] - 倪雍富,朱坚屏
温度在50℃-80℃时,于20min内,对由新鲜斜面制备的橄榄星孢小单抱菌M-41的孢子悬浮液做耐热试验,结果表明,温度低于60℃时,对该菌株的孢子生长培养无影响,如超过此温度,则存活孢子数量减少。与此同时,研究了孢子的热处理效应,发现经4℃贮存1个月后的菌株斜面的孢子,在平板培养中可形成的菌落数仅为原孢子总数的1/10,此时大部分斜面孢子处于休眠状态,但当这孢子在50℃经 15min和60℃经5min加热处理后,在平板上可形成的菌落数则分别增加 6倍、4倍,表明这些处于活的非可培养状态的休眠孢子,可应用热活化处理去激活孢子发芽生长。
2001年01期 35-38页 [查看摘要][在线阅读][下载 757k] - 张领兵,魏松红,季静,王罡2001年01期 38-39页 [查看摘要][在线阅读][下载 609k]
- 潘欣,李建宏,浩云涛,阕龙华,马宇翔2001年01期 39-41页 [查看摘要][在线阅读][下载 190k]
- 梅兴国,柯铁,周爱文
建立了红豆杉细胞悬浮培养液中蔗糖、葡萄糖、果糖的HPLC的检测方法。样品经提取后,在SugarPAK1型糖柱上以水为流动相,以Sedex55蒸发光散射检测器进行检测。蔗糖、葡萄糖、果糖的线性范围为10μg/ml-3000μg/ml。回收率分别为95.8%、94.4%、94.2%。
2001年01期 41-43页 [查看摘要][在线阅读][下载 161k] - 汪安云,李天飞,肖炳光,李永平,卢江平
比较了12个烤烟品种RAPD产物Synergel与琼脂糖凝胶电泳,结果表明,Synergel电泳有较强的多态性,易于区别不同品种之间的差异,克服了琼脂糖凝胶电泳多态性差的缺点,可减轻繁重的引物筛选工作。
2001年01期 43-45页 [查看摘要][在线阅读][下载 679k] - 庄晓蕾,于树宏,王人为,王刚
采用TLC法进行了红豆杉培养细胞中紫杉醇的分离、纯化。展层剂为甲醇-氯仿(1:12)时,分离出与紫杉醇标准品Rf值相同的色斑。同时,结合紫外分光光度法进行紫杉醇的定量检测,其平均回收率为HPLC法的 91.8Z%。
2001年01期 45-47页 [查看摘要][在线阅读][下载 620k] - 李英敏,杨海波,张欣华,于媛
以海藻酸钙为载体,考察了CaCl2浓度、胶球大小、密度及初始细胞密度等条件对盐藻固定化培养的影响,确定了该藻生长的优化条件:当藻细胞密度大于106cell/ml,CaCl2浓度为0.15ml/L,注射用针头为6#,在50ml培养液中加入150个徽藻胶球时,藻细胞的生长量最大。
2001年01期 47-49页 [查看摘要][在线阅读][下载 188k] - 邢忠2001年01期 49-50页 [查看摘要][在线阅读][下载 129k]
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