生物技术


  • OLAND生物脱氮系统中硝化菌群16S rDNA的DGGE分析

    张丹,刘耀平,徐慧,张颖,陈冠雄

    为了考察生物脱氮系统中硝化菌群 (氨氧化菌和亚硝酸氧化菌 )的种群多样性及硝化菌群随溶解氧降低的种群变化规律 ,并建立一套行之有效的用于自养生物脱氮系统中功能微生物菌群的快速分子检测技术 ,采用DGGE (变性梯度凝胶电泳 )分子检测技术对硝化菌群的 16SrDNA的特异性PCR扩增产物进行了分析 ,结果表明 :OLAND生物脱氮系统中氨氧化菌和亚硝酸氧化菌随溶解氧的降低表现出了不同的种群变化规律 ,氨氧化菌种群多样性受溶解氧的影响非常大 ,而亚硝酸氧化菌的种群多样性比较单一 ,且不受溶解氧的影响。结合FISH (全细胞荧光原位杂交 )分析结果表明 ,在OLAND限氧稳定运行后期 ,亚硝化单胞菌属 (Nitrosomonas)是主要的氨氧化菌 ,占OLAND限氧亚硝化阶段反应器中总细菌数的 72 .5 %左右

    2003年05期 1-3页 [查看摘要][在线阅读][下载 77k]
  • 小麦HMW-G12亚基基因启动子克隆及序列分析

    张薇,胡尚连,李文雄

    为了研究高分子量谷蛋白基因启动子在种子中的特异性表达 ,以小麦品种“东农 774 2”的基因组DNA为模板 ,根据已发表序列设计并合成引物 ,用PCR的方法克隆了小麦贮藏蛋白中高分子量谷蛋白 12亚基基因的上游调控序列。序列测定结果表明 :所克隆的启动子片段大小为 4 2 4bp与Thomspon报道的序列比较 ,同源性为 97.9% ,有 9个核苷酸发生了改变。推测的TATAbox位于 - 2 7— - 30bp ,Prolamin -box位于 - 175— - 181bp ,认为该元件可能与转录速率的调控有关。

    2003年05期 3-5页 [查看摘要][在线阅读][下载 78k]
  • 金黄色葡萄球菌肠毒素A Asp227Ala基因的克隆及表达

    杨立泉,吴文芳,时成波,吕安国,冯家勋,柏学亮

    目的 :金黄色葡萄球菌肠毒素AAsp2 2 7ala基因的克隆及表达。方法 :利用错配PCR方法 ,从含有金黄色葡萄球菌肠毒素A(StaphylococcalenterotoxinA ,SEA)基因的质粒中扩增出约 72 0bp的DNA片段 ,将其克隆到表达载体 7ZTS中 ,并转化于JM10 9(DE3)。结果 :重组质粒的测序结果表明 ,它含有 70 2bp(不包括N端 72bp的信号肽编码区 ) ,其核苷酸序列与文献报道完全一致 ,推导的氨基酸序列显示 2 2 7位的天冬氨酸已突变为丙氨酸。结论 :该基因所表达的蛋白为可溶性蛋白 ,表达量占总蛋白 5 1.5 %。表达的蛋白与天然肠毒素A产生的抗体能发生凝集作用 ,具有与天然SEA类同的抗原活性。

    2003年05期 5-6页 [查看摘要][在线阅读][下载 55k]
  • 胚龄和激素对小麦幼胚组织培养的影响

    赵占军,陈茂盛,王贵娟

    以扬麦 15 8为试验材料 ,通过田间取样室内培养的方法研究了胚龄和激素对小麦幼胚组织培养的作用。结果表明 ,幼胚组织培养最适宜的胚龄为 14~ 16d;适宜的 2 ,4 -D浓度为 1.5~ 2 .5mg L ;适宜的IAA浓度为 2 .0~ 3.0mg L ;适宜的 6 -BA浓度为 0 .1~ 0 .8mg L ;适宜的KT浓度为 0 .5~ 1.5mg L。因此 ,胚龄和激素对于小麦幼胚组织培养具有明显的调节作用 ,在组织培养实践中 ,充分认识和综合协调这些因素对小麦幼胚组织培养的作用 ,可以提高组织培养效率 ,使其更加有利于生物学研究、遗传转化和快速育种等工作。

    2003年05期 7-8页 [查看摘要][在线阅读][下载 43k]
  • 极端环境脂肪酶菌种库建立及其酶学性质研究

    蒋咏梅,章文贤,周晓兰,施巧琴

    为得到特殊性质的脂肪酶酶种 ,从来源于极端环境的 2 7份样品中定向筛选脂肪酶产生菌 ,并构建了一个小型的菌种库。其中酵母L112在 2 0℃ ,pH5 .0时酶活为 18.6u ml,属低温酸性酶种。酶学性质研究表明 ,该酶最适作用温度为 2 5~ 30℃ ,最适pH为 5 .4。在pH4 .8,5 0℃条件下 4 0min保持 6 0 %以上酶活。Mg2 + 和Ca2 + 对酶有激活作用 ,Zn2 + 、Fe2 + 、Cu2 + 和EDTA有抑制作用。该产酶菌株经中国科学院微生物研究所鉴定为罗伦隐球酵母 (Cryptococcuslaurentii(Kufferath)C .E .Skinner)。

    2003年05期 9-10页 [查看摘要][在线阅读][下载 39k]
  • 谷胱甘肽硫转移酶(GST)的固定化及酶学特性研究

    蔡俊,邱雁临

    对谷胱甘肽硫转移酶的固定化、游离酶和固定化酶的酶学特性进行了研究 ,通过试验 ,确定谷胱甘肽硫转移酶的最佳固定化条件为先用 2 %壳聚糖吸附酶 ,然后再加戊二醛交联 ,交联用戊二醛浓度为 1.2 % ,交联时间为 16h ;游离酶的最适温度为 4 5~ 5 5℃ ,最适pH值为 6 .5~ 7.0 ;固定化酶的最适温度为 4 5~ 5 0℃ ,最适pH值为 7.0 ;游离酶和固定化酶的最适酶促反应时间为 30min。

    2003年05期 11-12页 [查看摘要][在线阅读][下载 50k]
  • 青霉菌m8产半纤维素酶条件及酶性质研究

    朱启忠,赵宏,韩晓弟,张建民

    半纤维素酶可用于造纸工业的生物制浆和废水处理。通过碳、氮源对产胞外半纤维素酶的影响确定了青霉菌m8的适宜培养基 ,即 4 .5 %麦草粉 ,0 .5 0 % (NH4 ) 2 SO4 ,0 .1%KH2 PO4 ,0 .0 5 %MgSO4 ·7H2 O ,0 .0 3%NaCl,0 .33%Tween80 ,0 .15 %CaCO3。在上述培养基中 ,2 8℃恒温振荡 (12 0r min)培养 4 - 6d ,半纤维素酶活力可达 80u ml左右。用DNS法研究了该酶的性质。结果表明 ,其最适pH值为 4 .5 ,最适反应温度为 5 5℃ ;表观Km值为 4 .6× 10 - 2 g L ;该酶的耐热性比较强 ,可被K+ 、Ca2 + 、Mg2 + 离子激活 ,而被Ag+ 、Fe3+ 和Cu2 + 离子抑制。

    2003年05期 12-13页 [查看摘要][在线阅读][下载 53k]
  • 微波诱变选育井冈霉素高产菌

    陈力力,鲁迎新

    采用微波诱变方法对井冈霉素生产菌株 (Streptomyceshygroscopicusvar.JinggangensisYen)进行诱变处理 ,挑取单个菌落摇瓶初筛 ,复筛 ,测定化学效价 ,获得 4株平均效价比出发菌株分别高出 17.5 %、15 %、2 0 %、2 1.7%的突变株。沙土管保存 10个月后 ,取沙土管孢子接种斜面连续传代 4次 ,测定化学效价 ,代间效价差异不明显 ,遗传性能稳定。

    2003年05期 14-15页 [查看摘要][在线阅读][下载 38k]
  • Vc二步发酵一株新产酸菌的分子生物学特性

    刘耀平,张丹,徐明凯,周亚凤,张成刚

    对最近分离到的一株能合成维生素C前体 - 2 -酮基 -L -古龙酸 (2 -KGA)的新产酸菌V6生物学和分子生物学特性进行了初步研究。该菌株为革兰氏阴性菌 ,细胞为短杆状 ,菌体大小为 0 .8- 1.0× 0 .4 - 0 .6 μm ,菌落为淡黄色 ,好氧 ,最适生长温度为 2 8~ 30℃ ,最适pH为 7.0~ 7.8,GCmol%含量为 5 3.1% ,不含质粒 ,能氧化葡萄糖、山梨醇和山梨糖合成 2 -KGA。 16SrDNA同源性分析发现 ,该产酸菌与以前报道的能合成 2 -KGA的三个属Ketogulonigenium属、Gluconobacter属和Acetobacter属的同源性分别是 98.9~ 99.3%、82~ 83%和 81~ 82 %。基于以上特性分析 ,该产酸菌在分类发育学上宜归为Ketogulonigenium属。

    2003年05期 15-17页 [查看摘要][在线阅读][下载 77k]
  • 人类基因组STR等位基因阶梯的研制

    胡娜,熊勇华,范晶,杨辉

    研究建立一种制备STR等位基因阶梯标准的新方法。以单一来源的DNA链为模板 ,采用槽式PCR扩增法 ,并经过PAGE胶回收纯化制备等位基因阶梯标准。结果 :该方法适合等位基因阶梯标准的制备 ,所制备的等位基因阶梯基本无杂带 ,效果较理想。

    2003年05期 17-18页 [查看摘要][在线阅读][下载 50k]
  • 适于核桃基因标记的DNA提取方法

    张虎平,牛建新,王国安,虎海防,马兵钢

    为了对核桃 (JuglansregiaL .)特异性状的相关基因进行分子标记研究 ,采用CTAB法和改进的CTAB法 ,从叶片中提取核桃基因组DNA ,比较其分离效果。结果表明 ,常规的CTAB法不能有效去除多糖 ,而改进CTAB法不论老叶新叶都能有效去除细胞内多糖和多酚等杂质对模板DNA的污染 ,获得的DNA纯度高 ,可进一步用于核桃分子生物学的操作。

    2003年05期 18-19页 [查看摘要][在线阅读][下载 50k]
  • 利用分子标记技术检测玉米杂种纯度研究

    赵姝华,李玥莹,王鹤,李冬梅,张俊涛

    以 12份玉米自交系及其组配的 8个杂交种为材料 ,利用分子标记技术进行杂种纯度检测研究。采用RAPD标记方法 ,从 30 0个随机引物中 ,筛选确定了 8个杂交种种子纯度检测引物 ,制定了检测标准标记图谱。建立了海禾 3纯度分析的SCAR标记 ,该SCAR标记与RAPD标记在种子纯度检测上结果完全一致。

    2003年05期 19-21页 [查看摘要][在线阅读][下载 80k]
  • 木聚糖酶活力测定条件研究

    曾莹,钟晓凌,夏服宝

    用DNS法测木聚糖酶活力 ,分析测定条件对测定结果的影响。结果表明 ,在不同的条件下测定酶活力会得到不同的木聚糖酶活力测定值。其中 ,酶液用量、酶解反应的时间对测定结果的影响较大 ,酶液稀释度、DNS显色时间、DNS的用量 ,对测定结果也有一定的影响。测定木聚糖酶活力的适宜条件为 :酶液量 1%木聚糖液量 1 9(V V) ;酶解反应时间 10min ;DNS用量 2 - 2 .5ml;DNS显色时间 2 - 5min。

    2003年05期 21-22页 [查看摘要][在线阅读][下载 37k]
  • 尿素改善SDS-PAGE分离小分子肽的效果

    曹佐武

    目的 :探讨尿素对Tricine-SDS -PAGE系统分离小分子蛋白的影响。方法 :利用常规SDS -PAGE和Tricine -SDS - PAGE分离小分子肽 ,比较不同组成的分离胶的分离效果。结果 :调整聚丙烯酰胺凝胶的分子组成 ,使丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺的交联度为 5 .0 5 % ,能够改善小分子肽的分离效果。加入 36 %的尿素比加入甘油可以更有效分离 1kD的小肽。但尿素胶聚合太快影响分离效果。结论 :尿素改善SDS -PAGE分离小分子肽的效果 ,制作尿素胶时 ,宜采用低浓度的AP和TEMED使凝胶慢速聚合。

    2003年05期 23-24页 [查看摘要][在线阅读][下载 43k]
  • 从喜树叶中提取喜树碱工艺研究

    张志信,张仕秀,宋关斌

    为优化从喜树叶中提取喜树碱工艺条件 ,以 10kg喜树叶为原料得到的提取物中所含喜树碱的质量为指标 ,采用四因素三水平正交设计法 ,筛选影响喜树碱提取工艺的因素 ,探索最优的提取工艺条件。实验证明 ,合理的提取方法为 :pH值为 1.9的酸水法浸提 3次 ,上离子交换柱 ,用pH为 3.5的 81%的乙醇溶液洗脱 ,从 10kg喜树叶中得到 2 .74 0提取物 ,其中喜树碱的含量为 98.5 2 %。

    2003年05期 24-25页 [查看摘要][在线阅读][下载 46k]
  • 固定化海洋微藻对污水中Ni2+的吸附

    张欣华,杨海波,李英敏,吕福荣,于媛,刘艳

    采用海藻酸钠包埋小球藻和叉鞭金藻 ,制得含藻细胞的固定化胶球 ,用其对Ni2 + 进行生物吸附 ,研究了固定化小球藻和固定化叉鞭金藻对污水中Ni2 + 的吸附率。结果表明 :对于同一种固定化微藻 ,处于对数生长中期时对Ni2 + 吸附效果较好 ,且吸附过程主要在前 4h完成 ;Ni2 + 浓度越大 ,吸附率越高 ;固定化微藻比悬浮态微藻吸附率高 ;在相同的实验条件下 ,固定化小球藻比固定化叉鞭金藻吸附率高。

    2003年05期 25-27页 [查看摘要][在线阅读][下载 67k]
  • 环境因子对新组合菌系产生Vc前体KGA的影响

    仲崇斌,张忠泽,刘延吉,张文革

    通过测定氧化葡萄糖酸杆菌产酸变化 ,研究了环境因子对新菌系产酸的影响。结果显示 :新混菌体系产酸温度范围为2 4 - 33℃ ,2 8℃左右为最适 ,适当增加通气量 (2 5 - 35ml装液量 ,30 0ml三角瓶 )有利于掷孢酵母和氧化葡萄酸杆菌协调 ,通气量过大、过小都会破坏二菌比例 ,进而破坏而二菌间协调性 ,不利于 2 -酮基 -L -古龙酸的积累。

    2003年05期 27-28页 [查看摘要][在线阅读][下载 39k]
  • 不同补料发酵方式对发夫酵母产虾青素的影响

    汪洪涛,徐学明,金征宇

    对发夫酵母的不同补料发酵方式进行了研究 ,期望提高发酵产率 ,以便对工业化生产提供一定的指导作用。实验结果表明 :采用恒pH葡萄糖 -氨水流加培养 ,色素量和生物量均具有最大值 ,分别为 5 4 .3μg ml和 4 9.5 μg ml;其次是指数流加培养 ,色素量和生物量分别为 4 9.9μg ml和 4 7.4mg ml;恒pO2 流加方式下色素量和生物量分别为 34.0 4ug ml和 35 .4mg ml;恒pH葡萄糖流加方式所得的色素量和生物量最小 ,分别为 32 .3μg ml和 31.5mg ml。不同的补料发酵方式对发夫酵母生长和色素形成的影响很大。

    2003年05期 28-30页 [查看摘要][在线阅读][下载 65k]
  • 粘红酵母发酵生产类胡萝卜素培养条件的优化

    翟红梅,肖冬光,张坤生,张亮

    目的是通过测定不同条件下类胡萝卜素的产量找出粘红酵母发酵生产类胡萝卜素的最优条件。探讨了不同碳源、氮源对粘红酵母菌体生长和色素形成的影响 ,并通过正交实验确定了最佳条件组合。实验结果表明 ,最适发酵培养条件为 :蔗糖4 0g L、酵母粉 2 0g L、转速 15 0r min、装液量 30mL 5 0 0mL、发酵时间 84h。在此条件下 ,粘红酵母摇瓶发酵的生物量、类胡萝卜素含量及产量分别达 15 .17g L、718.6 μg g、10 .9mg L ,依次比初始发酵提高了 1倍、7.4倍和 15 .8倍。发酵过程动态分析表明 ,84h色素产量达最高峰。

    2003年05期 30-32页 [查看摘要][在线阅读][下载 62k]
  • 产β-呋喃果糖苷酶节杆菌发酵条件的优化

    朱桂兰,童群义,罗浩

    通过单因素和响应面分析获得节杆菌产生β -呋喃果糖苷酶的最佳培养基配方为 :蔗糖 4 .4 5 % ,酵母膏 1.4 0 % ,蛋白胨 0 .93% ,(NH4 ) 2 HPO4 0 .4 % ,MgSO4 ·7H2 O 0 .13% ,低聚乳果糖产量可以达到 16 .38%。

    2003年05期 32-34页 [查看摘要][在线阅读][下载 74k]
  • 黄孢原毛皮革菌降解苯胺的工艺研究

    刘凌,江振然,胡道伟,常天俊

    通过正交试验优化筛选了适合黄孢原毛皮革菌降解苯胺的适宜培养基和摇瓶培养降解条件。结果表明 :其适宜降解的液体培养基组成为 :蔗糖 2 0g L ,可溶性淀粉 2 0g L ,(NH4 ) 2 SO4 10g L ,Mn2 + 1μmol L ,Tween- 80 0 .3% ,蛋白胨 30g L。适宜降解的摇瓶培养条件为 :接种量为 2 0 %、pH为 7.0、温度为 30℃、培养时间为 12d。此条件下的苯胺最高降解率可达 95 .5 %。

    2003年05期 34-35页 [查看摘要][在线阅读][下载 44k]
  • 膜分离浓缩芦荟原汁

    彭银仙,蔡国兴,顾香玉,彭彩仙

    目的 :探寻膜分离浓缩芦荟原汁的最佳处理技术。方法 :对超滤膜、超滤压力、温度进行三因素三水平正交试验法考察芦荟原汁分离浓缩的条件和方案。结果 :膜分离浓缩芦荟原汁的最佳处理技术参数为UF - 1组为超滤膜 ,操作压力 0 .6MPa ,温度 35 - 4 5℃。结论 :利用膜分离技术能很好地将芦荟原汁分成三部分 :芦荟水、芦荟甙浓缩液、芦荟多糖浓缩液。

    2003年05期 35-37页 [查看摘要][在线阅读][下载 60k]
  • 在CHO-C28细胞大规模培养中提高收获次数及HBsAg的表达

    周长军,金立杰,赵小琳,陈万革,何巍,乔宏雷,杨文冲

    目的 :在CHO -C2 8细胞大规模培养过程中增加收获次数 ,延长细胞收获周期 ,提高HBsAg收获量。方法 :采用 15L转瓶培养CHO -C2 8细胞 ,分 3组 ,对比观察不同小牛血清含量及pH值对细胞生长及HBsAg表达的影响 ,优化最佳培养条件。结果 :三组比较 ,实验 1组的收获次数最多 ,达 2 5次以上 ,HBsAg的表达量最高 ,收液量最多。结论 :优化了CHO -C2 8细胞的培养条件。

    2003年05期 37-38页 [查看摘要][在线阅读][下载 39k]
  • 库存时间对冷冻鲜血浆胆碱酯酶活性影响

    刘国英,邢培清,钮泽雅

    目的 :探讨不同库存时间新鲜冰冻血浆中胆碱酯酶活性的变化情况 ,指导临床治疗有机农药中毒时 ,合理选择使用不同库存时间的新鲜冰冻血浆。方法 :按《输血技术操作规程》留取新鲜冰冻血浆标本 ,分为 5组 ,分别于当日、库存 3、6、9、12个月测定其胆碱酯酶活性。结果 :库存 6个月之内新鲜冰冻血浆中胆碱酯酶活性无显著降低 ,而库存 6个月之后新鲜冰冻血浆中胆碱酯酶活性降低较为显著。结论 :治疗急性有机农药中毒的病人 ,应选择库存 6个月 ,最好是 3个月之内的新鲜冰冻血浆。

    2003年05期 38页 [查看摘要][在线阅读][下载 17k]
  • S3307浸种盐胁迫下对黄瓜幼苗存活和生理的影响

    彭世勇,于艳,沈书文,吕红,曹英歌

    用S330 7粉剂不同浓度对“夏丰一号”黄瓜浸种 ,探讨培育抗盐性较强幼苗最适的处理浓度。结果表明 :与非盐胁迫相比 ,在 0 .5 %的NaCl胁迫下 ,用S330 7粉剂不同浓度浸种的黄瓜幼苗存活率明显提高 ,幼苗相对含水量、可溶性糖含量、叶绿素含量及光合速率下降缓慢 ,电解质外渗率增加幅度小。其中 ,以 2 0 μg LS330 7浸种处理 17h的抗盐效果最好。

    2003年05期 39-40页 [查看摘要][在线阅读][下载 41k]
  • 转基因作物及其食品的安全性

    陈颖,徐宝梁,葛毅强,李文彬

    对转基因食品存在的潜在危害进行了全面分析 ,概述了对转基因食品的安全性评价的主要方面及世界各国对转基因食品安全的态度和对转基因食品的管理模式。

    2003年05期 40-42页 [查看摘要][在线阅读][下载 57k]
  • AFLP技术在微生物分类鉴定、基因标定及遗传多样性方面的应用

    王世伟,齐小辉,刘军,马玉超,周东坡

    简述了AFLP技术的原理 ,比较了AFLP方法与其他分子标记的不同及其优缺点。着重论述了该技术在微生物分类、鉴定、基因标定及遗传多样性方面的应用。

    2003年05期 42-43页 [查看摘要][在线阅读][下载 43k]
  • 酵母双杂交系统

    吴志聪,王一飞

    就酵母双杂交系统的基本原理、主要进展和在蛋白质组研究中的应用作一综述。

    2003年05期 43-44页 [查看摘要][在线阅读][下载 44k]
  • 果树分子标记研究现状及发展前景

    张学宁,郭宝林,张开春

    从分子标记种质资源和遗传育种等方面综述了分子标记在果树上的应用 ,并对当前果树领域分子标记研究存在的问题及以后的发展前景进行了分析。

    2003年05期 45-46页 [查看摘要][在线阅读][下载 38k]
  • 基因工程菌在生物降解中的应用及其发展

    常忠义,周波,高红亮,陈立侨

    在简要阐述基因工程菌构建方法的基础上 ,系统综述和评价了基因工程菌构建方法的研究进展及其在生物降解中存在的问题。

    2003年05期 46-48页 [查看摘要][在线阅读][下载 64k]
  • 家蚕抗菌肽的特性与应用

    刘忠渊,张富春,毛新芳

    家蚕抗菌肽是在抗菌、抗病毒和抗肿瘤方面具有重要的潜在应用价值的活性肽。家蚕抗菌肽抗菌谱广 ,由于抗菌肽具有普通抗生素所不具有的一系列优点 ,其研究已经成热点。该文综述了家蚕抗菌肽理化性质、结构与功能、作用机理以及应用前景。

    2003年05期 48-50页 [查看摘要][在线阅读][下载 68k]
  • 海马生理机能及相关病理的研究进展

    邓红梅

    海马是一个重要的脑区 ,它不仅有着复杂的生理机能 ,而且与多种中枢神经系统的疾病过程有关 ,是当前神经科学研究的热点。该文介绍了研究海马的技术 (方法 )和一些研究进展。

    2003年05期 50-52页 [查看摘要][在线阅读][下载 63k]
  • 微生物产生的生物表面活性剂及其应用研究

    丁立孝,何国庆,孔青,李海军,林建强

    对生物表面活性剂的类型及其产生微生物 ,生物表面活性剂的生产和生物表面活性剂在石油开采、食品工业、农业、药品和化妆品以及环境保护等领域的潜在应用价值作了介绍 ,展现出了生物表面活性剂的广阔应用前景。

    2003年05期 52-54页 [查看摘要][在线阅读][下载 67k]
  • 几种实验技术在犁鼻神经元研究中的应用

    孙平,赵新全,赵亚军,徐世晓,赵同标,赵伟

    重点介绍了犁鼻神经元的研究现状 ,尤其是犁鼻神经元的特点及其对信息素响应格局的研究 ,免疫细胞化学、基因敲除法、染色体工程法等先进实验技术的运用 ,为进一步揭示犁鼻神经元对气味刺激的响应和犁鼻神经元之间的信号转导机制提供了技术支撑。

    2003年05期 54-55页 [查看摘要][在线阅读][下载 48k]
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