- 李金耀,马纪,单文娟,王宾,张富春
采用PCR扩增的方法 ,从大肠杆菌DH5α中克隆获得了 1 5kb的Na+ H+ 反向运输体DNA片段 ,经过测序和序列分析 ,发现该基因片段包含了nhaB基因完整的读码框架。采用DNA序列同源性分析方法 ,结果显示大肠杆菌DH5αnhaB基因与E coliK12nhaB基因同源性高达 99% ,与E coli 0 15 7:H7和Shigellaflexneri的同源性均为 98% ,与Salmonellaenterica的同源性为79 % ,表明nhaB基因在细菌中是普遍存在的一种Na+ H+ 反向运输体基因。nhaB基因与大肠杆菌的耐盐性有着密切的关系 ,编码的功能性蛋白可能在改良生物耐盐性方面具有重要意义
2003年02期 1-2页 [查看摘要][在线阅读][下载 76k] - 王晓波,刘飞鹏
为提高抗菌肽的表达 ,设计在抗菌肽基因的N端融合一段编码酸性肽的片段以减轻表达产物对宿主的毒性 ,通过含有酶切位点的接头将该融合肽基因以同向串连的方式连接成多拷贝基因 ,克隆至pUC19载体。为此 ,分段设计合成了编码天蚕素A -蜂毒素杂合肽和酸性肽的DNA片段。首先将其连接成融合肽全基因 ,然后分别与含相同粘性末端的前后接头连接。通过控制基因和接头加入的量及次序 ,可得到两侧有EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点的同向串连的多拷贝基因。选取合适拷贝数的基因 ,将其克隆至pUC19载体 ,PCR扩增和DNA测序证明多拷贝基因构建成功且基因方向相同。结果表明 ,该方法能简捷高效地获得所需的多拷贝基因 ,为提高表达产物的量打下基础
2003年02期 2-4页 [查看摘要][在线阅读][下载 91k] - 曹俊霞,金礼吉,段延龙,安利佳
根据质粒pPIC9K中信号肽基因和质粒pPIC3 5K/hTα1-RP ,构建表达质粒pPIC9K S -hTα1-RP ,通过电激法转化到毕赤酵母GS115菌株中。甲醇诱导表达融合蛋白 ,SDS -PAGE和Westernblot结果证明 ,重组基因hTα1-RP在酵母中得到了表达
2003年02期 4-6页 [查看摘要][在线阅读][下载 88k] - 苏运贞,王一飞,张美英,邢少璟,钱垂文,罗勇,李久香,熊盛,黄立
软琼脂集落形成实验检测rhNDPK -α对乳腺癌细胞株MCF - 7 S集落形成率的影响 ,结果表明 ,MCF - 7 S集落形成率随rhNDPK -α浓度增高下降 ,提示rhNDPK -α可能具有抑制乳腺癌细胞株MCF - 7 S转移作用 ;MTT法检测rhNDPK -α分别联用丝裂霉素C、5 -氟尿嘧啶和千金藤碱对MCF - 7 S的增殖影响 ,结果显示 ,rhNDPK -α分别联用三种化疗物与这三种化疗药物单独作用于MCF - 7 S无明显差异 (P >0 0 5 ) ,提示rhNDPK -α对丝裂霉素C、5 -氟尿嘧啶和千金藤碱没有增敏作用。
2003年02期 6-8页 [查看摘要][在线阅读][下载 80k] - 赵涛,蔡继业,王小燕
目的 :利用原子力显微镜 (atomicforcemicroscopy ,简称AFM)观察红细胞 (redbloodcells,简称RBC)与天花粉蛋白 (tricho santhin ,简称TCS)作用后形态上的变化以及细胞膜的损伤情况。方法 :将 1 2mg ml的TCS溶液与红细胞的PBS缓冲溶液 (pH 7 4 )按 1∶4的比例混合 ,在 35℃温度下作用 2h后 ,用原子力显微镜观察受损的红细胞 ,与正常红细胞进行对比。结果 :(1)与正常红细胞相比 ,与TCS作用后的红细胞的高度明显降低 ,凹陷部分更加明显。 (2 )对红细胞上小范围扫描成像的结果显示 ,受损后的红细胞膜表面结构发生了变化 ,膜表面颗粒排列的特征依然存在 ,但颗粒之间开始产生连接。结论 :TCS能损伤红细胞膜 ,改变细胞膜的微结构 ,引起红细胞的溶血作用
2003年02期 8-9页 [查看摘要][在线阅读][下载 56k] - 王宜磊
为了更好开发利用漆酶 ,用邻联甲苯胺法比较分析了彩绒革盖菌、毛栓菌和多孔菌在液体培养时的产酶曲线、酶作用的最适pH值、最适酶解温度及无机离子对酶活的影响。结果表明 ,不同漆酶产酶曲线不同 ,彩绒革盖菌和多孔菌 ,第 9d达产酶高峰 ,峰值活力分别达 395 6u ml和 4 12 2u ml;毛栓菌 ,第 11d达到产酶高峰 ,峰值酶活较不同真菌漆酶的性质研究高达 5 5 4 6u ml。漆酶性质有明显差别 ,最适酶解温度不同 ,彩绒革盖菌和多孔菌漆酶最适酶解温度为 2 5℃ ;毛栓菌为 30℃ ;最适酶解pH值有差异 ,彩绒革盖菌漆酶最适酶解pH值为 4 5 ,毛栓菌为 4 0 ,多孔菌为 4 2 ;不同离子对酶活的影响不同 :K+ 、Zn2 + 、对彩绒革盖菌所产漆酶有激活作用 ;K+ 、Zn2 + 、Cu2 + 对毛栓菌所产漆酶有激活作用 ;Mn2 + 、Mg2 + 对多孔菌所产漆酶有激活作用 ;Ag+ 、Fe3+ 对三种菌所产漆酶均有明显抑制作用
2003年02期 9-10页 [查看摘要][在线阅读][下载 45k] - 陈毅坚,张灼,王艳,苏源,张睿
报道了从云南红豆杉 (TaxusYunnanensis)树皮和枝条中分离得到的 5 2株内生真菌中 ,有 19株菌的发酵产物经TLC分析和HPLC检测验证后产紫杉醇或紫杉烷类物质。其中紫杉醇含量在 1 以上的菌株有 8株。TAX - 4 7(茎点霉属 )和TAX - 4 9(组丝核菌属 )的紫杉醇得率分别为 4 7 30 2 μg L和 31 0 6 μg L ,TAX - 2 5 (茎叶核菌属 )巴可亭Ⅲ得率为 74 4 2 μg L ,这些菌株值得进一步研究
2003年02期 10-11页 [查看摘要][在线阅读][下载 49k] - 兰时乐,陈娴,李慧,刘权国,陈海荣,肖宏英,江来辉
从腐木上分离到 1株纤维素酶活较高的野生纤维素酶产生菌TP0 1,经鉴定为绿色木霉 (Trichodermaviride)。以TP0 1为出发菌株 ,经紫外线、亚硝基胍、硫酸二乙酯和LiCl等物理化学诱变处理 ,最后得到 1株高产突变株TP12 0 2。通过对培养基中氮源、碳源、培养温度、培养时间、培养基的含水量、培养基的起始pH、培养基中葡萄糖含量的研究 ,测定TrichodermavirideTP12 0 2纤维素酶的CMC和滤纸酶活 ,找到了产纤维素酶的较佳条件 ,即 ,稻草粉 :麦麸 =4∶1,物料∶水份 =1∶0 75～ 1,以 (NH4 ) 2 SO4 或NH4 Cl为氮源 ,葡萄糖含量为 1%～ 2 % ,起始pH为 7 5 ,在 30℃下培养 96～ 12 0h左右 ,其酶活力为最高 ,每克干曲CMC酶和滤纸酶活分别达到 2 890 0U、6 0 4U ,是出发菌株的 3倍和 6倍。
2003年02期 12-13页 [查看摘要][在线阅读][下载 40k] - 陆利霞,谷文英,丁霄霖
目的 :研究姬松茸产活性多糖的发酵动力学。方法 :以 5L发酵罐分批发酵和基于Logistic和Luedeking&Piret方程。结果 :菌体生长和胞内活性多糖生成是同步的 ;发酵液流变特性参数稠度系数 (K)先增后降 ,而流变特性指数 (n)先降后升。得到描述分批发酵过程的动力学数学模型和模型参数 ,同时对实验数据与模型参数进行了验证比较 ,模型计算与实验结果较好拟合。结论 :产活性多糖属于偶联型以及模型可用于预测发酵过程
2003年02期 13-15页 [查看摘要][在线阅读][下载 63k] - 涂俊铭
对几种类胡萝卜素促进因子进行初步研究 ,从中选出对红酵母的色素产量和生物量有显著影响的促进因子核黄素和番茄汁共同实验 ,结果显示红酵母的色素产量和生物量分别比对照增加了 71 31%和 6 9 95 %。
2003年02期 15-16页 [查看摘要][在线阅读][下载 40k] - 宋茂勇,林建强,李清心,曲音波,魏玉华
菌株G31是从胜利油田污水中分离到的 1株假单胞菌 (Pseudomonassp ) ,该菌株在石油液体培养基中能够生长发酵 ,产生有机酸和表面活性物质 ,可以应用于微生物三次采油。菌株G31可以降解和乳化石油、降低石油的粘度 ,其产物可以降低油水的界面张力 ,增加石油的流动性。室内岩心试验结果表明利用菌株G31发酵液进行驱油可使原油采收率提高 10 %以上。
2003年02期 16-18页 [查看摘要][在线阅读][下载 68k] - 李玉昌,林俊堂,张会勇,李文强,魏明旭,沈萍,韩鸿鹏,徐存拴
为了得到一段EST所在基因的全长 ,采用了快速扩增cDNA末端 (RACE)、cDNA文库构建、λphage测序引物与特异性引物结合、非放射性探针进行噬菌体原位杂交等方法分别对该基因进行了克隆 ,结果得到了一致的全长cDNA ,三种不同实验方法的应用 ,为更方便、有选择性地克隆全长cDNA基因奠定了基础
2003年02期 18-19页 [查看摘要][在线阅读][下载 51k] - 单世华,李春娟,张君诚,庄伟建
常规的农杆菌质粒DNA提取常采用碱裂解和酚、氯仿提纯方法 ,得率较低 ,一般在 5 0ng μl以下。针对常规碱裂解法的不足 ,利用含有pCGⅡ双价载体的LBA4 4 0 4菌株通过增加菌液收集量、改变提取流程中的反应条件等对常规方法进行了改良 ,去除了酚、氯仿提纯过程 ,减少了提取过程对人体的伤害 ,得率一般在 0 .5～ 2 μg μl。所提取质粒DNA可直接用于PCR、限制性酶切等分子生物学试验
2003年02期 19-20页 [查看摘要][在线阅读][下载 46k] - 曾大兴
报道一种高纯度、高分子量真菌基因组DNA的快速小量提取方法。该法制备的DNA降解少 ,分子量均在 4 8 5kb以上 ;纯度高 ,所有样品的A2 6 0 2 80 都在 1 7～ 2 0之间 ;产率也很高 ,一般从 5 0 0mg干菌丝可稳定获得 5 30 μg的DNA。所获得的DNA适用于进行RAPD分析
2003年02期 20-21页 [查看摘要][在线阅读][下载 47k] - 张鹏,王世伟,解玉红,张彦丰,葛菁萍,平文祥,马玺,赵凯,齐小辉,马玉超,周东坡
树状多节孢 (Nodulisporiumsylviforme)为中国新记录属种 ,首次发现它可产生特效抗癌药物紫杉醇 ,国内外尚未见其DNA提取等方面的研究报道。为了获得高质量的DNA ,利用单因素试验对其细胞总核酸的提取方法进行了探索。找到了一套适合紫杉醇产生菌DNA的提取较为简便易行可靠的方法。用此法直接从紫杉醇产生菌中提取DNA ,并将所提取DNA进行随机引物扩增 (RAPD) ,得到了较清晰的扩增图谱
2003年02期 21-23页 [查看摘要][在线阅读][下载 82k] - 曲波,韩晓云,李庆章,郭德栋
以白花甜菜特异的DNA重复序列 10 5 4作为探针 ,PCR法进行标记 ,对 16个株系共 2 6 4株进行了斑点杂交检测。结果表明 ,其后代总传递率达 5 0 4 % ,其中株系 11和株系 14的传递率高达 10 0 %和 83 3%。对高频传递株系的进一步研究 ,为确定其是否带有无融合生殖基因及进一步缩小无融合生殖基因的寻找范围提供了必要的研究基础。
2003年02期 23-24页 [查看摘要][在线阅读][下载 45k] - 房经贵,高志红,陶建敏
以葡萄品种‘Perlette’(Vitisvinifera)的冬芽为材料 ,研究了提取葡萄芽总RNA的方法 ,同时指出提取RNA时的注意事项。该方法具有可靠性高 ,易于大量制备 ,所提取的RNA质量高等优点。
2003年02期 24-25页 [查看摘要][在线阅读][下载 47k] - 冮宏映,李洪钊
目的 :探讨一种简化的高效获取用于表达重组蛋白的巴斯德毕赤酵母高拷贝重组子的新方法 ,即多重转化筛选法。方法 :按经典方法转化宿主菌和利用G4 18多拷贝筛选法从转化子中筛选出含目的基因表达盒拷贝数最高的菌株 ,然后以之作为新一轮的转化宿主菌。如此重复进行数轮上述转化筛选过程 ,直到获得含有尽可能多拷贝目的基因表达盒的重组子 ;同时将此方法 ,即多重转化筛选法与经典方法进行比较。结果 :与经典方法相比 ,多重转化筛选法通过筛选较少量转化子即可轻而易举地获得较多的高拷贝重组子 ,工作量更小 ,效率更高。结论 :多重转化筛选法是一种更高效地获取毕赤酵母高拷贝重组子的新方法。
2003年02期 26-27页 [查看摘要][在线阅读][下载 44k] - 徐敬明,冯尚彩
利用原子吸收分光光度计测定了镉在中华蟾蜍不同组织中的含量 ,并对其在不同器官组织中的分布规律进行了分析。结果表明 :镉在中华蟾蜍不同组织中具有选择性 ,主要积累在肠和肝脏中 ,其次是精巢、皮肤、卵巢和肌肉 ,而骨骼中没有积累
2003年02期 27页 [查看摘要][在线阅读][下载 20k] - 刘宇峰,陈丽娟,王金英,于冲,曲晓军,孙建华,夏海华
对用DEAE纤维素 -SephadexG - 75层析所得到的 4万u g的纯酶进行分子量、等电点、最适作用条件、稳定性及水解性质等进行试验
2003年02期 28页 [查看摘要][在线阅读][下载 20k] - 冯治平,刘达玉,黄丹
从蘑菇组织中提取邻苯二酚粗酶 ,利用丝素蛋白在甲醇作用下 ,其分子结构由可溶性randomcoil向不容性 β -sheet发生转变 ,从而将邻苯二酚粗酶固定在丝素蛋白膜中 ,制得邻苯一酚酶传感器。该传感器在pH6 0的KH2 PO4 -Na2 HPO4 工作介质中具有良好的响应特性 ,工作线性范围为 1 0× 10 - 5- 2 5× 10 - 4mol L ,检测限 5 0× 10 - 6 mol L ,响应时间 2min。酶经丝素蛋白的固定后具有较强的耐热性能 ,并能比较长时间保持酶的活性。该传感器在KH2 PO4 -Na2 HPO4 缓冲溶液的保存下 ,其使用寿命可达 2个月以上
2003年02期 29-30页 [查看摘要][在线阅读][下载 38k] - 朱劼,邬敏辰
研究了培养基组分和培养条件对黑曲霉WM2 0 - 11菌株合成 β-甘露聚糖酶的影响。最适培养基和发酵条件为 :水 12mL ,麸皮 8g,豆饼粉 2g,魔芋粉 0 4g ,玉米浆 0 5mL ,(NH4 ) 2 SO4 1 0 % ,CaCl2 0 1%、MgSO4 0 1% ,KH2 PO4 0 2 % (相对于固体料的百分数 ) ,自然pH ;31～ 32℃固体静置培养 84h ,WM2 0 - 11产 β -甘露聚糖酶活力达 12 95U g干曲。该酶最适作用温度和pH分别为 70℃和 3 5 ;在pH 2 5～ 7 0之间稳定 ,保温 30min的半失活温度t1 2 为 5 8℃ ;Ca2 + 对酶有激活作用 ,而Pb2 + 、Co2 + 、Fe3+ 对酶有抑制作用
2003年02期 30-32页 [查看摘要][在线阅读][下载 61k] - 杨阳,陆和生
通过用从动物组织中抽提出的原胶原脯氨酸羟基化酶 ,在Fe2 + 、α-酮戊二酸和还原剂如抗坏血酸盐等物质存在的条件下 ,根据试验结果 ,不能排除其可把水溶液中游离的脯氨酸羟化为羟脯氨酸的可能性。并且反应体系的pH对反应有很大的影响 ,试验找出最适的反应pH ,反应液的为 3 5 2 ;抽提液的为 6 95 ,与文献中原胶原脯氨酸羟基化酶羟化原胶原中脯氨酸的有很大差别
2003年02期 32-33页 [查看摘要][在线阅读][下载 43k] - 高家合,李天飞,王革,李梅云,廖文程,刘勇,李松,王颖琦
在温度 30± 0 5℃、转速 180r/min的条件下 ,用Bt发酵培养液对Bt33菌株进行振荡培养 ,考察不同接种量和液培时间对孢子含量的影响。结果表明 ,将孢子含量为 2 5× 10 9CFU ml的母液按 1%～ 15 % (V V)的比例接种后培养 33～ 5 0h ,9%和 12 %接种量处理能产生 8 5× 10 9CFU ml以上的孢子浓度。通过拟合逻辑斯蒂生长模型 ,发现该菌在上述液培条件下的最大孢子含量为 1 0 3× 10 1 0 CFU ml。
2003年02期 33-34页 [查看摘要][在线阅读][下载 46k] - 仲崇斌,张忠泽,张文革
通过测定氧化葡萄糖酸杆菌产酸变化 ,研究了新菌系混菌状态对产酸的影响。结果显示 :新混菌体系中 ,种液KGA为4 1- 5 5mg ml,混合菌菌群氧化葡萄糖酸杆菌 掷孢酵母为 2 6 - 35 :1,混菌生物量达 0 4 6 - 0 6 0 (OD值 ) ,有利于二菌在发酵中相互协调 ,促进产酸 ,调节接种生物量可增加产酸速度 ,缩短产酸周期 ,但不影响最终产酸量
2003年02期 34-35页 [查看摘要][在线阅读][下载 43k] - 张红梅,王俊丽
利用丰香草莓叶片作外植体 ,通过体外实验培养的方法 ,进行组织培养与再生 ,研究不同培养基配比对草莓叶片不定芽诱导的影响。结果表明 ,诱导叶盘再生不定芽的最佳外植体培养基为MS +6 -BA(1 5mg l) +IAA(1 5mg l)。表明只有细胞分裂素和生长素的浓度相当时 ,才能有效的诱导不定芽再生
2003年02期 35-36页 [查看摘要][在线阅读][下载 40k] - 夏海华,曲晓军,孙建华,于冲,刘宇峰,王金英
采用白色葡萄球菌ATCC2 6 10 4、流感嗜血杆菌ATCC5 85 2 8、卡它布郎汉姆氏菌ATCC2 910 8和甲型溶血性链球菌ATCC32 2 12为气管炎疫苗滴鼻剂的生产菌株。选择适宜的吸收促进剂和凝胶剂 ,将传统的气管炎疫苗针剂改制成气管炎溶菌菌苗凝胶滴鼻剂。通过动物模型实验 ,观察凝胶滴鼻剂和针剂对小白鼠的非特异性免疫功能的影响[1 ] 。结果 ,气管炎疫苗凝胶滴鼻剂对小白鼠的非特异性免疫功能有明显的调节作用 ,与针剂相比 ,对小白鼠的非特异性免疫功能的调节作用无差异。
2003年02期 36-37页 [查看摘要][在线阅读][下载 37k] - 曾虹燕,方芳,蒋丽娟
应用超临界CO2 萃取技术从大豆中直接提取大豆油和纯度为 95 98%的大豆磷脂。探讨了超临界CO2 萃取的压力、温度、流量、时间等条件对大豆油和大豆磷脂的影响 ,确定其最佳萃取条件 :萃取压力 2 5MPa ,温度 5 0℃ ,CO2 流量 30kg h ,萃取时间15 0min ,大豆磷脂夹带剂乙醇的流量为 3kg h ,得率分别为 15 72 %和 1 95 4 %。
2003年02期 37-39页 [查看摘要][在线阅读][下载 80k] - 张立国,张琚2003年02期 39-40页 [查看摘要][在线阅读][下载 62k]
- 张智俊,罗淑萍,谭晓风
介绍了一种新的基因表达快速分析技术 -MPSS技术的基本原理、技术路线及其优点和应用。
2003年02期 40-41页 [查看摘要][在线阅读][下载 49k] - 薛淮,刘敏,张纯花,潘毅2003年02期 42-43页 [查看摘要][在线阅读][下载 39k]
- 胡利勇,钟卫鸿
纤维素酶基因克隆及其功能性氨基酸的研究有助于深入探索纤维素酶生物合成和作用机制以及构建高效分解纤维素基因工程菌。迄今 ,多种来源的纤维素酶基因已经在不同的原核或真核表达系统中获得成功。对氨基酸序列及三维结构的研究 ,同时结合定点诱变技术 ,目前对第 5、6、7、9、4 5糖基水解酶族中纤维素酶催化机制和功能氨基酸有了更多的认识 ,这有助于新纤维素酶分子的构建
2003年02期 43-45页 [查看摘要][在线阅读][下载 67k] - 杨金水,袁红莉,陈文新
综述了国内外锰过氧化物酶 (MnP)研究的最新动态。MnP是一种含有血红素的过氧化物酶 ,仅在白腐菌中发现。从产生MnP的微生物、MnP对Mn2 + 的依赖性、催化机制、蛋白质研究进展、基因结构和基因表达的研究以及工业应用前景方面进行了系统概述
2003年02期 45-47页 [查看摘要][在线阅读][下载 75k] - 宫春波,刘鹭,谢丽源,贺稚非
论述了离子注入微生物育种的三大特征 ,介绍了微生物接受注入离子的方法、离子注入机的简单结构和工作情况。概述了近几年来离子注入微生物 ,改良、选育优良工业微生物菌株的应用研究情况 ,分析了今后离子注入微生物育种的发展趋势。
2003年02期 47-49页 [查看摘要][在线阅读][下载 66k] 下载本期数据