生物技术


  • Milbe mycin C5-O-甲基转移酶基因的克隆

    阎浩林,池田治生,大村智,野野宫

    目的是克隆milbemycinC5 -O -甲基转移酶基因。以阿维菌素 (avermectin)产生菌S .avermitilis中C5 -O -甲基转移酶基因aveD为探针 ,利用核酸杂交分析法将aveD的主要同源区定位在 (2 2 )g - 8-E - 10阳性克隆所整合的 0 3kbSstI-BgⅢ片段上。最后对aveD同源区及附近的核苷酸序列进行了测序分析和相应区域的基因缺失分析。结果表明 ,该区域存在一个与aveD同源性较强的基因milD。与aveD功能相似 ,milD参与milbemycin的生物合成 ,在milbemycin生物合成中可能催化C5位OH的甲基化反应。

    2002年02期 1-4页 [查看摘要][在线阅读][下载 98k]
  • 抗马铃薯晚疫病质粒的分子克隆及其体外PCR扩增

    赵晓祥,浦瑞斯-王革伏,王玉霞,王佳龙,赵晓宇

    从一株假单胞菌中分离其质粒DNA ,并将其转化到大肠杆菌DH5α中。通过晚疫病抑菌实验证明此菌对马铃薯晚疫病有很强的抑制作用 ,对该质粒进行纯化和限制性酶切位点分析后 ,将此质粒重组到含有绿色发光蛋白基因的质粒载体中。获得的重组质粒在体外经PCR扩增证明抗晚疫病的重组质粒已克隆到含有绿色光蛋白基因的质粒载体中

    2002年02期 4-5页 [查看摘要][在线阅读][下载 62k]
  • RAPD法对罗曼蛋鸡基因组DNA多态性分析初报

    刘欣洁,马建岗

    利用RAPD(随机扩增多态DNA)方法 ,选用 37种10bp的随机引物 ,对罗曼蛋鸡基因组DNA进行多态性分析 ,发现其中两种引物 (OPS - 0 8,OPY - 0 6 )在三代 7个品系中都能扩增出多条带并且反映其基因组DNA的多态性 ,可用于检测出不同品系间的差异 ,并且这两种引物的碱基序列有 80 %是对应互补的。

    2002年02期 6-7页 [查看摘要][在线阅读][下载 55k]
  • 纯化探针降低基因芯片杂交结果的背景

    张宝,马文丽,石嵘,吴清华,宋艳斌,郑文岭

    研究探针的纯化对基因芯片杂交结果的影响。将乙醇沉淀的探针和用DNA纯化试剂盒纯化的探针分别与基因芯片杂交 ,在同等条件下进行杂交后清洗和芯片扫描检测。结果表明 ,纯化的探针与基因芯片杂交结果的背景低 ,而未纯化的探针背景强 ,阳性信号界限比较模糊。运用基因芯片进行基因表达谱研究 ,要求杂交检测的结果必须低背景。探针的纯化是杂交结果的一个重要因素

    2002年02期 6-7页 [查看摘要][在线阅读][下载 62k]
  • 新的纤溶酶产生菌培养条件及其酶性质研究

    MGUI MBI Etienne(埃蒂安纳),吴自荣

    采用定向筛选方法 ,分离到一株能产生强烈分解纤维蛋白的枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtilis)EM2 9- 5。对其生长、产酶条件、酶性质进行系统研究 ,结果表明 :生长和产酶温度 2 5 - 37℃ ,37℃时最好 ;生长最适pH6 4 - 7 0 ,产酶为pH7 0 - 8 0 ;12种碳源氮源均能利用 ,但对生长和产酶均有利的是大豆浸出液EM2 9- 5。纤溶酶为外分泌蛋白酶 ,发酵上清液经硫酸铵沉淀 ,透析脱盐 ,上离子交换柱和凝胶过滤柱后得纯酶。经SDS-PAGE电泳得单一条带 ,分子量为 32 5 0 0左右 ;等电聚焦电泳分析PI9 0左右 ;酶蛋白在pH5 0 - 10 0范围内稳定 ;作用最适pH9 0 ,为碱性蛋白酶 ;5mmPMSF能完全抑制酶活性 ,为氨酶蛋白酶 ;不能分解人工合成的氨基酸的酯 ,而能分解纤维蛋白 (原 ) ,特别对交联纤维蛋白具更高亲和性

    2002年02期 7-10页 [查看摘要][在线阅读][下载 96k]
  • 酶法降解植物纤维素技术研究

    王卫国,赵永亮

    用正交试验法探讨了以麦秸为原料进行纤维素酶降解的工艺条件。正交试验的结果表明 ,影响麦秸纤维素降解的因素的主次顺序为A(酶添加量 ) >B(底物浓度 ) >E(时间 ) >C(温度 ) >D(pH值 ) ,纤维素酶降解麦秸纤维素的最佳组合为A3 B1E3 C3 D2 ,即纤维素酶的添加量为 0 2 % ,底物浓度为 5 % ,反应时间为 2h ,反应温度 5 0℃ ,pH5 0时为最佳条件。在比常规酶解法时间缩短 12 - 30倍的条件下 ,能使纤维素降解成葡萄糖的转化率达 2 2 3%。

    2002年02期 10-11页 [查看摘要][在线阅读][下载 41k]
  • 氮源对谷氨酰胺转胺酶合成的影响

    杨立刚,江波,王璋

    研究不同氮源及培养条件对轮枝链霉菌 (Streptoverticillium)SK - 1合成谷氨酰胺转胺酶 (TGase)的影响 ,结果当以 5 0g/L玉米浆为主要氮源时发酵酶活水平可达 3 0 1μmol/ (min·ml) ;对摇瓶发酵条件进行优化后 ,以 5 0g/L玉米浆为主要氮源 ,起始pH值为 7 0~ 7 5 ,培养温度为 30℃ ,接种量范围为 5 % - 10 % ,培养时间为 38h时 ,酶活最高可达 4 5 2 μmol/ (min·ml) ,酶活提高了5 0 17%。玉米浆作为氮源时发酵酶活比较高 ,发酵时间也较短 ,酶的生产成本较低

    2002年02期 12-14页 [查看摘要][在线阅读][下载 56k]
  • 粗毛栓菌产漆酶对考马斯亮蓝的脱色降解

    朱陶,赵永芳

    粗毛栓菌粗酶液经聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,在CBBG - 2 5 0染色后 ,漆酶带处有一透明圈 ,经纯化漆酶和CBBG - 2 5 0溶液直接作用以及菌体的培养结果证实 ,漆酶对CBBG - 2 5 0具有一定的脱色降解作用 ,在漆酶活力达 118u/ml时 ,CBBG - 2 5 0溶液在5 95nm波长的光吸收 6 0min内下降了 32 4 %。该粗毛栓菌产漆酶对工业染料废水也具有一定的降解脱色作用。

    2002年02期 14-16页 [查看摘要][在线阅读][下载 69k]
  • 中国红豆杉悬浮培养细胞的超低温保存

    臧新,梅兴国,龚伟,常俊丽

    对中国红豆杉悬浮细胞超低温保存中几个主要因素进行多方面对比研究。结果表明 ,取培养 16d的细胞进行超低温保存效果最好 ;10 %DMSO +8%葡萄糖作为冰冻保护剂对冷冻细胞起到最佳的保护效果 ;较好的降温程序是在 0℃中预处理30min后移入 - 2 0℃中停留 180min ,然后转入 - 70℃中停留 30min ,最后投入 - 196℃液氮中保存。该实验还对保存后细胞的恢复性生长进行了验证。

    2002年02期 14-15页 [查看摘要][在线阅读][下载 40k]
  • 金黄地鼠不同组织碱性磷酸酶同工酶研究

    王鑫

    采用聚丙烯酰胺圆盘电泳方法 ,分析了金黄地鼠血清、肝脏、心脏和骨骼肌 4种组织的碱性磷酸酶同工酶。结果表明 :在同种动物中不同组织的碱性磷酸酶谱具有明显的组织特异性 ,并且各部分酶带有重叠现象。在不同组织中碱性磷酸酶具有特异性 ,这是与各组织的生理功能相适应的结果。

    2002年02期 16页 [查看摘要][在线阅读][下载 22k]
  • 多核丝状真菌的选育及遗传稳定性

    陆茂林,单志萍,孟妤

    细胞中多核体的存在 ,对其隐性突变体的分离及优良形状的稳定遗传产生了相当大的障碍。通过采用大剂量的NTG诱变多核单细胞丝状真菌三孢布拉霉JMβ817的孢子 ,再经紫外线复合照射该孢子制备成的原生质体 ,使其高产菌株———超黄突变体的隐性基因CarS和CarD得以表达 ,从中分离到一株CarS隐性突变株JMβ2 87,β -胡萝卜的产量达到 2 36g/l,比出发菌株提高了 30 %。并通过孢子的亚培养进行定向选育 ,使高产性状得以稳定遗传 ,为促进工业化发酵生产天然 β -胡萝卜提供了必要的手段。

    2002年02期 17-19页 [查看摘要][在线阅读][下载 61k]
  • 氧化亚铁硫杆菌固定化技术研究

    邱建辉,邸进申,赵新巧

    在生物脱硫过程中 ,以H - 2软性填料作为氧化亚铁硫杆菌 (Thiobacillusferrooxidans)的固定化载体 ,构建了固定床生化反应器。考察了不同稀释率固定下床生化反应器氧化Fe2 + 的情况 ,在通气量为 330L/h ,稀释率为 0 6h-1条件下 ,Fe2 + 最大氧化速率达 7 6 7g[Fe2 + ]/L·h。该反应器连续运行 10 0d,固定化细胞稳定性良好

    2002年02期 19-21页 [查看摘要][在线阅读][下载 60k]
  • 赤藓糖醇产生菌B845的形态、生理特征

    吴燕,杨晓伟,陆茂林

    分离筛选到了一株产赤藓糖醇能力高的菌种B84 5 ,通过对B84 5的形态、生理生化特性试验 ,发现该菌耐高渗 ,能发酵葡萄糖、蔗糖、麦芽糖 ,细胞为圆形、椭圆形 ,单边或多边芽殖 ,有真菌丝 ,在固体培养基上培养 7d后颜色开始变深 ,由黄色变成褐黑色 ,参阅真菌鉴定手册 ,初步鉴定为圆酵母属菌 (Torulasp.)

    2002年02期 20-21页 [查看摘要][在线阅读][下载 41k]
  • VC二步发酵种液质量判定

    李义,刘耀平,周彬,冯树,张忠泽

    研究了影响种子质量的各个参数与提高种子质量的途径。结果显示 :在苏云金杆菌 (俗称“大菌”)与氧化葡萄糖酸杆菌 (俗称“小菌”)组成一新组合菌系中 ,种液中菌的浓度对发酵影响较大 ,种液中的 (大菌OD值 - 1 6×小菌OD值 )与发酵速度成正相关 ,可作为种子质量的判定指数。同时对种液的配方进行均匀设计实验 ,结果显示 :适当提高玉米浆、葡萄糖等成分与降低尿素的浓度及调高pH值均有利于种液质量的改善

    2002年02期 22-24页 [查看摘要][在线阅读][下载 67k]
  • 植物油对隐甲藻(Crpythecodinium cohnii)生长和DHA产量的影响

    王菊芳,梁世中

    研究了植物油对隐甲藻 (CrypthecodiniumcohniiATCC30 5 5 6 )生长及DHA产量的影响。结果表明 :培养基中添加 1~ 2 %橄榄油或豆油均可促进隐甲藻生长及增加DHA产量 ;添加 1~ 5 %花生油对隐甲藻生长及DHA产量影响不大。以获得DHA为目的 ,则培养基中添加 1%的橄榄油或豆油即可

    2002年02期 22-23页 [查看摘要][在线阅读][下载 38k]
  • 磺胺对小麦种子萌发和幼苗生长的影响

    刘兴坦

    初步探讨了磺胺对小麦种子萌发与幼苗生长的影响。研究表明 ,用低浓度 (<6 0mg/L)的磺胺溶液浸泡小麦种子 ,能显著增加幼苗的根重、根长和根冠比 ,提高根系活力和叶片叶绿素的含量 ,降低幼苗的苗高、苗重 ,但对发芽率影响不大。高浓度(>10 0mg/L)的磺胺则强烈抑制小麦幼苗根、芽的生长 ,并导致幼苗形态的不良变化

    2002年02期 25-26页 [查看摘要][在线阅读][下载 39k]
  • 云南省部分地区产菊粉酶霉菌的初步调查

    周帼萍,沙涛,程立忠,丁骅孙

    从昆明、石林、西双版纳、思茅等地区的菊科植物根系土样 ,昆明、石林地区市售洋姜表土 ,洋姜提取液中的污染菌及洋姜表面霉烂处 ,分离纯化产菊粉酶菌株 ,共获得 10 5株霉菌 ,对以上菌株进行了初步鉴定 ,对产酶情况进行了初步的研究。发现分属于拟青霉属 (Paecilomycessp.)、头孢霉属 (Cephalosporiumsp.)、阜孢霉属 (Papulariasp.)、丝衣霉属 (Byssochlamyssp.)、指轮枝孢霉属 (Stachylidiumsp .)、刚毛菌属 (Lacellinasp .)、交链孢属 (Alternariasp .)、地霉属 (Geotrichumsp.)、毛霉属 (Mucorsp .)、枝孢霉属(Cladosporiumsp .)、金孢霉属 (Chrysosporiumsp.)、镰刀菌属 (Fusariumsp .)、根霉属 (Rhizopussp.)等 13个属的霉菌 ,是国内未见报道的新的菊粉酶产生菌。

    2002年02期 25-26页 [查看摘要][在线阅读][下载 43k]
  • 不同培养方法对甘薯无菌苗生长的影响

    毕瑞明

    试验结果表明 ,在甘薯组织培养中液体培养不降低无菌苗生长势 ,对无菌苗生长有一定促进作用 ,适合于甘薯无菌苗的快速繁殖。液体培养 2 0d比相同条件下固体培养的无菌苗植株高度高出 6 3 16 % ,经方差分析 ,差异显著 ,具有统计学意义 ;液体培养 6 0d比相同条件下固体培养的无菌苗植株高度、单株叶片数、单叶面积分别高出 5 9 4 3%、10 6 70 %、4 9 82 % ,经方差分析 ,前两者差异显著 ,具有统计学意义。

    2002年02期 27-29页 [查看摘要][在线阅读][下载 63k]
  • BAC文库构建中的几个技术问题探讨

    陈凡国,姜涛,张学勇

    构建BAC文库有两个关键环节 :一是载体的克隆 ;二是HMW(highmolecularweight)DNA的制备。针对这两个问题 ,作者在载体的纯化及基因组DNA的回收选择等方面做了较深入的探讨

    2002年02期 28-29页 [查看摘要][在线阅读][下载 50k]
  • 大肠杆菌质粒DNA PCR模板的快速制备

    罗樨,王强,赫然,张颖,刘秋云

    2002年02期 29页 [查看摘要][在线阅读][下载 30k]
  • 血吸附法浓缩NDV病毒及与其他几种方法的比较

    李燕,王恩秀,陈溥言

    用人O型红细胞吸附—释放病毒的方法纯化被感染的鸡胚尿囊液中的新城疫病毒 (NDV) ,然后分别对纯化的病毒液及弃去的上清进行血凝检测。结果表明 ,使用 1%的红细胞悬液只能吸附部分病毒 ,损失较大 ,只有将红细胞悬液的浓度增加到2 0 %时 ,才基本将病毒全部吸附住。同时还比较了差速离心、PEG沉淀、PEG包埋等方法。

    2002年02期 30-31页 [查看摘要][在线阅读][下载 41k]
  • 改良法克隆淋球菌特征核酸片段

    余升红

    目的 :采用改良法克隆淋球菌特征核酸片段 30 0bp到pBS .sk中 ,作为淋球菌检测试剂盒的阳性标本来源。方法 :采用PCR扩增淋球菌特征核酸片段 30 0bp ,扩增条件 :94℃ 30s,5 5℃ 1min ,72℃ 1min ,35个循环 ,另外用SmalI酶切pBS .sk ,与PCR产物采用改良法平端连接 :连接温度 14℃ ,72h,连接反应体积 15 μl,加 10uSmalI防止pBS .sk自连 ,连接完成后取 5 μl连接液转化 2 0 0 μlCaCl2 制备的感受态受体菌JM10 9,用碱法提取重组子质粒 ,电泳比较质粒大小 ,PCR初筛 ,最后双酶切鉴定。结果 :经过电泳比较质粒大小 ,PCR初筛 ,最后双酶切鉴定 ,得到 5个克隆重组子。

    2002年02期 30-31页 [查看摘要][在线阅读][下载 53k]
  • SPG菌体和SPA菌体花环试验检测ANA方法学研究

    韩慧

    目的 :建立一种检测ANA的新方法 ,并对其进行方法学评价。方法 :采用SPG菌株和SPA菌株中的G蛋白和SPA可与IgG的Fc段结合而不影响Fab段的生物学活性的特性 ,建立花环法测ANA ,并对核抗原制备 ,SPG和SPA菌株处理 ,检测方法等因素进行探讨。结果 :(1)最佳实验条件 :以枸橼酸处理大鼠肝细胞核片为抗原片 ,以TCA -SPG为反应菌体 ,采用一步法进行试验。(2 )患者血清花环率 (84 8%± 2 8% ,X±SD) ,诊断敏感性 10 0 % ;正常人花环率 (6 5 %± 0 6 % ,X±SD) ,诊断特异性 10 0 %。结论 :该法特异性、灵敏性、重复性均好 ,适于一般实验室和中小医院推广使用

    2002年02期 31-32页 [查看摘要][在线阅读][下载 36k]
  • 红景天根中总黄酮和多糖的微波提取及含量分析

    刘志勇,鲁建江,王莉,成玉怀

    目的 :从红景天中提取有效成分总黄酮、多糖 ,并测定其含量。方法 :分光光度法。结果 :测得红景天总黄酮含量4 6 2 % ,平均回收率为 98 5 9% ,RSD1 2 3% (n =3) ;多糖含量 9 12 % ,平均回收率为 99 2 5 % ,RSD1 12 % (n =3)。结论 :运用微波技术辅助测定红景天中总黄酮和多糖的含量 ,反应速度加快 ,收率提高

    2002年02期 32页 [查看摘要][在线阅读][下载 19k]
  • 羊Ⅲ型前胶原的分离纯化

    林丁,刘兴明,李伟道,刘预

    目的 :从山羊胎皮提纯羊Ⅲ型前胶原 ,以代替人Ⅲ型前胶原生产免疫试剂。方法 :以山羊胎皮为原料 ,通过 11 2 %硫酸铵及 10 %氯化钠盐析和超速离心 ,DE32和DE5 2阴离子交换纤维素柱层析提取纯化得到羊Ⅲ型前胶原。结果 :测得羊Ⅲ型前胶原分子量为 4 6 8kDa。主要成分甘氨酸、羟脯氨酸和脯氨酸构成比分别为 4 0 4 %、11 7%和 11 1%。与人羊Ⅲ型前胶原的交叉反应为 6 5 89%。结论 :提纯得到的羊Ⅲ型前胶原可以用于代替人Ⅲ型前胶原生产免疫检测试剂

    2002年02期 34-35页 [查看摘要][在线阅读][下载 37k]
  • 稀土对红花幼苗生长及部分酶同工酶的影响

    王俊云

    用不同浓度的混合稀土Re(NO3 ) 3 处理红花幼苗 ,测定稀土元素 (RE)对红花幼苗生长及其部分酶同工酶的影响。结果表明 :RE对红花幼苗生长的影响是适宜浓度起促进作用 ,低于适宜浓度作用不明显 ,高于适宜浓度有抑制作用 ;RE能提高幼苗地上部分淀粉酶、酯酶和过氧化物酶的活性 ,特别是淀粉酶的活力增强显著 ,但对过氧化物酶的影响不明显

    2002年02期 35-36页 [查看摘要][在线阅读][下载 34k]
  • 金鱼草愈伤组织过氧化物酶活性及其同工酶变化

    初立业

    在不同激素比例的MS培养基上 ,金鱼草 (Antirrhinummajus)茎愈伤组织主要有三种分化状态 :a愈伤组织不分化 ;b以器官发生途径分化出不定芽和不定根 ;c通过胚胎发生途径形成胚状体。过氧化物酶活性与愈伤组织分化程度呈正相关。未分化愈伤组织与分化芽、分胚状体及分化芽和根的愈伤组织酶活性呈线性递增关系 ,相对酶活力为 1:3:5 :6。在其同工酶谱中 ,三种状态的愈伤组织都具有酶带I和II,表明这两种同工酶与细胞的增殖生长有联系。分化的愈伤组织比未分化愈伤组织多出现酶带Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ ,说明这三条酶带是影响分化的特异蛋白质。在分化芽的愈伤组织中 ,还存在酶带Ⅳ ,说明它是催化器官发生途径的特有同工酶。

    2002年02期 36-37页 [查看摘要][在线阅读][下载 52k]
  • 计算机可视化技术在抗生素效价测定中的应用

    董鸿晔,金杰,赵青

    2002年02期 37-38页 [查看摘要][在线阅读][下载 54k]
  • 固-液两相法培育金针菇菌丝体制作保健饮料

    康德灿,李卫锋,曹新志,谢兴

    利用毛细管吸收水份迅速的原理 ,以不同配比的方解石和玉米芯作材料 ,加入培养液 ,筛选最佳载体模型 ,用固 -液两相法快速培育金针菇菌丝体 ,在 6 0℃低温提取营养成份 ,与灵芝、枸杞等天然植物原料水浸提取物调配 ,采用最优主辅料配方 ,制得香味浓郁的儿童天然饮品 ,为用生物技术开发玉米芯等农副产品资源制作保健食品探索了一条可行实验途径

    2002年02期 38-39页 [查看摘要][在线阅读][下载 36k]
  • 玉米秸杆型多效酶制剂产生菌发酵条件的研究

    胡风庆,赵春晖

    目的 :利用从土样中筛选出的菌株 (Y8)发酵生产木聚糖酶、β-葡聚糖酶和纤维素酶 ,以使玉米秸杆中的非淀粉类抗营养物质转化为可被单胃禽畜利用的简单物质 ,使玉米秸杆成为非常好的饲料粮替代物 ,以缓解近年来对玉米饲料粮需求的压力。方法 :通过调节培养基中的碳氮原料比、pH、产酶菌的接种量及发酵温度 ,以确定产酶菌的最佳发酵条件。结果 :在最适的发酵条件下 ,Y8产酶菌可生产出高活性的木聚糖酶、β-葡聚糖酶和纤维素酶。结论 :以 4∶1的碳氮原料比 ,并添加一定量的无机盐制成的培养基 ,调节pH至 5 5 - 6 0 ,灭菌后以 0 15 - 0 2 5 %的接种量 ,在 2 8- 30℃的条件下连续培养 5 0h ,可使Y8菌株产生高活性的木聚糖酶、β -葡聚糖酶和纤维素酶 ,此条件为Y8菌株的最佳培养条件

    2002年02期 38-39页 [查看摘要][在线阅读][下载 36k]
  • 药物基因组学研究进展

    吴清发,纪佳,董伟

    2002年02期 39-41页 [查看摘要][在线阅读][下载 64k]
  • 遗传标记的研究进展

    王镭,郑茂波

    2002年02期 41-42页 [查看摘要][在线阅读][下载 43k]
  • 微生物菊粉酶的研究进展

    王静,金征宇

    综述了微生物菊粉酶在菌种选育、菊粉酶的纯化与性质、基因结构及生产应用等方面研究的进展

    2002年02期 42-45页 [查看摘要][在线阅读][下载 99k]
  • 微生物降解褐煤的酶学机理

    王风芹,袁红莉,陈文新

    2002年02期 45-47页 [查看摘要][在线阅读][下载 81k]
  • 精细肝切片技术在药物代谢研究中的应用

    杨哲琼,彭仁琇

    2002年02期 47-48页 [查看摘要][在线阅读][下载 60k]
  • 几种物理方法对细胞膜通透性的影响

    刘晓艳,丘泰球,胡爱军,刘石生

    2002年02期 48-49页 [查看摘要][在线阅读][下载 50k]
  • 一氧化氮的检测及改良方法

    唐省三

    2002年02期 49-0页 [查看摘要][在线阅读][下载 44k]
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