生物技术


论著

  • 一株嗜盐细菌的16SrRNA基因序列分析

    汪长东;陈鹏;闫旭;何光源;

    目的:从舟山深海海泥中获得了底泥样品,并从中提取到了一株嗜盐细菌。方法:通过用不同盐浓度的培养基培养,挑取单菌落,反复划线纯化,得到了嗜盐菌的单菌落,通过菌株基因组DNA的提取、菌株的抗性实验、质粒的提取、16SrRNA的PCR扩增及克隆、16SrRNA的全序列分析等手段。结果:得到该菌株的16SrRNA的基因序列。结论:该株嗜盐菌是一株新色盐杆菌。

    2008年06期 v.18;No.109 1-3页 [查看摘要][在线阅读][下载 758K]
  • 应用ITS序列分析新疆濒危植物盐桦的系统发育

    梅新娣;张富春;

    目的:依据ITS序列分析新疆濒危植物盐桦的系统发育。方法:运用PCR直接测序法,对珍稀濒危植物盐桦(Betulahalophila)的nrDNA的ITS区(包括ITS-l,5.8SrDNA和ITS-2)进行序列测定,并与GenBank中提取的17种桦木科桦木属植物的ITS区序列进行了组合分析。结果:盐桦的ITS序列和已公布的17种桦木科桦木属植物的ITS区序列差别不大,同源性在99.67%~99.01%之间。采用clustalx软件对盐桦和17种桦木属植物的ITS区序列进行系统发育分析,构建了桦木属植物的ITS分子系统树,18种桦木科桦木属植物形成三个分支,盐桦与Betula alnoides、Betula populifolia、Betula pubescens同为一支。结论:盐桦在桦木科桦木属内有独特的分类地位。

    2008年06期 v.18;No.109 4-6页 [查看摘要][在线阅读][下载 128K]
  • 基于ITS序列对引起中毒事故蘑菇的分子鉴定

    李河;

    目的:对一起中毒事故的蘑菇进行分子鉴定。方法:测定菌株核糖体DNA的转录间隔区序列。结果:该序列与Gen-Bank中已有的序列进行比较,得到一系列同源性较高的序列。其中与接受号为EF411081的Amanita phalloides同源性最高,达到99%以上;利用所得序列构建分子系统发育树,发现所测定的序列以较高的置信度与Amanita phalloides聚为一支。结论:确定引起中毒事故的蘑菇为毒性较高的Amanita phalloide,即条纹毒鹅膏菌。

    2008年06期 v.18;No.109 6-8页 [查看摘要][在线阅读][下载 851K]
  • 现代罗布人mtDNA 9bp序列缺失频率与DYS287位点多态性研究

    塔吉古丽.阿布里克木;吐尔孙江.努尔麦麦提;阿迪力江.卡地尔;马合木提.哈力克;

    目的:研究现代罗布人线粒体DNA 9bp序列缺失频率与Y染色体DYS287位点多态性。方法:分别采用PCR扩增直接测序法和PCR结合琼脂糖凝胶电泳检测法对不同位点的多态性进行分析。结果:在48名无关现代罗布人群个体中,线粒体DNA9bp序列缺失频率为8.3%,在34名无关现代罗布人群男性个体中DYS287全部显示为YAP-。结论:获得现代罗布人线粒体DNA 9bp序列缺失频率与Y染色体DYS287位点多态性数据,为该群体遗传关系的分析、法医学鉴定及该群体的起源提供了一定的遗传背景资料。

    2008年06期 v.18;No.109 9-10页 [查看摘要][在线阅读][下载 65K]
  • HSV1-TK基因原核表达质粒的构建及其表达检测

    王丽群;张明江;孟祥晨;

    目的:构建含有HSV1-TK基因的原核表达质粒,并对其原核表达情况进行检测,为进一步将细菌载体应用于肿瘤基因治疗奠定基础。方法:以质粒pHSV-106为模板,利用PCR获得HSV1-TK基因克隆并将其与表达载体pBV220连接,重组质粒经鉴定后转化到大肠杆菌DH5α中,并检测其蛋白表达情况。结果:TK基因全长1 128bp,与理论值相符。经测序发现,克隆的DNA片段与TK基因(NCBI登录号:V00470)同源性为100%;但是电泳结果中不能看到目的蛋白条带;因此,进行多次重复及更换宿主等试验以排除试验误差和偏爱密码子的影响;通过更换载体pET-28a确定来源于单纯疱疹病毒的胸苷激酶能够实现原核表达,表达蛋白大小约为41 kD,与理论值相符。结论:试验结果表明HSV1-TK基因能够实现原核表达,筛选合适的TK基因原核表达载体是利用细菌载体携带自杀基因TK治疗肿瘤的基本前提。

    2008年06期 v.18;No.109 11-14页 [查看摘要][在线阅读][下载 322K]
  • 可分泌性GLP-1重组慢病毒的构建

    娄明武;张明东;梁冰;范义;王全颖;

    目的:为了探讨使用基因治疗在体内分泌表达胰高血糖素样肽-1(GLP-1)方法治疗糖尿病的可行性,构建可分泌表达GLP-1的重组慢病毒。方法:1.将已构建成功的NT4-GLP-1融合基因插入慢病毒包装质粒pLenti6V5D-TOPO中,构建pLenti6V5D-TOPO/NT4-GLP-1重组慢病毒包装质粒。2.用慢病毒包装辅助质粒plp1、plp2、plp/VSVG,及重组慢病毒包装质粒pLenti6V5D-TOPO/NT4-GLP-1,四质粒磷酸钙共沉淀法转染80%融合的293细胞系,包装慢病毒。3.通过免疫组化法染色确定重组慢病毒效应。结果:重组质粒经BamHⅠ和XhoⅠ联合酶切,10g/L琼脂糖凝胶电泳可见在342bp处有一目的片段。该值与NT4-GLP-1融合基因片段的大小一致,说明NT4-GLP-1融合基因已经成功重组于慢病毒包装质粒pLenti6V5D-TOPO内。免疫组化结果显示,实验组细胞内出现大量棕黄色颗粒,阳性细胞达到70%以上,对照组中没有阳性细胞,所以说明NT4-GLP-1重组慢病毒在细胞中可以正确地分泌表达GLP-1。结论:NT4-GLP-1重组慢病毒包装质粒构建正确,病毒包装成功。

    2008年06期 v.18;No.109 15-18页 [查看摘要][在线阅读][下载 387K]
  • 黑曲霉Z6植酸酶基因phyA的克隆及表达

    吴远征;扈进冬;李纪顺;杨合同;

    目的:克隆植酸酶基因phyA,构建毕赤酵母表达载体,转化毕赤酵母,并对重组工程菌的表达产物进行初步酶学性质研究。方法:以植酸酶高产菌株─黑曲霉Z6染色体DNA为模板,PCR扩增得到植酸酶基因phyA,序列鉴定后连接到毕赤酵母穿梭载体pPIC9K上,构建重组质粒pPIC9K-phyA,电击转化毕赤酵母KM71,筛选得到重组转化子。对重组工程菌表达产物进行SDS-PAGE分析和酶活性研究。结果:phyA序列分析表明该基因具有典型的植酸酶活性位点保守序列ArgHisGlyAlaArgTyrPro,与NC-BI已发表的植酸酶基因同源性较高,达到94%以上。该序列已提交GenBank,序列号为DQ318022。重组工程菌KM71-phyA7的PCR扩增证实了植酸酶基因已整合到酵母基因组中,植酸酶能有效分泌和表达,粗酶液酶活可达875U/mL。结论:植酸酶基因phyA在毕赤酵母中成功表达,为今后的定向改组奠定了基础。

    2008年06期 v.18;No.109 18-20页 [查看摘要][在线阅读][下载 152K]
  • 截短的HCV NS3蛋白的表达、纯化及应用

    郭泰林;叶林柏;茆灿泉;

    目的:为了发展新一代HCV检测试剂盒,使包被的NS3蛋白能提高其检测的精确度与准确度。方法:通过生物信息学方法选定目标蛋白为HCV1263a.a~1583a.a,应用PCR方法克隆出编码此部分NS3蛋白的DNA序列,连接到表达载体pQE30构建重组子pQNS3,转化工程菌株JM109后诱导表达,表达产物通过Western-blot实验证实,用Ni-NTA-Superflow亲和层析柱纯化,采用ELISA方法检测纯化的蛋白在免疫检测中的应用。结果:工程菌株在IPTG诱导下表达出N端含6个组氨酸的NS3融合蛋白,分子量约为36kDa,利用纯化的目标蛋白对40份HCV抗体阳性参考品,蛋白检测的符合率为77.5%(31/40);对40份阴性参考品,检测符合率为97.5%(39/40)。结论:表达的NS3融合蛋白,具有很好的应用价值,可以应用于新一代HCV检测试剂盒以及对NS3蛋白功能的研究。

    2008年06期 v.18;No.109 20-23页 [查看摘要][在线阅读][下载 509K]
  • 人参总皂苷对K562细胞STAT3表达的影响

    李春莉;柯大智;王建伟;王亚平;滕永真;

    目的:研究人参总皂苷(TSPG)体外作用k562细胞后STAT3蛋白在细胞中的表达、分布情况和STAT3通路在K562细胞分化中的作用和相关机制。方法:TSPG(200μg/ml)体外作用K562细胞不同时间,采用免疫细胞化学法、ELISA法、Western blotting法、激光共聚焦法检测K562细胞中STAT3表达、分布情况。结果:6h胞浆内STAT3蛋白吸光度0.306±0.038,12h降为0.170±0.037,之后逐渐回升,胞核内变化趋势则相反;免疫细胞化学法显示TSPG作用细胞12h,胞浆内呈浅棕色,胞核内呈深棕色;Western blotting法检测到STAT3与β-actin吸光度比值胞浆内12h最低,胞核内最高;共聚焦观察TSPG作用细胞12h,胞浆内绿色荧光标记减少,核内绿色荧光标记增多,与红色细胞核颜色叠加呈现橙色。结论:TSPG作用K562过程中,能诱导STAT3由浆向核内转移,提示TSPG可能在JAK-STAT信号转导通路中,对促进K562细胞向成熟方向分化发挥重要作用。

    2008年06期 v.18;No.109 23-26页 [查看摘要][在线阅读][下载 310K]
  • 抗人DR5多克隆抗体的制备与纯化

    邢万金;包晓红;李舜尧;杨倩;畅飞;

    目的:分离纯化融合蛋白GST-eDR5,免疫小鼠制备抗人DR5多克隆抗体。方法:用GST纯化试剂盒和电泳两次纯化的融合蛋白GST-eDR5免疫小鼠,制备抗GST-eDR5抗血清,然后用GST纯化得到抗人DR5抗血清。通过Western blot、ELISA方法鉴定抗血清特异性和效价。结果:通过亲和纯化得到了高纯度的融合蛋白GST-eDR5,其浓度为0.65μg/μl。免疫产生的DR5抗血清特异性高,且效价高达1∶25600,纯化后的抗人DR5抗血清不再识别GST,只识别人DR5。结论:成功制备了高特异性、高效价的抗人DR5多克隆抗体,为深入研究其对肿瘤细胞的生长抑制和凋亡作用提供了实验工具。

    2008年06期 v.18;No.109 27-29页 [查看摘要][在线阅读][下载 129K]
  • 丹参酮Ⅱ-A对细胞因子IL-6和IL-10的影响

    郭伟强;曹婷婷;徐雯婧;陈曦;何光源;

    目的:RAW 264.7细胞中,炎症发生时相关的细胞炎症因子白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)起重要作用。丹参酮Ⅱ-A是传统中药丹参的一种重要的药理成分,它具有一定的抑制炎症的作用。但是,从传统中药丹参提取液中的丹参酮对炎症过程的影响研究较少。该文着重介绍了丹参酮Ⅱ-A在转录水平上对IL-6和IL-10的调节作用。方法:以RAW264.7细胞系作为药物刺激靶细胞,使用不同浓度的丹参酮Ⅱ-A对其进行刺激,分别刺激24h、48h后,半定量RT-PCR检测IL-6和IL-10 mRNA表达量的变化。结果:丹参酮Ⅱ-A可以诱导IL-10的释放,同时也减少IL-6的生成,说明它对炎症因子有一定的调控作用。结论:在炎症发生后,丹参酮Ⅱ-A可有效的调节炎症因子的mRNA表达量,进而减少或消除炎症。

    2008年06期 v.18;No.109 30-32页 [查看摘要][在线阅读][下载 159K]
  • 超声波对蔷薇藻生长及生理特性的影响

    吴义诚;张艳燕;陈必链;

    目的:用超声波处理蔷薇藻(Rhodella reticulata),研究超声波电流、处理时间和脉冲时间对蔷薇藻生长代谢的影响。方法:通过均匀设计实验结合DPS软件对均匀设计实验结果进行二次多项式模型分析和拟合,以生物量、胞外多糖和藻蓝蛋白为目标建立回归模型,优化超声波处理条件。结果:以生物量为目标:电流39%,超声时间123.27s,脉冲时间0.55s,干重的预测值为2.42g/L;以胞外多糖为目标:电流21%,超声时间245s,脉冲时间9.5s,胞外多糖的预测值为656.22mg/L;以藻蓝蛋白为目标:电流21%,超声时间5.0s,脉冲时间0.5s,藻蓝蛋白的预测值为63.53mg/L;优化后生物量、胞外多糖和藻蓝蛋白的产量比未经优化的分别提高了13.3%、11.4%和31.1%。结论:一定强度的超声波促进了蔷薇藻的生长和胞外多糖及藻蓝蛋白的积累。

    2008年06期 v.18;No.109 32-35页 [查看摘要][在线阅读][下载 79K]
  • 刚毛柽柳(Tamarix hispida)种子萌发特性的研究

    姬慧娟;尹林克;严成;

    目的:研究温变周期、盐分和储藏时间对刚毛柽柳种子萌发的影响。方法:利用不同温变周期,不同浓度NaCl溶液,储藏时间等处理对刚毛柽柳种子进行萌发试验,测定其萌发率和萌发速度。结果:在5/15℃、5/25℃1、5/25℃和25/35℃(暗/光=12h/12h)四个温变周期下,刚毛柽柳种子的萌发率均大于90%;在5/25℃、15/25℃和25/35℃三个温变周期下,刚毛柽柳种子萌发迅速,初始萌发时间均仅为10h;低浓度的NaCl溶液(≤0.60mol/L)促进种子萌发,高于1.00mol/L浓度的NaCl溶液抑制种子萌发,当浓度增高至1.40mol/L时,种子萌发率降低为0;将在NaCl溶液中处理8d未萌发的种子转移至蒸馏水中后,原来较高浓度(≥0.80mol/L)处理的种子具有较高的萌发恢复率(>70%);种子寿命约11个月。结论:温变周期25/35℃(暗/光=12/12h),低浓度的NaCl溶液(≤0.60mol/L)最适宜刚毛柽柳种子的萌发。

    2008年06期 v.18;No.109 35-38页 [查看摘要][在线阅读][下载 185K]

技术与方法

  • 灰绿藜RNA提取方法及在cDNA文库构建中的应用

    姚世响;谷丽丽;张霞;李秀明;油天钰;兰海燕;张富春;

    目的:为分离灰绿藜耐盐相关新基因,构建叶片cDNA文库,探索从盐生植物中提取高质量RNA的方法。方法:以灰绿藜叶片为材料,应用RNAPlant Reagent法(Tiangen)、Plant RNA purification Reagent法(Invitrogen)、UNIQ柱式总RNA试剂盒提取法(Sangon)、SDS-LiCl法、TRIZOL试剂法(Invitrogen)等进行总RNA的提取,并构建其全长cDNA文库和抑制消减文库。结果:RNA Plant Reagent法、Plant RNA purification Reagent法和UNIQ柱式总RNA试剂盒提取法获得的RNA完整性均不好;SDS-LiCl法提取的RNA完整性好(28S条带亮度是18S的2倍、条带锐利清晰)、纯度高(A280/A260为1.89±0.03,A260/A230为2.23±0.02),适合用于直接反转录及构建全长cDNA文库,并获得成功;TRIZOL试剂法简单快捷,产率高(2724±82μg/g),完整性较好,可经mRNA纯化后用于抑制消减文库的构建并获得成功。结论:建立了用于构建高质量cDNA文库的灰绿藜RNA的制备方法。

    2008年06期 v.18;No.109 38-41页 [查看摘要][在线阅读][下载 226K]
  • 光皮桦AFLP分子标记体系的建立

    尤卫艳;黄华宏;童再康;朱玉球;

    为了建立光皮桦AFLP分子标记体系,利用SDS法、常规CTAB法和CTAB-硅珠法提取光皮桦(Betula luminiferaH.Wink.)嫩叶DNA,并进行检测比较。结果显示,CTAB-硅珠法更适合光皮桦基因组DNA的提取,所得在基因组DNA纯度高OD值在1.8左右,适用于AFLP分析。利用AFLP分子标记技术,采用MseⅠ-EcoRⅠ酶切组合,从64个引物组合中筛选出51个带型分布均匀、多态性高且分辨能力强的引物组合。同时,通过对比实验确定了光皮桦AFLP反应的最佳模板DNA用量为300ng、酶切时间4h和预扩增产物稀释倍数30倍等,优化了相关AFLP反应体系,为今后利用AFLP分子标记技术研究光皮桦野生居群的遗传多样性分析和分子遗传图谱的构建打下坚实的基础。

    2008年06期 v.18;No.109 42-45页 [查看摘要][在线阅读][下载 331K]
  • 建立快速、特异检测ApoE4基因型方法

    张介平;郑莉;谷辉杰;毕婉容;李学礼;徐磊;吕立夏;

    目的:建立快速、特异检测载脂蛋白E(ApoE)基因型的方法。方法:采用碱裂解法抽提漱口水来源的颊粘膜上皮细胞的基因组DNA;优化各种改善高GC含量的的添加剂种类和浓度,包括二甲亚枫、甘油、甲酰胺、甜菜硷等,PCR产物进行HhaI酶切并DNA垂直电泳从而分析个体的ApoE基因型。结果:漱口水来源的基因组DNA能替代外周血DNA进行PCR扩增。甜菜碱、甲酰胺、甘油等对于ApoE4基因的扩增效果并不明显,而5%DMSO能显著提高ApoE4基因的扩增效率,并显著提高PCR扩增的特异性。结论:无创的简单的ApoE4基因分型被建立,极大易化了对ApoE4相关疾病的分子流行病的研究,对于其它基因的基因型研究提供有益的线索。

    2008年06期 v.18;No.109 45-46页 [查看摘要][在线阅读][下载 122K]
  • 脂质体介导法转染肿瘤细胞效率的优化

    潘宁;章蔼然;侯颖春;

    目的:研究优化影响脂质体转染效率的因素,以提高脂质体转染效率,为相关研究和应用提供参考。方法:以绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因,采用脂质体Lipofectamine 2000包裹pU6H1-GFP-FAK重组质粒转染Caco-2细胞,研究了细胞接种密度、DNA用量、脂质体与DNA的比例、脂质体-DNA复合物的形成时间、细胞与脂质体复合物的孵育时间、血清的有无及细胞的传代次数等因素对脂质体转染效率的影响。结果:2~5次细胞传代,2×105接种密度、4μg DNA用量、2.5∶1的脂质体与DNA比例3、0min脂质体-DNA复合物形成时间以及6h细胞与复合物孵育时间,转染效率最高。血清在本实验室条件下并不影响转染效率。结论:实验获得的优化条件可以明显提高脂质体对肿瘤细胞的转染效率,可作为有关研究或应用的参考。

    2008年06期 v.18;No.109 47-50页 [查看摘要][在线阅读][下载 643K]
  • 亚硝化细菌的分离及初步鉴定

    廖雪义;蓝荣;

    目的:为了使短程硝化—反硝化生物脱氮工艺能更有效地应用于含氮污废水的处理,需分离出高效的亚硝化细菌。方法:采用亚硝化细菌富集培养基选择培养和硅胶平板分离法,通过初筛、复筛,从广西大学农场菜园土中分离到一株亚硝化速率较高的菌株N4。结果:菌株N4革兰氏染色阴性,不产芽孢,细胞短杆状,呈单个排列,有一根亚极端鞭毛。结论:初步鉴定菌株N4为亚硝化单胞菌属(Nitrosomonas sp)。

    2008年06期 v.18;No.109 50-52页 [查看摘要][在线阅读][下载 106K]
  • 用微核试验研究小枣的抗突变作用

    多力坤.买买提玉素甫;地里白尔.吐尔逊;阿那尔古丽.木尔扎汗;

    目的:应用微核试验(Micronucleus test,MCNT)技术研究小枣汁对环磷酰胺(CP)的抗突变作用的影响。方法:使用蚕豆根尖细胞微核技术进行微核率检测。结果:结果表明,不同浓度的小枣汁对环磷酰胺诱发的蚕豆根尖细胞微核有明显的抑制作用,1号-阳性和阴性对照试验组的微核率分别为52‰、30‰、26‰1、6‰、10‰、9‰7、0‰、7‰,小枣汁使CP诱发的微核率从52.0±5.3‰降低至9.7±2.5(P<0.001)。结论:说明小枣汁对CP诱发的遗传损伤具有明显的修复、保护以及抗突变作用。

    2008年06期 v.18;No.109 53-54页 [查看摘要][在线阅读][下载 33K]
  • 短柄南蛇藤叶普通粉挥发性成分的研究

    丁丽娜;杨嘉;刘建华;安立群;刘文炜;

    目的:研究短柄南蛇藤叶普通粉中的挥发性成分。方法:利用有机溶剂-水蒸汽蒸馏提取短柄南蛇藤挥发油,用GC-MS进行测定,结合计算机检索技术对分离化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果:分离鉴定出50种化学成分,占挥发油总量的92.24%,其中含量大于2%的分别为油酸31.59%、13-十八碳烯29.74%、棕榈酸4.41%、反-2-己烯醛3.36%、异丁基邻苯二甲酸酯3.26%、香叶基丙酮2.30%。结论:该文首次采用气相色谱-质谱联用法对短柄南蛇藤叶普通粉中的挥发性成分进行研究。

    2008年06期 v.18;No.109 54-56页 [查看摘要][在线阅读][下载 114K]

开发与应用

  • 复合诱变选育高产GSH的菌株

    甘广东;刘清斌;吴建国;张学峰;

    目的:选育出GSH的高产菌株。方法:以产GSH的产朊假丝酵母(Candida utilis)为出发菌株,利用紫外-超声波复合诱变。结果:筛选得到ZnCl2抗性突变株UU3,GSH菌体含量为53.50mg.g-1,比出发菌株提高137.03%。结论:突变株UU3遗传性能稳定,可做进一步研究。

    2008年06期 v.18;No.109 57-58页 [查看摘要][在线阅读][下载 101K]
  • 泽普油田生物表面活性剂产生菌的筛选

    易霞;

    目的:对泽普油田的9个原油样品进行生物表面活性剂产生菌株的筛选。方法:富集培养、血平板分离、摇瓶培养和排油圈测定。结果:7个样品都可溶血和排油圈,即有表面活性剂产生。结论:泽普油田有生物表面活性剂产生菌株,而且该产品具有重要的开发价值。

    2008年06期 v.18;No.109 59-61页 [查看摘要][在线阅读][下载 46K]
  • 沼肥对土壤理化性质的影响

    沙长青;谷军;张晓彦;

    目的:研究沼肥对土壤理化性质影响,为沼气的综合利用提供理论依据和技术支持。方法:通过对比栽培试验方法,研究了施用沼肥对菜园土壤密度、pH值及养分含量的影响。结果:施用沼肥使土壤密度下降9.7%、铵态氮增加60.5%、速效磷增加85%、速效钾增加225%、有机质增加30%。田间试验结果,施用沼肥组作物增产15.6%,并且产品品质也有提高,VC含量提高18.6%、硝酸盐含量降低30.3%。结论:沼肥能够有效改善土壤的营养结构,明显提高土壤的有机质含量。

    2008年06期 v.18;No.109 61-63页 [查看摘要][在线阅读][下载 52K]
  • 菊苣基生叶中总黄酮提取工艺的研究

    阿布力米提;阿布力克木.阿布力孜;艾来提;阿不都热衣木;迪丽努尔;

    采用分光光度法,以亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠为试剂,芦丁为对照品,乙醇回流提取菊苣基生叶中总黄酮。在提取过程中,通过单因素实验分析了乙醇浓度、回流温度、回流时间及料液比等4个主要因素对提取率的影响。在单因素的基础上,通过正交实验,得到最佳提取工艺为:乙醇浓度为70%,料液比1∶40,回流温度80℃,回流时间为2h。实验结果可靠,方法简便,最佳条件适合批量生产中该药材的提取。

    2008年06期 v.18;No.109 63-65页 [查看摘要][在线阅读][下载 195K]
  • 响应面法优化超声提取苜蓿皂苷工艺条件

    张亮;李友广;

    目的:利用响应面法对超声提取苜蓿皂苷的工艺条件进行了优化。方法:研究了超声波条件下影响提取的几个因素,包括超声时间、超声温度、超声功率、固液比等,并通过响应面法优化工艺条件。结论:根据中心组合设计原理采用四因子三水平的响应面分析法,通过对各因子显著性和交互作用的分析,得出了超声提取苜蓿皂苷的最佳工艺条件为:超声时间22min,超声温度43℃,超声功率403W,固液比1∶51(g/ml),此时苜蓿皂苷的得率为4.53%。

    2008年06期 v.18;No.109 65-68页 [查看摘要][在线阅读][下载 542K]
  • 节杆菌M3黄嘌呤氧化酶的诱导效应研究

    王静;孙艳;杨海麟;王武;

    目的:寻找高效廉价的诱导物,并研究其诱导条件,以期进一步提高节杆菌M3(ArthrobacterM3)产黄嘌呤氧化酶(xan-thine oxidase,简写为XOD)水平。方法:以产酶水平和生产成本为标准,比较了几种化合物对ArthrobacterM3的诱导产酶的效果,选出最适诱导物,并对其诱导条件进行了研究。结果:几种化合物中,次黄嘌呤的诱导效果最佳。对次黄嘌呤诱导效应的研究发现,在发酵前期加入3g/L的次黄嘌呤对产黄嘌呤氧化酶的诱导效果最好。节杆菌M3降解次黄嘌呤的代谢产物中,尿素的存在对XOD的合成有强的抑制作用,而添加甘氨酸能促进XOD的产生。结论:在最佳条件下,次黄嘌呤诱导节杆菌M3产酶水平728.33U/L,超过了国内所报道的最高水平。

    2008年06期 v.18;No.109 69-71页 [查看摘要][在线阅读][下载 329K]
  • 碱性果胶酶高产菌株产酶条件的优化

    刘曦;路福平;黎明;肖静;孙静;王立国;

    目的:对碱性果胶酶高产菌株的产酶条件进行优化。方法:通过筛选得到一株产碱性果胶酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)TCCC11286,利用单因素实验对其发酵条件进行优化。采用Plackett-Burman(P-B)方法筛选出对产酶有重要影响的3个因素(豆饼粉、MgSO4以及FeSO4的添加量),并采用响应面试验设计(RSM)对重要因素进行优化。结果:最适的产酶条件为:玉米粉4%,豆饼粉3.55%,MgSO40.034%,(NH4)2SO40.4%,磷酸盐0.05mol/L,FeSO40.013%。结论:优化后其产酶能力得到了明显的提高,酶活提高到14.82U/ml。

    2008年06期 v.18;No.109 71-74页 [查看摘要][在线阅读][下载 471K]
  • 一株饵料微藻与益生菌混合固定化培养条件的优化

    张国海;庄惠如;赵圣炜;翁金兰;

    目的:一株饵料微藻与益生菌混合固定化培养条件的优化。方法:在单因素实验基础上,采用U6*(64)均匀设计表,对海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、藻的接种量和菌的接种量进行优化实验,并采用DPS软件对实验结果进行分析,以获得适宜的混合固定化条件;并按照此优化条件对混合固定化和单藻、单菌固定化胶球中微藻和益生菌的生长速率进行比较。结果:①获得适宜的混合固定化条件为:海藻酸钠浓度4%,氯化钙浓度1.2%,藻接种量为21.9889×107个细胞,菌接种量为58.7676×109个细胞;②混合固定化胶球中藻细胞的生长速率比单藻固定化胶球中的藻的生长速率提高了18.8%;菌的平均生长速率比单菌固定化胶球中的菌的平均生长速率提高了92.6%。结论:该实验首次对饵料微藻和海洋益生菌的混合固定化培养条件进行优化。发现藻菌混合固定化胶球中藻和菌的生长速率比单独固定化均有较明显提高。实验结果说明,在混合固定化的微环境体系中,特定的藻菌株具有相互促进生长的作用。实验结果为藻菌混合固定化技术的应用和发展提供了必要的实验数据和理论基础。

    2008年06期 v.18;No.109 74-78页 [查看摘要][在线阅读][下载 711K]
  • 中华稻蝗内生菌SDLH抑菌物质发酵条件优化

    李敏;张少飞;邢志国;宋强;黄登宇;

    目的:作者实验室前期分离到的一株中华稻蝗内生菌SDLH,可产生对金黄色葡萄球菌具强烈抑制作用的活性物质,本文对该菌株产生抑菌活性物质的发酵条件进行探索,以期得到最优化发酵条件,提高抑菌活性物质的产量。方法:采用正交实验及回归分析方法寻求最佳发酵培养基组成成分和优化pH、温度、接种量、种龄、装液量、转速等发酵条件。结果:最佳发酵培养基组成为:α-乳糖2.00g,胰蛋白胨12.00g,酵母膏5.00g,NaCl 3.50g,K2HPO43.68g,KH2PO41.32g,dH2O 1000mL,pH 7.0。培养条件为pH 6.8,温度30℃,接种量10%,种龄24h,250mL三角瓶装液量100mL,摇床转速150r/min。结论:得到了该菌株产生抑菌物质的最优发酵条件,为下一步规模发酵提供了基础数据。

    2008年06期 v.18;No.109 78-81页 [查看摘要][在线阅读][下载 293K]
  • 黑曲霉X-1产木聚糖酶液体发酵工艺研究

    黄林;钟敏;涂晓勇;肖四生;涂国全;

    目的:提高黑曲霉X-1菌株液体发酵木聚糖酶的产量。方法:采用单因素和正交试验对黑曲霉X-1菌株产木聚糖酶液体发酵培养基和培养条件进行了优化。结果:通过正交试验找出最大影响因素为玉米芯和葡萄糖的供应,优化后的最佳培养基和培养条件为:玉米芯粉3%,葡萄糖0.5%,蛋白胨1%,KH2PO40.5%,MgSO4.7H2O 0.1%,Tween-80 0.1‰,pH 6.5,30℃、200r/min摇瓶培养120h。结论:黑曲霉X-1菌株在优化后的培养基和培养条件下,木聚糖酶活力高达1630.78U,比优化前木聚糖酶活力(724.63U)提高了125.05%。

    2008年06期 v.18;No.109 81-84页 [查看摘要][在线阅读][下载 562K]
  • 葡萄糖补加对VC二步发酵产古龙酸的影响

    杨伟超;康艳红;赵军;荆士华;柳景政;徐慧;

    研究了葡萄糖的补加对维生素C二步发酵产酸的影响。摇瓶发酵实验结果表明,15%的接种量,接种至底物山梨糖浓度为8%的发酵培养基,发酵24h时,补加0.08%的葡萄糖,可提高发酵转化率5.2%。

    2008年06期 v.18;No.109 85-86页 [查看摘要][在线阅读][下载 35K]

专题综述

  • 低能离子注入介导外源DNA大分子转化的研究及应用

    黄国伟;毛培宏;金湘;吕杰;凌海秋;武宝山;

    低能离子注入介导外源DNA大分子转化作为一种新的遗传育种方法,被广泛应用于植物和微生物的品质改良及种质创新,并取得显著成果。该文简述了低能离子注入介导外源DNA大分子转化的理论研究进展,总结了该方法在植物和微生物方面的研究及应用概况,并就其发展前景作了展望。

    2008年06期 v.18;No.109 86-89页 [查看摘要][在线阅读][下载 62K]
  • 马鹿线粒体DNA研究新进展

    单文娟;董晓宇;马合木提.哈力克;

    线粒体DNA作为理想的分子遗传标记被广泛应用于马鹿进化生物学、种群遗传学和保护生物学的研究。该文阐述了mtDNA在马鹿中的研究进展,重点介绍马鹿mtDNA序列的研究概况及其多态性在马鹿物种识别、起源和进化、地理分化、遗传多样性和保护管理等方面的应用情况。

    2008年06期 v.18;No.109 89-91页 [查看摘要][在线阅读][下载 54K]
  • 水稻抗病基因定位进展与云南地方稻种资源研究

    白现广;程在全;蔺忠龙;吕广磊;许乔明;黄兴奇;

    综述了水稻抗稻瘟病基因、抗白叶枯病基因、抗纹枯病基因、抗黄矮病基因和抗稻曲病基因的定位研究进展,标出了部分连锁分子标记与目的基因间的距离,初步探讨了水稻抗病基因在染色体上的分布规律,为选育水稻抗病品种提供相关分子标记数据。最后就云南地方抗病稻种资源研究中存在的问题进行了讨论,并对抗病基因相关分子标记在云南稻种资源研究的应用前景进行了展望。

    2008年06期 v.18;No.109 92-95页 [查看摘要][在线阅读][下载 65K]
  • 蓝藻资源无害化利用技术的研究

    杨海麟;李克朗;张玲;刘洋;丁明波;王武;

    近年来太湖蓝藻爆发频繁,大量蓝藻被打捞上来,蓝藻作为一种富含多种有益物质的生物质资源,其利用值得深入研究。该文简要概述了近年来国内外对蓝藻资源的综合利用情况,并简单介绍了作者实验室利用生物技术将蓝藻原料发酵转化酿酒酵母的研究情况,进一步探讨了蓝藻资源的其它利用途径。

    2008年06期 v.18;No.109 95-98页 [查看摘要][在线阅读][下载 242K]
  • 下载本期数据