- 柳增善,许崇波,赵宝华,马鹤文,任洪林,赵君,张让堂,潘风光
应用RT -PCR技术 ,从大腹圆蛛 (Araneusventricosus)壶腹腺中扩增出鞭毛样丝蛋白基因 (flagelli formsilkproteingene) ,经 1 5 %琼脂糖凝胶电泳分离 ,WizardPCRPrepsDNAPurificationSystem回收后 ,将其克隆在pGEM -T载体中 ,经限制性核酸内切酶鉴定和核苷酸序列分析证实 ,构建的重组质粒pSF1中含有蜘蛛鞭毛样丝蛋白基因 ,且含有 3个重复序列
2001年04期 1-3页 [查看摘要][在线阅读][下载 40k] - 唐雪明,邵蔚蓝,沈微,王正祥,方惠英,诸葛健
用PCR方法从地衣芽孢杆菌 6 816中扩增了碱性蛋白酶基因 (apr) ,扩增的 1 14kb的DNA片段插入到大肠杆菌载体pET - 2 0b中 ,构建成重组分泌型表达载体pAPR1。pAPR1中碱性蛋白酶基因在大肠杆菌宿主JM10 9(DE3)中得到表达。SDS -PAGE分析显示融合表达产物的分子量为 30kD ,同核酸序列测定所推导的值相符。表达产物占细胞总蛋白的 7 5 % ,重组菌的酶活比出发菌株提高了 3 3倍。研究发现 ,重组的碱性蛋白酶在进入大肠杆菌周质空间时存在前肽自动脱落的现象
2001年04期 3-6页 [查看摘要][在线阅读][下载 61k] - 彭志强,俞守义,余迪求,贺竹梅
构建含CTB基因的植物双元表达载体。采用高保真PCR方法调出CTB基因 ,经测序证实核酸序列正确后 ,再亚克隆到含植物表达调控原件的载体上 ,采用冻融法和电击法 ,将含CTB的植物表达载体转入根癌农杆菌中。通过一系列分子克隆的方法获得含CTB基因的植物双元表达载体pBI -CTB和pBI-CTBK ,并经酶切证实
2001年04期 6-8页 [查看摘要][在线阅读][下载 46k] - 杜秀敏,殷文璇,张慧
构建叶绿体超氧化物歧化酶基因 (ChlSOD)。采用RT -PCR方法分离豌豆RUBP羧化酶小亚基导肽基因 (TP) ,定向克隆至pUC19测序 ;定向克隆烟草MnSOD成熟蛋白基因 (SODm)至pUC19;采用平粘端连接法将二者在pUC19中构成嵌合基因ChlSOD ,并对此基因进行序列分析。序列分析表明 :TPcDNA基因全长为 171bp ,编码 5 7个氨基酸 ;ChlSOD基因全长为 798bp ,编码 2 6 6个氨基酸 ,其中包括 171bp的TP ,12bp的Linker及 6 15bpSODm。TP与ChlSOD基因的序列分析与国外报道序列完全吻合
2001年04期 8-11页 [查看摘要][在线阅读][下载 74k] - 张立富,王学慧
4组各 16枚唐菖蒲种球分别经 4kγ、8kγ和 15kγ剂量60 Co -γ射线照射后培养根尖 ,组织学制片 ,盐酸地衣红染色 ,光学显微镜观察。结果表明 ,与对照组相比 ,经过照射的样本细胞内具有染色体桥、核空泡化、落后染色体等染色体畸变现象 ,其中 4kγ - 8kγ剂量的60 Co -γ射线是较为适宜的唐菖蒲育种的照射剂量
2001年04期 11-13页 [查看摘要][在线阅读][下载 44k] - 施旭东,孙贝加,谭笑梅,王公金,陈华,孔庆■,陈杰,范必勤
采用机械吹打、胶原酶消化、镜下显微解剖及胶原酶消化加镜下显微解剖 4种卵泡提取方式并相互对比。将分离得到的腔前卵泡在含FSH0 5IU/mL、1 0IU/mL和 2 0IU/mL的培养液中培养 ,检测其E2 分泌量。与机械吹打、胶原酶消化相比 ,胶原酶消化加镜下显微解剖法不仅提取卵泡多 (P <0 0 1) ,而且可以得到原始、初级、次级各级卵泡。但操作时间较长 (P <0 0 1)。得到的腔前卵泡在FSH为 0 5IU/mL、1 0IU/mL和 2 0 1IU/mL的培养液中培养 ,所分泌的E2 分别为 10 86pg± 4 11pg、31 5 5pg± 9 34pg和4 3 82pg± 18 76pg ,较之对照组的 4 99pg± 2 0 9pg有显著性差异 (P <0 0 1) ,E2 的分泌量与FSH浓度呈剂量依赖性关系。FSH有促进腔前卵泡分泌E2 的作用
2001年04期 13-17页 [查看摘要][在线阅读][下载 82k] - 刘曼西,刘晓,徐铭
大丽轮枝菌 (Verticiliumdahliaekleb .)是引起棉花黄萎病的病原真菌。使用从大丽轮枝菌V4 4 (高毒 )和V6 4 (低毒 )的菌丝体制备的诱导物 (I4 4 和I64 )作用悬浮培养的豫棉 6号 (感性 )和豫棉 8号 (耐性 )细胞系 ,用过氧化物酶法测定诱导后 30min内的反应性氧变化 ,发现仅有不亲和性较高的体系 ,即弱毒力的大丽轮枝菌 (V64 )和耐性的豫棉 8号所组成的体系 (I64 -Y8)表现最高的反应性氧迸发 ,3min - 6min时增加 6 1 8%。使用显著低于杀菌浓度的剂量的水杨酸 (SA)和H2 O2 作用上述大丽轮枝菌 ,发现水杨酸和H2 O2 都能影响微生物 ,经 1mmol/L水杨酸和 0 2mmol/LH2 O2 作用后的微生物 ,其所产生的诱导物对植物细胞反应性氧的诱导作用要高于未被作用的微生物的诱导物。两种化学性质的影响的共同点是使反应性氧迸发的峰值时间提前 ,峰值增加 ,水杨酸提前 12min ,H2 O2 的影响还突出表现在使反应性氧迸发的曲线锐化 ,即峰值时间范围的平均每分钟增加率表现显著增加 ,9min - 12min时达到 10 9%
2001年04期 17-19页 [查看摘要][在线阅读][下载 44k] - 阎克玉,刘凤珠
烟叶中以细胞壁物质存在的碳水化合物在燃吸时产生不良影响。在一定条件下向烟叶中施加一定量的纤维素酶和果胶酶 ,使部分细胞壁物质降解为水溶性糖 ,烟质得到改善。纤维素酶和果胶酶最佳用量均为每克烟叶 30u酶量 (活力 )。最佳作用条件为 :烟叶水分 2 5 % ,作用温度 5 0℃ ,作用时间 4h ,且在真空条件下可使细胞壁物质降解更有效 ,可降解烟叶中细胞壁物质 10 %左右 ,烟叶的评吸质量得到明显改善
2001年04期 19-22页 [查看摘要][在线阅读][下载 50k] - 贾建波,李向前,李东
对植酸酶产生菌进行了诱变育种、分离纯化 ;采用固体培养法生产植酸酶及对酶的热稳定性进行了研究。研究结果表明以麸皮为主要培养基成分 ,添加 2 %葡萄糖 ,1%(NH4 ) 2 SO4 ,0 0 2 %MgCl2 ,4 0ml水 ,2 9℃恒温培养 8d~ 10d后 ,其酶活可达 5 6 15u/g .ssc。用含CaCl2 2 %的pH5 0的醋酸缓冲液抽提效果好 ,相对酶活达 94 %。经提取 ,粗酶粉活力可达 80 130u/g ,温度升到 70℃ ,处理 1h ,相对酶活为 90 %
2001年04期 22-26页 [查看摘要][在线阅读][下载 68k] - 施庆珊,李良秋,林小平,邱玉棠
采用诱变得来的枯草杆菌GMI- 74 1和产氨短杆菌GMA - 2 892在 1 2L自控发酵罐上进行肌苷发酵试验 ,产氨短杆菌GMA - 2 80 2在种子培养基中培养 15h后 ,菌浓度达 1 0× 10 11个 /ml,而同样条件下 ,枯草杆菌GMI- 74 1菌浓度只有 9 5× 10 9个 /ml。在 1 2L自控发酵罐上发酵时 ,GMA - 2 80 2发酵周期 5 4h ,产肌苷达 2 0 4 0g/L ,发酵液主要原材料成本为 4 4 1 1元 /吨 ;GMI - 74 1发酵周期 6 0h ,产肌苷达19 5 2g/L ,发酵液主要原材料成本为 5 5 9 1元 /吨
2001年04期 26-28页 [查看摘要][在线阅读][下载 45k] - 苏湘鄂,梅兴国,余倚亭
研究了在 2 5 0mL摇瓶中 ,不同浓度的硝酸镧、硫酸铈铵、硝酸亚铈 3种稀土化合物对细胞生长及紫杉醇分泌和释放的影响。结果表明 ,在培养初期加入稀土元素 ,3种不同稀土化合物对细胞生长影响强弱不同 ,但趋势相似 ,均使细胞的延迟期缩短。 1ppm的Ce4 + 促进细胞生长的效果最明显 ,细胞干重第17d达到 10 9g/L。在指数期加入稀土元素 ,10ppmCe3 + 刺激细胞生长的效果最明显 ,细胞干重最高值达到 11 5g/L ,比对照高 1 5g/L ,而 10ppm的La3 + 抑制细胞的生长。经稀土元素处理后 ,细胞胞内和胞外紫杉醇含量都有大幅度的提高 ,其中以 10ppmCe3 + 处理 ,胞外紫杉醇释放率最大 ,达 37 7%
2001年04期 28-31页 [查看摘要][在线阅读][下载 52k] - 陈朝银,刘丽,贲昆龙2001年04期 31-34页 [查看摘要][在线阅读][下载 59k]
- 杨惠敏,王根轩
阐述了SAGE(serialanalysisofgeneexpression)的原理和操作方法 ,综述了SAGE目前在生物学各方面的应用进展 ,并着重对SAGE在植物分子生态学中的应用前景提出了设想
2001年04期 35-37页 [查看摘要][在线阅读][下载 43k] - 何迎春,任春梅,高必达
评述了耐草甘膦基因克隆和作物转化研究的新进展。生物耐草甘膦的机理主要在于 1)过量表达EPSPS(磷酸烯醇式丙酮酰莽草酸合成酶 )基因 ;2 )EPSPS基因发生突变而对草甘膦的亲和力减弱 ,或3)解毒酶作用。现已从大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、矮牵牛、拟南芥、烟草、胡萝卜等中克隆了aroA等EPSPS基因并进行了分子生物学研究。作物转基因抗草甘膦育种主要通过三条途径 :1)转入经过修饰的或突变的耐草甘膦EPSPS基因 ,2 )转入过表达的EPSPS基因 ;3)导入草甘膦代谢酶基因
2001年04期 38-40页 [查看摘要][在线阅读][下载 40k] - 戴盛明,杨春旭
提高免疫系统对肿瘤的杀伤能力是肿瘤免疫学上目的 ,随着对免疫肿瘤抗原的了解以及对T细胞免疫反应和肿瘤逃逸机制的进一步认识 ,这一目的已取得了进展。体内含量稀少的抗原递呈细胞———树突状细胞 (DCs)是这些机制的关键。体外从外周血祖细胞诱导扩增这些细胞为肿瘤免疫治疗开辟了新纪元。DCs 作为肿瘤疫苗 ,在B细胞淋巴瘤、黑色素瘤、前列腺癌等病人身上已有了一定的疗效
2001年04期 40-43页 [查看摘要][在线阅读][下载 58k] - 郭德煌,邱丽玲,柳晓兰,罗庆良,董波,毛秉智
利用蛋白凝胶电脉迁移率变动分析法 (EMSA)分析STAT5信号分子与周期蛋白cyclinB1的相互作用。探针位于cyclinB1启动子区的 - 783到 - 75 4之间 ,该区域包含SATAT5与cyclinB1的结合序列TTN5AA。STAT5与cyclinB1共形成a、b和c三条蛋白滞后带 ,当用点突变的探针作用时 ,仅剩下滞后带a和滞后带c ,因此滞后带b可能为STAT5与cyclinB1的特异性结合条带
2001年04期 43-45页 [查看摘要][在线阅读][下载 45k] - 朱新产,王宝维,王世成
双浓度梯度超薄胶PAGE分离DDRT -PCR扩增产物表明 ,在 30cm长的凝胶板上能清晰分辨长度仅差 1bp的DNA ,清楚的显示出 10 0多条分离谱带 ,并可直接从银染PAGE胶中回收DNA谱带
2001年04期 45-47页 [查看摘要][在线阅读][下载 65k] - 李植峰,沈晓京,张玲,赖炳森,吴红梅,谭亚芳,孙树秦
采用超临界CO2 萃取雅致枝霉的油脂 ,从最小样品需要量、处理样品能力及油脂得率等方面将其与索氏提取法进行综合对比评价 ,并对两种方法提取的雅致枝霉油脂的脂肪酸组成进行气相色谱分析。索氏法的油脂得率最高 ,但耗时较长 (>6h) ,样品需要量大 (>2 0 0 0mg) ,且提取的油脂中杂质较多 ;超临界CO2 萃取法油脂得率较索氏法低 ,但提取的油脂中杂质较少 ,单位时间内样品处理能力强 ,是索氏法的 6倍 ,且可处理微量样品 (5 0mg)。气相色谱分析结果表明两种方法提取的油脂 ,均含 12种已知脂肪酸 ,且每种脂肪酸的含量相近。综合各项指标考虑 ,超临界CO2 萃取法优于索氏法 ,是一种简便、有效的真菌油脂提取方法 ,适合油脂及多不饱和脂肪酸高产株菌筛选的实际应用需要
2001年04期 48-49页 [查看摘要][在线阅读][下载 21k] - 段琼芬,赵虹,王有琼
用水浴浸提法和微波浸提法完成了 5 4个塔拉豆样品中的塔拉豆多糖含量的测定实验 ,比较了这两种方法的分析结果、测定成本以及在可操作性等方面的异同。实验结果表明 ,水浴法与微波法所得到的测定结果是一致的 ,但微波法的成本才是水浴法的 1/ 2 5左右 ,而工效却是它的 3倍多 ,说明微波法浸提法是一种简便、快速、高效低耗的测定方法 ,值得推广应用
2001年04期 51+2页 [查看摘要][在线阅读][下载 23k] 下载本期数据