- 左永忠;李帅英;李坤霞;王桂霞;杨胜勇;何丽英;姜国斌;
目的:克隆芽变毛白杨生根相关基因片段。方法:采用诱导生根和抑制生根两种处理,分别提取芽变毛白杨(Mutant Populus tomentosa)皮部RNA,进行逆转录和差异显示,筛选和克隆特异片段。结果:研究表明不同处理基因表达有一定差别。经Northern鉴定,诱导生根处理的扩增产物中有一条与生根相关的差异片段。将其克隆和测序,该片段编码序列长度316bp。GenBank中查询没有发现同源性较高的基因。结论:成功地获得了长度316bp的芽变毛白杨生根相关基因片段,可能为新基因的一部分。该基因片段的获取将为分离全长生根相关基因,查明该基因表达调控的机理提供基础。
2008年01期 No.104 1-3页 [查看摘要][在线阅读][下载 304K] - 吴伟斌;施碧红;温建新;罗秀针;施巧琴;吴松刚;
目的:从北方堆肥土样中分离、筛选获得产耐热脂肪酶的嗜热菌株FS32b,确定该菌株的分类学地位及其所产耐热脂肪酶基因。方法:通过研究该菌株16SrDNA基因序列的系统进化树,进行菌种分类鉴定并利用PCR技术获得其脂肪酶基因。结果:FS32b与报道过的Bacillus subtilisX60646有紧密的亲缘关系,二者的16S rDNA序列相似性为99%,其脂肪酶基因经序列测定分析表明,该菌株含长度为639bp的耐热脂肪酶基因的完整开放阅读框架(ORF)。此片断编码有213个氨基酸的酶。结论:FS32b初步鉴定为Bacillus subtilis,其脂肪酶基因的克隆为以后高效基因工程菌的构建奠定了基础。
2008年01期 No.104 5-9页 [查看摘要][在线阅读][下载 840K] - 冉旭华;闻晓波;孟凡;周恩民;
目的:扩增猪细小病毒(Porcine Parvovirus,PPV)LJL12株NS1基因的全长序列,并进行同源性分析。方法:参考GenBank上公布的PPV中国株NS1基因序列,设计一对特异性引物扩增LJL12株NS1基因,测定序列,使用分子生物学软件进行同源性分析。结果:LJL12株PPVNS1基因全长1 989bp,编码662个氨基酸。与其他PPV中国株NS1的核苷酸同源性在98.6%~100%之间,氨基酸同源性在98.5%~100%之间。其中,与南京株的同源性最高。结论:PPV NS1蛋白具有高度保守性,适合用作诊断抗原。LJL12株PPVNS1基因的克隆,为进一步研究NS1的功能和作用奠定了基础。
2008年01期 5-7页 [查看摘要][在线阅读][下载 329K] - 邓力华;于元杰;李宝健;肖国樱;
目的:为了获得水稻的广谱抗虫性,同时也避免由潮霉素抗性基因引起的安全性问题。构建以抗除草剂基因(Epsps基因)为筛选标记的多基因抗虫植物表达载体pCTSK。方法:以双元载体pCAMBIA1300为基础,将潮霉素抗性基因hpt替换成携带烟草叶绿体转运肽序列TSP的草甘膦抗性突变基因aroAM12(编码细菌5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合成酶Epsps)作为筛选标记基因,获得中间表达载体pCTSM1300。然后再连接上3个抗虫基因(马铃薯蛋白酶抑制剂基因Pin-Ⅱ、苏云金杆菌毒蛋白基因Bt cryI(A)及雪花莲外源凝集素基因GNA)的完整表达片段(包含各自的启动子和终止子)。结果:通过PCR方法和酶切方法鉴定已成功地构建了该表达载体;通过不同实验方案的数据分析,得出在载体构建的大分子连接中优化的一次连接法连接效率高于二次连接法的结论。
2008年01期 11-15页 [查看摘要][在线阅读][下载 563K] - 陈坤;黎明;樊欣迎;路福平;
目的:以β-半乳糖苷酶为报告基因构建原核启动子检测体系。方法:以由质粒pDL扩增获得的bgaB基因为报告基因,将其克隆到大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体pBE2,构建成一个具有启动子活性检测功能的重组质粒pBEB。将组成型启动子P43和诱导型启动子Pspac克隆入pBEB,得到重组表达载体pBEBP43和pBEBPspac,转化至大肠杆菌和枯草芽孢杆菌。结果:两种不同类型的启动子均能在大肠杆菌BL21和枯草芽孢杆菌1A751中启动bgaB基因的表达。结论:成功构建具有较为广泛适用性的原核启动子检测体系。
2008年01期 No.104 13-16页 [查看摘要][在线阅读][下载 206K] - 陈维春;李玲玲;李朝飞;杨凯;庞义;
目的:克隆和表达苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multicapsid nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)开放阅读框108(open reading frame,ORF108,Ac108)基因,为进一步研究其功能打下基础。方法:将Ac108基因克隆至原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中表达AC108蛋白。以纯化的AC108蛋白作为抗原,免疫新西兰大白兔制备蛋白的多克隆抗体。用该抗体检测了该蛋白在病毒感染细胞中的表达。结果:实现了AC108蛋白的表达,获得了AC108蛋白的多克隆抗体,Western blot检测发现在AcMNPV感染的Sf-9细胞中有一条大小约为27kDa的杂交带,远大于预期的11kDa。结论:AC108蛋白可能以同源或异源聚合物形式在电场中迁移。
2008年01期 18-20页 [查看摘要][在线阅读][下载 164K] - 赵喜红;闻晓波;冉旭华;周恩民;
目的:采用基因工程手段表达PRRSV VR 2332菌株的核衣壳蛋白(N蛋白)。方法:利用RT-PCR方法扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)VR 2332菌株的核衣壳蛋白(N蛋白)基因并将其克隆到原核表达载pET30a(+)上,得到重组质粒rpET30a-PRRSV/N,并将其转入受体菌E.coliBL21(DE3)pLysS感受态细胞中,经IPTG诱导,通过SDS-PAGE电泳检测和Western blotting分析表达产物的特性。结果:SDS-PAGE电泳检测和Western blotting分析结果表明,表达的蛋白大小约为19kDa,符合预期结果,并能与抗PRRSV N蛋白的单克隆抗体发生特异性反应,说明表达的蛋白具有良好的免疫原性,可应用于临床PRRSV抗体的检测。结论:在大肠杆菌表达系统内成功表达了PRRSV核衣壳蛋白(N蛋白)。
2008年01期 20-23页 [查看摘要][在线阅读][下载 224K] - 徐学武;裴树俊;黄盛东;俞卫锋;
目的:构建人神经生长因子信号肽与人β-内啡肽融合基因的真核表达载体,研究人神经生长因子信号肽介导β-内啡肽的分泌表达。方法:取得人基因组后,PCR法获取人的神经生长因子信号肽部分序列及人β-内啡肽序列;通过SOE-PCR法将两段DNA序列连接,然后插入到真核表达载体内,测序正确后扩增转染级的真核表达载体。表达载体脂质体法转染NIH3T3细胞,转染后48~72h收集细胞及培养上清,RT-PCR法检测融合基因的转录,RIA法测定细胞外β-内啡肽的浓度。结果:成功构建全人源的分泌型表达β-内啡肽的真核表达载体,DNA序列经测序完全符合实验设计;融合基因能够顺利地得到转录并进行表达翻译,在细胞培养上清中可检测到其产物。结论:构建的真核表达载体能够分泌表达人β-内啡肽,提示人神经生长因子信号肽序列能够发挥其介导蛋白产物分泌表达的作用。
2008年01期 No.104 21-23页 [查看摘要][在线阅读][下载 154K] - 任红梅;陈武荣;俞卫锋;
目的:研究阻塞性黄疸大鼠心组织中血管紧张素转化酶2(ACE2)的mRNA和蛋白质水平,探讨阻塞性黄疸大鼠心功能损害与ACE2的关系。方法:36只SD大鼠随机分为假手术(SO)组(n=18)和胆总管结扎(BDL)组(n=18),于术后3d、7d、10d分别随机取2组大鼠的心组织(n=6),采用实时定量PCR方法和免疫组化方法检测心组织内ACE2的mRNA和蛋白质的表达水平。结果:(1)BDL组的总胆红素(TBIL)和肝功能指标(ALT)较SO组显著升高(P<0.01),BDL组中7d组TBIL为最高(158.65±10.80mmol/L)(P<0.05),3d组ALT为最高(236.07±12.49U/L)(P<0.05);(2)BDL组心组织ACE2的mRNA水平较假手术组均呈一定程度的下降,其中7d组下降最显著(P<0.01);(3)黄疸大鼠心肌纤维中ACE2的阳性率明显减少,且强度减弱,其中7d组减少最明显。结论:阻塞性黄疸大鼠心脏中的ACE2 mRNA和蛋白质水平均下调,可能是引起阻塞性黄疸后心功能损害的因素之一。
2008年01期 25-28页 [查看摘要][在线阅读][下载 260K] - 刘仁春;吴晓英;范一文;林影;
目的:初步筛选脂肪酶高产菌株。方法:以1444粗壮假丝酵母作为出发菌株,对其进行紫外线诱变育种。结果:经紫外诱变的重复处理、摇瓶复筛和遗传稳定性实验,最终得出两株高产酶突变株Z6及Z8,其酶活分别为22.6、25U/ml,酶活力较出发菌株分别提高了120%和150%。酶学性质研究表明:Z6、Z8的最适反应温度分别为45、50℃,最适pH都为8,在pH 6~9较稳定。Z6、Z8的热稳定都较好,在50℃下保温60min酶基本不失活。结论:经紫外诱变获得的突变株Z6及Z8有进一步的研究价值。
2008年01期 28-31页 [查看摘要][在线阅读][下载 401K] - 范元发;江贤章;陈由强;陈如凯;黄建忠;
目的:选育出适合发酵甘蔗汁生产燃料乙醇的高产酿酒酵母的菌株。方法:以酵母菌株YS5作为出发菌株,将酶解破壁后获得的原生质体进行紫外诱变,通过初筛和复筛进行选育。结果:获得一株高产酒精的酿酒酵母突变株YS5-1,该突变株发酵甘蔗汁的乙醇含量可达12.6%(V/V),较出发菌株的11.6%(V/V)提高了8.6%,其糖的转化率高达94.5%,高于出发菌株的87.0%。结论:通过5次连续传代培养后其突变株的乙醇产量保持稳定,表明该突变株完全可以用于发酵甘蔗汁生产燃料乙醇。
2008年01期 No.104 29-32页 [查看摘要][在线阅读][下载 312K] - 张林达;刘红玉;鲁双庆;贾彩云;刘臻;
目的:筛选表面活性剂产生菌,用于降解有机农药,提高氧化塘处理效率。方法:以液体石蜡为惟一碳源进行选择性培养,通过测定发酵液的排油活性和表面张力,对有机农药厂的活性污泥进行产生物表面活性剂细菌筛选,并对筛得的细菌进行形态学、生理生化及16SrDNA试验和鉴定。结果:筛选出3株产生物表面活性剂的细菌,经鉴定均属于不动杆菌属。结论:证实了有机农药活性污泥中存在表面活性剂的产生菌,对有机农药降解存在助溶作用。
2008年01期 34-36页 [查看摘要][在线阅读][下载 124K] - 靳利娥;于连林;鲍卫仁;
目的:利用酸性培养基(牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、马丁氏琼脂培养基)对鸡嗉囊内的内源益生菌进行筛选。方法:通过好氧、兼性好氧培养、划线逐层倒平板分离筛选,观察表观和一系列生化实验鉴定所筛选的益生菌。结果:初步确定益生菌有细菌的链球菌属、乳酸的杆菌属、真菌的酵母菌属。
2008年01期 36-38页 [查看摘要][在线阅读][下载 261K]
- 李法君;傅洪拓;王亮晖;李明爽;王晓娟;
目的:建立一个适于日本沼虾研究用的AFLP反应体系。方法:以日本沼虾DNA为材料,对基因组酶切时间、选择性扩增中Mg2+、dNTP浓度、预扩增产物稀释倍数及选扩性引物M+3/E+3配比等进行了比较分析。结果:酶切5h,选扩25μl PCR反应体系中Mg2+2mmol/L,dNTP 1.2mmol/L,预扩产物稀释40倍,选扩引物M+3/E+3配比为8∶1,所得产物在毛细管电泳中可得到稳定的结果。结论:该体系的构建为AFLP技术在日本沼虾相关研究中的应用奠定了基础。
2008年01期 38-41页 [查看摘要][在线阅读][下载 570K] - 邱文武;孙伟生;窦美安;
目的:建立一种适合菠萝基因扩增的SRAP反应体系。方法:用改良CTAB法提取菠萝DNA,对扩增结果影响重要的反应组分Taq酶、Mg2+、随机引物及dNTPs进行单因素体系优化,以确定最佳菠萝SRAP反应体系。结果:用这种方法建立的菠萝SRAP反应体系为:20μL反应体系中含1×PCR buffer,2.5mmol/L Mg2+、1.2UTaqDNA聚合酶、0.2mmol/L dNTPs、0.3μmol/L随机引物、20ng DNA模板。结论:用引物Me4-Em4组合对供试菠萝19个品种进行扩增,结果扩增条带清晰、丰富、重复性好,此SRAP反应体系适合菠萝基因型扩增。
2008年01期 No.104 39-42页 [查看摘要][在线阅读][下载 548K] - 彭波;陈瑞;黄兴奇;刘小烛;董转年;程在全;
目的:比较以确定适用于野生稻总RNA提取的方法。方法:用改良的异硫氰酸胍法、TRIZOL法、SDS法和CTAB法分别提取云南3种野生稻和栽培稻滇超6号在灌浆期颖果的总RNA。结果:SDS法能够提取的普通野生稻和疣粒野生稻的总RNA的纯度高,其A260/A280介于1.9938~1.9267;而TRIZOL法只适用于栽培稻滇超6号,CTAB法对于疣粒野生稻和药用野生稻提取效果一般,电泳条带不很清晰,其A260/A280介于1.8243~1.6928;而新建立的改良的异硫氰酸胍法都能提取完整性好、高得率(浓度介于0.9358~1.2008μg/μl)和高纯度的RNA(A260/A280大于1.8),电泳28S rRNA和18S rRNA条带清晰,且该方法操作简单、耗时少、效率高。结论:改良的异硫氰酸胍法适合于野生稻颖果总RNA的提取,提取的总RNA完整性好、得率高。
2008年01期 No.104 42-45页 [查看摘要][在线阅读][下载 176K] - 郭凌飞;邹明宏;曾辉;杜丽清;陆超忠;
目的:针对澳洲坚果成熟叶片中富含多糖、多酚等杂质的特点,建立澳洲坚果成熟叶片中提取高质量DNA的方法。方法:采用改良CTAB法和改良SDS法提取澳洲坚果样品的总DNA,并对产物进行紫外、电泳及PCR扩增检测。结果:改良CTAB法的平均产率为13.6μg/g,略低于改良SDS法18.5μg/g,但改良CTAB法可有效去除多糖等杂质,获得的基因组DNA质量高。OD260/OD280均在1.7~1.9之间。进行ISSR扩增可获得清晰、多态性好的条带。结论:改良CTAB法较之改良SDS法更适合于从澳洲坚果成熟叶片中提取高质量DNA。
2008年01期 No.104 45-47页 [查看摘要][在线阅读][下载 115K] - 毕瑞明;
目的:提高小麦成熟胚遗传转化效率,为建立快速高效的小麦成熟胚遗传转化体系奠定基础。方法:以普通小麦HB341、SN2618T、S021和栽培二粒小麦成熟种子为试材,采用整粒切胚诱愈的方法,通过农杆菌GV3101/pBI121::gus介导,研究负压处理对小麦成熟胚遗传转化的影响。结果:接种侵染过程中的负压处理,对小麦成熟胚愈伤组织的诱导没有显著影响,但对小麦成熟胚的遗传转化却有显著性影响。负压处理10、20、30次,转化率分别较对照组提高了9.37倍、10.90倍和10.03倍,最高转化率可达12.50%。同时负压处理能够提高小麦成熟胚转化效率,具有普遍意义。结论:该研究为快速高效小麦成熟胚转化体系的建立提供了依据。
2008年01期 49-51页 [查看摘要][在线阅读][下载 51K] - 王咏星;范镇明;冯新忠;苟萍;
目的:通过改变酶的反应温度和pH,离体分析白斑狗鱼体内淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶活性变化。方法:分别采用Folin酚法、DNS法和氢氧化钠滴定法测定蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。结果:在白斑狗鱼肝胰脏、胃二部位,淀粉酶的最适温度均为30℃,肠道淀粉酶的最适温度为40℃;最适pH值分别为4.0、2.0、7.0。肝胰脏、胃二部位脂肪酶的最适温度均为40℃,肠道脂肪酶的最适温度为50℃;最适pH值分别为5.0、4.0、5.0。肝胰脏、胃、肠道蛋白酶的最适温度均为50℃;最适pH值分别3.0、3.0、9.0。结论:在各自最适温度下,脂肪酶、淀粉酶、蛋白酶比活力均为:肠道>胃>肝胰脏。
2008年01期 51-53页 [查看摘要][在线阅读][下载 63K] - 冯新忠;王咏星;钱龙;苟萍;
目的:研究温度p、H、金属离子对新疆额尔齐斯河野生丁(鱼歲)消化道蛋白酶、淀粉酶活性的影响。方法:酶学和生化法。结果:丁(鱼歲)蛋白酶活性,后肠>前肠>中肠>肝胰脏;淀粉酶活性,后肠>中肠>前肠>肝胰脏。肠道、肝胰脏蛋白酶的最适温度分别为35℃、40℃,淀粉酶的最适温度均为40℃。消化道各部位蛋白酶、淀粉酶的体外最适pH为7.5。在试验的离子浓度范围,高浓度Ag+、Cu2+抑制酶活力;高浓度Fe3+、Mg2+、Ca2+促进酶活力;Pb+、Ba2+对消化道酶活力影响依浓度和部位而变。结论:消化酶最适温度均高于所处环境温度,最适pH值变化范围偏碱性;不同浓度金属离子对丁(鱼歲)消化道各部位蛋白酶、淀粉酶活力高低表现出不同的变化趋势。
2008年01期 53-57页 [查看摘要][在线阅读][下载 2218K] - 陈伟平;陈必链;张艳燕;
目的:获得最佳的微藻藻胆蛋白提取方法。方法:采用溶胀法、反复冻融法、低浓度氯化钙溶液提取法和玻璃珠处理法等四种方法分别对紫球藻、蔷薇藻和念珠藻三种藻细胞进行破碎,通过测定藻红蛋白的纯度和浓度对四种细胞破碎方法效果进行比较。结果:当细胞密度为1.000g/L时,采用反复冻融法处理紫球藻和蔷薇藻时能够获得最高的藻红蛋白纯度(OD545/OD280),分别为1.250和1.669,藻红蛋白的浓度分别为29.788mg/L和36.026mg/L,细胞密度对藻红蛋白纯度影响较小;低浓度氯化钙溶液提取法能使念珠藻藻红蛋白的纯度(OD545/OD280)达到0.477。结论:紫球藻和蔷薇藻经反复冻融法破碎细胞,藻红蛋白纯度高,提取效果好;而对念珠藻藻红蛋白提纯采用低浓度氯化钙溶液提取法效果好。
2008年01期 57-60页 [查看摘要][在线阅读][下载 219K] - 霍昕;杨迺嘉;刘文炜;高玉琼;刘建华;
目的:研究秦芄(Radix Gentianae Macrophyllae)中的挥发性成分。方法:利用水蒸气蒸馏法提取秦芄挥发油,用GC/MS进行测定,结合计算机检索技术对分离的化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果:分离出8个组分,鉴定出7个化学成分。检出率为91.40%。秦艽挥发性成分大于1%的分别确定为萜品烯-4-醇1.224%,(E,E)-2,4-癸二烯醛1.295%,棕榈酸乙酯32.009%,棕榈酸54.608%。结论:首次报道了用GC/MS对秦艽挥发性成分的研究,为该类植物的研究开发提供必要的试验数据。
2008年01期 60-61页 [查看摘要][在线阅读][下载 64K]
- 朱国丽;王雪华;计巧灵;贾红丽;张丕鸿;葛春辉;
目的:探寻获得罗布红麻胚性愈伤组织的最佳培养基和条件,并探讨该愈伤组织对盐胁迫的生理反应。方法:设计不同激素配比和浓度培养基,诱导并挑选、扩增胚性愈伤组织。对罗布红麻胚性愈伤组织进行不同浓度的盐胁迫(0、50、70、100和200mmol/L),研究其在不同时期不同浓度盐胁迫下的脯氨酸含量、丙二醛含量、超氧化化物歧化酶(SOD)的活性变化、及超氧化物歧化酶同工酶和过氧化物同工酶的谱带变化。结果:获得了大量罗布红麻胚性愈伤组织及其盐胁迫下的生理生化数据和图谱。结论:罗布红麻胚性愈伤组织的产生主要依赖0.5mg/L 2,4-D的作用,此外,转瓶过程中细心观察,不断挑选也很重要。不同浓度的盐胁迫不同时间,从MDA和脯氨酸含量变化上看,经50~70mmol/L盐胁迫3~5d,罗布红麻胚性愈伤组织进入最敏感期,之后它对盐胁迫有个快速适应过程;根据SOD酶活性变化,盐胁迫第7d时,经70mmoL/L以上的NaCl处理组SOD酶活均保持在一个较高的水平,说明此时SOD酶正在发挥重要作用;从SOD同工酶谱看,Rf值为0.46的酶带是盐胁迫组特有的,说明它与盐胁迫密切相关;从POD同工酶谱看,Rf值为0.01的条带为J0J、2J、5组特有,带很窄但色较深,此酶带所代表的酶对盐的敏感性存在特殊性。
2008年01期 61-65页 [查看摘要][在线阅读][下载 359K] - 张东向;王蕊;张磊;
目的:利用发根农杆菌1.2556诱导黄芩,得到毛状根。方法:采用共培养法诱导黄芩毛状根,研究不同外植体,不同预培养时间,不同菌液浓度,不同感染时间,乙酰丁香酮,抗生素浓度等条件对转化率的影响。结果:利用预培养2d后的茎段为转化材料,当发根农杆菌浓度在OD600值为0.5时感染10min,转化率最高。在菌液中或培养基中添加100μmol/L乙酰丁香酮可以提高黄芩毛状根的转化效率。培养基中加入250mg/L抗生素Cef能较好地抑制发根农杆菌生长。结论:用共培养法诱导出黄芩毛状根,并确定了最佳诱导条件,以提高黄芩外植体的诱导率。
2008年01期 65-68页 [查看摘要][在线阅读][下载 165K] - 徐保红;杨洁;吴娜;李培;朱敖兰;
目的:研究盐胁迫下对灰绿藜各部位中水分、粗蛋白、脯氨酸含量的变化。方法:通过NaCl胁迫盆栽试验,测定分析不同浓度盐胁迫(0 mmol/L~500 mmol/L)下灰绿藜各部位水分、粗蛋白和脯氨酸含量变化。结果:灰绿藜根中水分含量的变化趋势呈先升高后下降的趋势,在300 mmol/L胁迫下其含水量达到最高67.82%;在茎、叶、全草中呈先下降后升高又下降的趋势。粗蛋白含量在根中两降两升,在茎、叶、全草中呈先升高后下降又升高的趋势,在NaCl浓度为200mmol/L时均达到最大值,分别为3.4738%、2.3791%、3.9132%和3.0968%;各部位中脯氨酸含量变化均呈先升高后下降又升高的趋势,且在NaCl浓度为500mmol/L时均达到最高值,分别为254.33μg/g、180.83μg/g、197.27μg/g、222.71μg/g。结论:得出灰绿藜在盐胁迫下三种成分的变化。
2008年01期 68-70页 [查看摘要][在线阅读][下载 195K] - 黄益;吕淑霞;
目的:分离纯化Beta proteobacterium sp.T1菌株所产的壳聚糖酶。方法:采用(NH4)2SO4(20%~70%)分级盐析、阴离子交换树脂DEAE Cellulose 52柱层析、SephadexG-100柱层析技术进行分离纯化,采用SDS-PAGE鉴定酶的纯度、分子量。结果:经DEAE Cellulose 52柱层析,壳聚糖酶纯化了13.19倍;经Sephadex G-100柱层析,壳聚糖酶纯化了26.32倍。结论:纯化后的酶经SDS-PAGE鉴定已达到电泳纯,分子量29.5kDa。
2008年01期 No.104 69-70页 [查看摘要][在线阅读][下载 138K] - 李培;杨洁;朱敖兰;吴娜;徐保红;
目的:比较研究几种提取若羌红枣多糖的方法。方法:通过正交实验设计研究影响若羌红枣多糖提取的诸因素如提取料液比、温度、提取时间、提取次数等,确定条件范围,优化提取条件,得到提取若羌红枣多糖的最佳工艺条件。结果:热水法提取红枣糖的最佳条件:提取温度100℃、料液比1∶16、提取时间4h,提取1次;酶法提取红枣多糖提取的最佳条件:pH4.5,温度60℃、时间1h,酶用量0.03%;碱法提取红枣多糖的对佳条件:Na2CO3,温度80℃、时间3h,料液比1∶20。结论:三种提取方法以酶提取法的效率最高,碱提取法次之,热水提取法的效率最低。
2008年01期 No.104 70-73页 [查看摘要][在线阅读][下载 292K] - 陈芬;李莉;陈鸣丽;胡佑伦;
目的:分析比较醋浸泡后大豆中的脂肪酸(FA)含量的变化,为大豆开发提供实验数据。方法:用石油醚提取总脂肪,甲基化后用气相色谱分析脂肪酸的含量分布。结果:醋浸泡28d后,醋豆总脂肪的相对含量趋于稳定,其中醋豆和大豆相比,软脂酸下降了1.21%,硬脂酸下降了0.58%,油酸下降了3.01%,亚油酸增加了1.32%,亚麻酸增加了6.32%。结论:饱和脂肪酸(SFA)和单不饱和脂肪酸的相对含量下降,多不饱和脂肪酸(PUFA)相对含量显著升高。醋大豆及大豆的多不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸相对含量的比值分别为4.11和3.2。上述变化的从营养学或生理学的角度,更符合人体需求。
2008年01期 75-77页 [查看摘要][在线阅读][下载 188K] - 李新社;陆步诗;伍翠兰;
目的:在添加糖化酶和纤维素酶的条件下,采用黑曲霉与假丝酵母发酵丢糟生产单细胞蛋白饲料。方法:采用L9(34)水平正交试验对糖化酶与纤维素酶的添加量、黑曲霉与假丝酵母的比例、发酵时间进行了探讨。结果:单细胞蛋白饲料生产的最佳生产工艺条件为:糖化酶的添加量为0.03%、纤维素酶的添加量为1.5%、黑曲霉∶假丝酵母=1∶3、培养时间为8d,产品粗蛋白含量可达38.72%。结论:酶制剂的添加对丢糟转化为单细胞蛋白饲料具有明显的促进作用。
2008年01期 No.104 76-78页 [查看摘要][在线阅读][下载 87K] - 张金平;阚振荣;苏维;
目的:探讨混合培养体系对染料的脱色和降解的条件,为实际应用奠定一定基础。方法:利用4株细菌和4株丝状真菌组建了一真菌细菌混合物培养体系,考察了该混合培养体系对各单一依染料的脱色与降解情况,初步研究了其对混合染料脱色与降解的工艺条件,包括接种比例、处理时间、氧气供应、接种顺序等。结果:真菌与细菌同时接种,且接种比例为2:1,振荡培养到3h就达到很高的脱色率和降解率,12h时脱色率和降解率分别达到98.36%和89.89%;而且该混合培养体系对高浓度染料有较强的耐受性,在染料浓度高达320 mg/L时,脱色率和降解率仍高达97.03%和74.03%。结论:得到了该混合培养体系对染料脱色和降解的最佳工艺条件。
2008年01期 80-83页 [查看摘要][在线阅读][下载 136K]
- 罗剑;杨民和;施巧琴;
该文论述了基因组改组技术的产生和原理、方法和特点,以及该技术的应用、意义及其发展前景。基因组改组技术是首先对微生物菌株进行诱变,筛选出正向突变的菌株,然后通过原生质体"递推式融合"使这些正向突变的若干个菌株进行基因组重组,从中筛选出符合育种要求的重组子,从而在短时间内获得性状得到大幅度提高的菌株。
2008年01期 No.104 81-83页 [查看摘要][在线阅读][下载 78K] - 李卫国;常天俊;龚红梅;
DNA甲基化是表观遗传学的重要组成部分,在调节植物基因表达、生长发育和抵御逆境等方面起着重要作用。随着对DNA甲基化研究的不断深入,基于PCR检测DNA甲基化状态的技术DNA甲基化敏感扩增多态性(MSAP)由于其检测多态性高,操作简单等优点被广泛应用于植物种质资源鉴定、植物改良、种群遗传结构分析及植物进化研究等遗传学各个领域。该文综述了MSAP技术的原理、实验方法以及其在植物遗传学研究中的应用,并对其今后应用前景进行了展望。
2008年01期 No.104 83-87页 [查看摘要][在线阅读][下载 81K] - 鹿桂花;陈恒雷;吕杰;曾宪贤;张军;
综述了食用菌原生质体再生、诱变、融合技术以及原生质体技术与其他生物技术相结合的研究进展,提出了在现有研究中存在的问题,并展望了原生质体技术的发展趋势。
2008年01期 89-91页 [查看摘要][在线阅读][下载 41K] - 田歆珍;王贤磊;孙桂琳;李冠;
γ-亚麻酸(GLA)是人体必需的具有多种特殊生理功能的多不饱和脂肪酸,它在机体的物质代谢和生理调控上发挥着十分重要的作用,已被世界上许多国家用于医药工业、生产功能性食品和美容护肤品等多种领域。该文综述了GLA的生物活性、动植物来源、微生物资源及应用基因工程技术改造植物、微生物生产GLA的研究进展。提出了目前常用的三种生产GLA的方法存在的问题。认为利用基因工程技术改良油料作物生产GLA的理论和方法已经建立,具有广阔的应用前景。
2008年01期 91-94页 [查看摘要][在线阅读][下载 68K] - 莫继先;高学军;
牛初乳IGF-1是从牛初乳中提取制备的单链多肽蛋白质。氨基酸序列与其他物种同源性很高,其中与人类的IGF-1完全一致。在制备牛初乳IGF-1方面上,国内外的传统方法都是通过制备型色谱柱小剂量制备;而检测方面,国外早期是通过放射性免疫法(RAI)来测定,近几年也发展了一些新的技术,国内则大多数利用电泳、HPLC和Western blot。IGF-1具有促进细胞生长、增强机体免疫机制、促进骨骼生长、维持神经系统、调节心脏机能等功效,已被广泛用于临床、生物学作用等研究领域。牛初乳IGF-1的大量制备具有相当广阔的前景,为牛初乳功能性食品的研制与开发带来新的方向。
2008年01期 No.104 93-95页 [查看摘要][在线阅读][下载 188K] - 马镝;赵秀香;吴元华;高芬;
膜分离技术与传统分离技术相比,具有明显的优势,常用于现代生物制药中分离、浓缩、分级与纯化蛋白质、多肽等热敏性生物药品。该文重点讨论微滤(MF)、超滤(UF)、纳滤(NF)等膜分离技术在生物农药生产中的应用。
2008年01期 No.104 96-98页 [查看摘要][在线阅读][下载 68K] 下载本期数据