- 罗素兰,林俊芳,陈如凯,唐克轩,郭丽琼
雪花莲外源凝集素 (GNA)对刺吸式昆虫和某些咀嚼式昆虫以及多种线虫均有毒性。从含GNA前体蛋白基因的质粒中亚克隆出GNA的成熟蛋白基因MGNA ,将MGNA基因插入大肠杆菌表达载体pET2 2b的不同位点 ,再经测序验证 ,得到了三种不同表达形式的GNA原核表达载体 :2 2bG1 (分泌型融合GNA蛋白 )、2 2bG2 (包涵体型GNA蛋白 )、2 2bG3(分泌型天然GNA蛋白 ) ,这为进一步在大肠杆菌中表达GNA和将GNA制成生物农药奠定了基础。
2002年06期 1-2页 [查看摘要][在线阅读][下载 51k] - 徐晓立,孙金海,任瑞文
目的 :利用RAPD技术对 9个家猪群体的遗传多样性进行分析。方法 :采用RAPD技术对 1 3/1 7罗伯逊易位纯合子猪、易位杂合子猪及正常核型猪的三个群体、丹系长白猪群体、加系双肌臀杜洛克猪群体、加系双肌臀大约克猪群体、加系双肌臀长白猪群体及欧洲猪与易位杂合子猪产生的两个杂交后备猪群体的遗传多样性进行分析 ,并分别计算其共有带率F及遗传距离指数D ,采用最小距离法绘制其树状聚类图。结果 :1 9条引物的扩增结果产生多态性 ,共得到 31 6条清晰稳定的多态型片段 ,片段长度在 2 0 0~ 4 0 0 0bp之间 ,由Nei的公式计算获得的遗传距离介于 0 0 1 6~ 0 0 92之间 ,参照系统进化树可将 9个品系划分为 3个组群。结论 :9个品系之间存在着明显的遗传差异 ,可作为进一步育种方案设计的依据。
2002年06期 2-3页 [查看摘要][在线阅读][下载 56k] - 周怀军,张洪武,安连荣,刘敏丽,杨丽,张晓曼,左永忠
为了探讨落叶松cDNA扩增因素优化组合 ,以落叶松总RNA为模板逆转录为cDNA ,然后进行PCR扩增 ,采用四因素三水平正交试验设计 ,分析比较了几种因素对PCR扩增的影响。结果显示 ,主要影响因素是Taq酶和Mg2 +,随机引物和dNTP的影响较小 ,不同水平的影响作用是 :Taq酶以高水平 ,即用量为 2U ,Mg2 +以中低水平 ,即用量为 1 5- 2 0mmol L ,可以得到多而清晰的条带 ;反之 ,则扩增效果差。
2002年06期 3-5页 [查看摘要][在线阅读][下载 87k] - 崔岩,杨庆凯,周思军
采用花粉管通道技术 ,将几丁质酶基因导入 1 4个大豆品种 ,共导入 1 1 2 5朵花 ,花朵的成活率为 4 7 8%。将Bt基因导入 1 1个大豆品种 ,共导入 2 6 0朵花 ,花朵的成活率为 4 0 8%。 8个转Bt基因品种中的D1代共收获 1 92粒种子 ,获得幼苗 1 32株 ,出苗率为 6 8 75%。把转Bt基因的 1 32株植株用X -Gluc溶液检测 ,没有发现阳性反应。将转Bt基因的 1 32株植株进行PCR检测 ,得到 5株阳性转化植株。对D1代获得的 5株阳性转化植株的D2代 ,进行PCR检测 ,得到D2代稳定遗传的阳性转化植株 2株。
2002年06期 5-7页 [查看摘要][在线阅读][下载 68k] - 顾洁,刘拥军,卢士红,蔡英林,刁世勇,韩忠朝
构建重组表达质粒pET - 32c PF4 ,并在原核中进行表达 ,以探讨其对白血病细胞系 (HEL)细胞增殖的作用。方法 :通过PCR方法从含有PF4基因的PQE - 6 0 PF4质粒中扩增PF4 ,用NcoⅠ HindⅢ双酶切 ,克隆到原核表达质粒pET - 32C中 ,使之在BL2 1表达 ,Ni-ChelatingSepharose亲和柱纯化 ,用细胞集落形成方法研究重组PF4对HEL的抑制作用。结果 :菌株筛选后在大肠杆菌中获得可溶性高效表达 ,重组PF4占菌体总蛋白的 2 2 %。肠激酶酶切除去N -端融合部分 ,获得了高纯度的重组人血小板第四因子 (rh -PF4 ) ,纯度为 95%以上。活性实验发现重组PF4可抑制HEL细胞集落的形成 ,抑制率为 4 7%。结论 :原核表达质粒pET - 32C可高效可溶性表达PF4 ,重组PF4对HEL细胞的增殖有抑制作用。
2002年06期 7-9页 [查看摘要][在线阅读][下载 74k] - 胡云龙,徐梅,张双全,黄文华,亢寿海,王俏先
目的 :研究蚯蚓提取物 (EFE)的免疫活性及抗肿瘤作用。方法 :采用小鼠移植性肿瘤S1 80 肉瘤及Heps肝癌的动物模型观察其肿瘤抑制作用。结果 :EFE对S1 80 肉瘤和Heps肝癌细胞的抑制率分别为 36 97%和 4 8 55% ;结论 :它对小鼠实体瘤细胞有明显的抑制作用 (P <0 0 1 )并提示对小鼠的细胞和体液免疫功能有显著增强作用。
2002年06期 9-10页 [查看摘要][在线阅读][下载 40k] - 陈毅坚,张灼,王艳,苏源,张睿
分离纯化了与云南红豆杉 (TaxusYunnanensis)内共生的皮下真菌 ,获得了 52株内生真菌。对 52株菌进行了分类研究 ,结果是 :无孢类各属是优势菌群 (共 2 9株 ) ,其次是木霉属 ( 5株 )和茎点霉属 ( 4株 )。首次报道了红豆杉属植物皮下真菌的类群和区系特点。
2002年06期 10-12页 [查看摘要][在线阅读][下载 57k] - 陆利霞,谷文英,丁霄霖
以姬松茸原生质体为诱变材料 ,用不同诱变剂紫外线 (UV)、钴 6 0 (Co60 )、亚硝基胍 (NTG)进行多次反复诱变处理 ,获得2株活性多糖产量较高、遗传稳定的变异株C81 1、N51 6。与出发菌株各项发酵指标比较 ,突变株其他各发酵特性变化不明显 ,而单位发酵液活性多糖含量分别提高 2 6 0 %和 30 0 %以上。
2002年06期 12-13页 [查看摘要][在线阅读][下载 46k] - 凌善锋,唐光辉,沈寅初
红发夫酵母 (Phaffiarhodozyma)是微生物发酵法生产虾青素的优良菌株。作者采用Cs1 37-γ射线重复辐照 ,并进行亚硝基胍 (NTG)诱变处理 ,选育得到一株高产虾青素的红发夫酵母YB - 2 0 - 2 8突变株。该菌株摇瓶发酵的生物量达36 3g L ,总色素含量为 1 2 1 6 0 μg g ,较出发菌株提高 30 8% ,虾青素产量达 30 9μg mL ,是一株颇具开发潜力的虾青素高产菌株。
2002年06期 13-15页 [查看摘要][在线阅读][下载 66k] - 宋波,邓晓皋
对南充市郊炼油厂活性污泥进行富集 ,驯化筛选得到 2株能以苯酚作为唯一碳源和能源生长的菌株 ,编号为S1、S2 ,两菌株可耐 1 0 ,0 0 0mg L左右的苯酚浓度。实验得出其最佳生长条件为pH 7~ 8,温度 2 5℃~ 30℃ ,在适宜条件下 ,对苯酚有较好的降解能力 ,而且苯对两菌株的生长表现为抑制作用。
2002年06期 15-16页 [查看摘要][在线阅读][下载 38k] - 张灏,华伟,郭本恒
采用半选择性培养基MRS从传统食品泡菜中筛选出 1 5株细菌 ,鉴定为植物乳杆菌。在MRSO -Chol培养基中对这些菌株进行体外胆固醇降解效果的研究 ,37℃培养 2 4h ,发现胆固醇降解量分别达到 90 5,75 3和 74 0 μg ml的ST1 0 1 5,ST1 0 0 9和ST1 0 1 0三株菌。采用MRSO培养基对所有实验菌株的胆汁耐受力进行了研究 ,发现不同菌株之间胆汁耐受力差异显著 ,但胆固醇降解量和胆汁耐受力之间没有必然的联系。
2002年06期 16-18页 [查看摘要][在线阅读][下载 62k] - 邵伟,乐超银,唐明,熊泽
介绍了巴氏醋酸杆菌以甲醇为唯一碳源 ,通过合成细菌纤维素而将含甲醇的废水中的甲醇净化。在试验条件下 ,适宜的培养条件为 :培养基初始pH值 5 0~ 6 0 ,接种量为 5% ,发酵培养温度为 30℃ ,振瓶转速 1 0 0r min ,巴氏醋酸杆菌对甲醇的最大净化浓度为 3 8% ,培养 4d时的最大净化率达 96 %以上。
2002年06期 18-20页 [查看摘要][在线阅读][下载 66k] - 张正奇,胡华,熊劲芳,温靖帮
为缩短提取核DNA的时间 ,提高DNA的得率 ,对绿豆核DNA的提取条件进行了优化。用 4 0 0ml细胞提取液 ,2 50ml饱和KCl溶液 ,0 30倍样液体积的酚 /氯仿 /异戊醇 ( 2 1∶2 8∶1 )溶液 ,0 30倍样液体积的氯仿 /异戊醇溶液 ,0 90倍体积的异丙醇 ,可从 1 0g绿豆芽中提得 4 0mg纯DNA。
2002年06期 20-21页 [查看摘要][在线阅读][下载 40k] - 王廷璞,赵菲佚,孙春香,党岩
目的 :是用于Orf病毒病的诊断和相应重组菌的检测 ,将HCEDNAHindⅢ A、B片断及重组质粒pGRL - 4A中消化的A片断用光敏生物素和地高辛进行标记 ,对不同病毒分离株DNA进行检测 ,并对不同重组质粒进行了Dot-blotting和Southern -blotting检测。结果 :用光敏生物素标记的探针最低可检出 1 2pg的DNA ,地高辛标记的探针最低可检出 0 1pg的DNA ,且有极强的特异性。
2002年06期 21-23页 [查看摘要][在线阅读][下载 75k] - 董亚芳,应贝丽,崔振玲,吴自荣
目的 :建立一种用蛋白质芯片检测乙肝病毒抗原、抗体的新方法。方法 :采用PVDF膜制备不同的蛋白质芯片 ,以辣根过氧化物酶标记抗体 ,结合酶联免疫反应 ,检测乙肝病毒素面抗原 (HBsAg)、表面抗体 (HBsAb) ,乙肝病毒e抗原 (HBeAg)、e抗体(HBeAb)。结果 :所制备的蛋白质芯片可检没到微量乙肝病毒抗原、抗体的存在 ,其中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb的最低可检测浓度分别为 1 1 μg ml、4 .8μg ml、2 .1 μg ml、1 8μg ml,而且两种抗原或两种体间并无交叉反应。此法制备芯片需 3.5h ,而检测过程仅需 2 0min ,且结果直接可用肉眼观察。结论 :将蛋白质芯片技术应用于乙肝病毒抗原、抗体的检测中 ,具有微量化、特异性强、快速灵敏、操作简便等优点 ,可望应用于临床乙肝“两对半”的检测中。
2002年06期 23-24页 [查看摘要][在线阅读][下载 48k] - 陈华友,邢自力,李媛媛,吴自荣
目的 :通过改进 ,建立一种简便经济且重复性和准确度好 ,又省时的凝血酶滴定法测定水蛭素活性。方法 :用Markwardt提出的凝血酶滴定法和改进后的滴定法分别对同一批样品进行滴定比较 ,论述改进后的滴定法的过程和优点。结果 :改进后 ,配制不同浓度梯度的凝血酶溶液 ,采用逐步缩小活性范围 ,多次换试管重滴的浓度梯度法 ,结果重复性和准确度较好 ,省时。
2002年06期 24-25页 [查看摘要][在线阅读][下载 40k] - 王小燕,蔡继业,陈勇,赵涛,夏科
目的 :对已建系BALB c小鼠胚胎干细胞膜表面进行纳米级超微结构的初步形态学研究 ,从而为从分子水平研究胚胎干细胞的增殖与分化调控机理奠定基础。方法 :利用原子力显微镜 (AFM) ,在空气中对小鼠胚胎干细胞膜表面扫描成像。结果 :AFM图像表明BALB/c小鼠胚胎干细胞呈圆盘状 ,直径约 1 0~ 1 5μm ,高约 2~ 4 μm。胚胎干细胞膜表面比较复杂 ,随着扫描范围的减小 ,切向分辨率逐渐增大 ,可达到纳米分辨。细胞表面有许多紧密堆积的椭球状颗粒 ,颗粒尺寸 (x -y方向 )为 4 0~ 80nm。结果 :利用AFM可以得到胚胎干细胞表面高分辨的、可重复的图像。
2002年06期 25-27页 [查看摘要][在线阅读][下载 88k] - 张一竹,王清祺,刘剑书,甘泉,张莉,刘曼西
采用数码显微摄像技术 ,拍摄了几种丝状真菌在悬液培养下的菌丝生长照片 ,探讨了真菌自组织形成菌丝球的机理 ,发现孢子的聚集在菌丝球的形成中起了重要作用。还研究了影响菌丝球形成的某些物化因素 ,结果表明在接种 2 0日龄的桔青霉孢子 ,孢子悬液浓度为 1 0 5 个 ml,培养液中加入表面活性剂吐温 80或曲拉通X - 1 0 0 (浓度 0 1 % ) ,摇床转速为 1 4 0r min的条件下 ,于 2 5℃培养 5d ,可形成机械强度较好的菌丝球。
2002年06期 27-28页 [查看摘要][在线阅读][下载 52k] - 苏俊,张国政,路福平,杜连祥
利用静息细胞法对中国根霉 1 2 # 菌株所产生的一种能抑制芽孢杆菌生长的物质的代谢机理进行了研究。结果表明一些碳源类物质对这种抑制剂的产生有一定的促进作用 ,而且这种抑制剂的合成与菌体蛋白合成系统有关。
2002年06期 28-30页 [查看摘要][在线阅读][下载 66k] - 唐省三
目的 :探讨钩藤对蟾蜍心脏的作用。方法 :用钩藤灌流蟾蜍心脏 ,观察灌流前后心肌收缩力、心输出量和心率的变化。结果心肌收缩幅度减小、心输出量减少和心率变慢。结论 :钩藤对蟾蜍心脏有抑制作用 ,从而降低血压。
2002年06期 30页 [查看摘要][在线阅读][下载 23k] - 李晶,张淑梅,王佳龙,王玉霞,赵晓宇
对含鲑鱼生长激素基因的甲醇酵母进行了发酵研究 ,比较了摇瓶发酵和自控罐发酵两种条件下酵母工程菌的生长和外源蛋白的表达 ,确定了自控罐发酵生产含鲑鱼生长激素酵母的工艺 ,为含鱼生长因子酵母饲料添加剂的生产奠定了基础。
2002年06期 30-31页 [查看摘要][在线阅读][下载 41k] - 吴祖芳,翁佩芳,张礼星,Philippe J BLANC
经过复合诱变处理得到的产无桔霉素的红曲色素变异株 ,编号为FM51 83,在摇瓶条件下分批深层培养 ,研究了菌株在碳源为葡萄糖条件下对单谷氨酸钠 (MSG)、组氨酸的代谢特性 ,该菌株分别在含MSG和组氨酸情况下 ,对产生的中间产物苹果酸和乙醇的代谢特性进行了比较 ,结果表明 :突变菌株FM51 83产生的酒精量为 2 5~ 2 7g L ,苹果酸浓度最大值为 5 8g L ;另外 ,在含MSG和组氨酸的培养基上对产生的色素量进行测定 ,其色价分别为 2 5 5和 1 1 8,对试验所用的氮源等条件下 ,整个发酵过程未有桔霉素检出。突变菌株FM51 83是一株较理想的无桔霉素红曲色素工业化生产菌株。
2002年06期 31-33页 [查看摘要][在线阅读][下载 61k] - 刘健,陈庆森,阎亚丽,王启明,宋丽萍,张群
优化XanthomonasampelinaTS2 0 6的发酵制备条件可以提高冰核活性和生物量。通过摇瓶培养对该菌进行培养基成分和温度的筛选。实验结果表明 :( 1 )鱼蛋白胨和乳糖的浓度对冰核活性的提高产生显著影响程度 ,玉米浆影响程度较小 ;( 2 )生物量影响程度大小的顺序依次为鱼蛋白胨 >乳糖 >甘油 >玉米浆。优化的发酵培养基配方为 :酵母粉 1 0g L、大豆蛋白胨 1 0g L、硫酸镁 0 .5g L、蔗糖 2 0g L、鱼蛋白胨 1 5g L、乳糖 1g L、甘油 2 0g L、玉米浆 1 0g L ,pH 7.0。其较优的发酵温度为 1 8℃ ,发酵时间为4 8h ,能获得较高的冰核活性和生物量。
2002年06期 33-34页 [查看摘要][在线阅读][下载 45k] - 梅运军,胡道伟,鲁明波,朱雄伟,常天俊
利用比色法研究了贝壳状革耳菌产漆酶体系在不同情况下对两种不同类型合成染料的降解脱色。结果表明 ,染料在较低浓度 ( 1 0mg L)时 ,漆酶对其降解迅速而彻底 ;pH值、培养方式 (静态培养、摇瓶培养 )对降解作用都有较大的影响 ;通过在不同时间 ( 0d、6d、1 8d)向产酶体系中加入染料证实了漆酶活性与染料脱色率呈正相关。
2002年06期 34-36页 [查看摘要][在线阅读][下载 62k] - 杨海波,于媛,李英敏,张欣华,刘艳
考察了光照时间、培养温度、二氧化碳通入量等生态因素对处于不同生长时期的小球藻、等鞭金藻、新月菱形藻中的蛋白质含量的影响。结果表明 ,不同种类的微藻 ,生态因素对其胞内蛋白质含量的影响不同。小球藻在光照 1 7h、培养温度 1 9℃、每日间歇通入 2 5mLCO2 L培养液的条件下 ,培养至对数对数生长期 ,蛋白质含量达到 70 % ;等鞭金藻在光照 1 7h、培养温度 1 9℃以上、不通入CO2 的条件下培养至静止期 ,蛋白质含量接近 70 % ;新月菱形藻光照 1 7h、培养温度 2 5℃、不通入CO2 的条件下培养至对数对数生长期 ,蛋白质含量超过 70 %。
2002年06期 36-37页 [查看摘要][在线阅读][下载 40k] - 李英敏,杨海波,吕福荣,张欣华,刘艳,于媛
对小球藻生物吸附Zn2 +、Cd2 +的影响因素进行了研究。发现小球藻对Zn2 +、Cd2 +的生物吸附主要经历了快速的物理吸附和缓慢的化学吸附两个步骤 ;pH值是影响Zn2 +、Cd2 +生物吸附的一个重要因素。pH值为 6~ 7时 ,小球藻对Zn2 +、Cd2 +的去除率较高 ,在实验条件下去除率可达 87%以上 ;研究还表明 ,小球藻干粉比新鲜藻能富集更多的Zn2 +、Cd2 +。用Freundlich方程模拟吸附等温线 ,拟合良好。
2002年06期 37-38页 [查看摘要][在线阅读][下载 46k] - 赵晓东,高继国,李成,张丕奇,桑苗,王伟东
采用液体摇瓶培养方法 ,对杏鲍菇适宜的液体培养基和液体培养条件 (适宜温度、摇瓶装量、摇瓶转速、接种量、培养基初始pH等 )进行了探讨。结果表明 ,杏鲍菇适宜的液体培养基为 :葡萄糖 3% ,蛋白胨 0 2 % ,KH2 PO40 0 5% ,MgSO40 0 5% ,pH6 5。适宜的液体培养条件为 :培养温度 2 5℃ ,培养基的初始pH6 5,摇瓶装量 1 0 0 - 1 4 0ml 50 0ml,摇瓶转速 1 50r min ,接种量 1 0 % ,最佳培养时间 7d。
2002年06期 38-40页 [查看摘要][在线阅读][下载 68k] - 朱道红,李春,杨劲伟
以玉米、麸皮、糖蜜等农副产品为主要原料 ,以金针菇 (Flammulinavalutipes)、灵芝 (Ganodermalulidum)、香菇 (Lenti nusedodes)为菌种 ,采用 4因素 (pH、时间、装料量、接种量 ) 7水平的均匀设计方案 ,进行摇瓶液体发酵工艺研究 ,筛选出各自适宜的培养基J4、L1、X3及发酵工艺条件 :金针菇、灵芝、香菇的PH、时间、装料量、接种量分别为 6 0、1 80ml、1 56h、3 5ml、2 2- 2 4℃ ;4 5、1 6 0ml、1 6 8h、5 0ml、2 6 - 2 8℃ ;5 5、1 6 0ml、1 80h、5 0ml、2 4 - 2 6℃。摇床转速为 1 4 0 - 1 70r min。菌丝体和发酵液经综合处理后调配制成饮料、口服液等六种功能性食品。
2002年06期 40-41页 [查看摘要][在线阅读][下载 42k] - 赵锦,刘孟军,蒋洪恩
介绍了几种较为常用的外源DNA导入方法 :农杆菌介导法、基因枪法、电击 聚乙二醇 (PEG)法和花粉管通道法。就其在抗性育种、控制发育和品质改良及生产药物等方面的应用作了简单概述 ,同时 ,对转基因沉默及转基因食品的安全性问题进行了相关讨论。
2002年06期 42-43页 [查看摘要][在线阅读][下载 38k] - 于艳波,李景鹏
综述了近年来国内外玉米遗传转化在受体系统、基因导入方法和选择标记等方面的研究进展。
2002年06期 43-45页 [查看摘要][在线阅读][下载 61k] - 赵锦荣,阎小君,张菊,侯瑜,郭晏海2002年06期 46-48页 [查看摘要][在线阅读][下载 71k]
- 王洪军,王继群,殷震,胡晓芳
阐述了干扰素 (IFN)在重组AIDS疫苗中的作用与意义 ,为AIDS的基因免疫治疗提出了新的研究方向。
2002年06期 47-48页 [查看摘要][在线阅读][下载 44k] - 熊爱生,姚泉洪,彭日荷,李贤,范惠琴
综述了酵母中CCAAT结合蛋白的分子结构、特性及对靶基因的调控功能。
2002年06期 48-49页 [查看摘要][在线阅读][下载 55k] - 尤珊,郑必胜,郭祀远2002年06期 49-0页 [查看摘要][在线阅读][下载 48k]
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